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鹅膏毒肽酶联免疫试剂盒研制及其应用
1
作者
谭建林
马雪涛
+4 位作者
冯雷
方淑兵
张会香
牛之瑞
彭珍华
《食品研究与开发》
2025年第7期135-140,163,共7页
基于酶联免疫吸附原理,开展蘑菇中鹅膏毒肽酶联免疫试剂盒的研制。采用N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基卡巴朴胺作为活化剂,制备鹅膏毒肽半抗原,并进一步与钥孔帽贝血蓝蛋白和牛血清蛋白偶联制备免疫原和包被原,再利用免...
基于酶联免疫吸附原理,开展蘑菇中鹅膏毒肽酶联免疫试剂盒的研制。采用N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基卡巴朴胺作为活化剂,制备鹅膏毒肽半抗原,并进一步与钥孔帽贝血蓝蛋白和牛血清蛋白偶联制备免疫原和包被原,再利用免疫原免疫Balb/c小鼠来制备单克隆抗体。通过对抗原最佳包被量以及酶标抗体最佳稀释倍数等进行优化,研制鹅膏毒肽酶联免疫试剂盒,并对灵敏度、正确度、精密度进行评价。该试剂盒的线性范围为0.1~3.6 ng/mL,半抑制浓度(IC_(50))为0.5 ng/mL。试剂盒对于α-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽的交叉反应率分别为32%和38%,而结构类似物鬼笔毒肽的交叉反应率<0.50%,试剂盒具有良好的特异性。对于β-鹅膏毒肽的添加回收率为101.0%~106.0%,批内变异系数≤5.22%,批间变异系数≤9.24%。该试剂盒适用于蘑菇中鹅膏毒肽的现场筛查和快速检测。
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关键词
蘑菇
鹅膏毒肽
酶联免疫吸附
试剂盒
快速检测
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职称材料
鹅膏毒素胶体金酶联免疫层析试纸条的研制及其应用
2
作者
谭建林
彭珍华
+6 位作者
孙皓
杨黎
王亚琴
方淑兵
辛燕斌
马雪涛
牛之瑞
《食品安全质量检测学报》
2025年第8期69-75,共7页
目的基于免疫层析技术,研制检测蘑菇中鹅膏毒素的酶联免疫试纸条。方法采用N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基卡巴朴胺[N-(3-dimethylaminopropyl)-N’-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC]作...
目的基于免疫层析技术,研制检测蘑菇中鹅膏毒素的酶联免疫试纸条。方法采用N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基卡巴朴胺[N-(3-dimethylaminopropyl)-N’-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC]作为活化剂,引入6-氨基己酸得到鹅膏毒素半抗原,并进一步与钥孔帽贝血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)和牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联制备免疫原和包被原,然后利用免疫原免疫Balb/c小鼠来制备单克隆抗体。通过制备胶体金和金标抗体,优化包被抗原、二抗浓度及提取液,成功研制鹅膏毒素胶体金免疫层析试纸条,并对其进行交叉反应、稳定性、重复性、正确性进行了评价。结果试纸条对α-鹅膏毒素、β-鹅膏毒素和γ-鹅膏毒素的检出限分别为100、20和50μg/kg。灵敏度为100%,假阳性率和假阴性率为0%,且与现有仪器方法检测结果一致,同其他蘑菇毒素无交叉反应。结论该试纸条具有操作简便,重复性高、稳定性好的特点,适用于蘑菇中鹅膏毒素的现场筛查和快速检测。
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关键词
鹅膏毒素
胶体金
免疫层析试纸条
蘑菇
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职称材料
94份玉米中6类真菌毒素检测及污染情况分析
被引量：
6
3
作者
栾杰
陈姗姗
+2 位作者
林海潮
里南
刘红兵
《粮食与饲料工业》
CAS
2023年第4期53-58,63,共7页
建立了玉米的一步法提取6类真菌毒素同时检测的分析方法,共分析了94份玉米中6类真菌毒素的污染情况及地域分布情况,为监测饲料质量提供技术指导。称取的样品添加6类真菌毒素同位素内标,以84%乙腈水和50%甲醇水作为提取试剂,以2 mmol/L...
建立了玉米的一步法提取6类真菌毒素同时检测的分析方法,共分析了94份玉米中6类真菌毒素的污染情况及地域分布情况,为监测饲料质量提供技术指导。称取的样品添加6类真菌毒素同位素内标,以84%乙腈水和50%甲醇水作为提取试剂,以2 mmol/L乙酸铵0.1%甲酸水溶液和甲醇/乙腈和水为流动相梯度洗脱,采用液相色谱-串联质谱进行检测。94份玉米中6类真菌毒素的检出率为98%,单种毒素检出率最高的是伏马毒素B_(1)和B_(2),高达88%,呕吐毒素和赭曲霉毒素A检出率最低,均未检出。伏马毒素B_(1)和B_(2)、黄曲霉毒素B_(1)、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素的最高残留量分别是89.1 mg/kg、76.4μg/kg、3.95×10^(3)mg/kg和7.0 mg/kg。地域分布上具有分布范围广,污染较严重的特点。建立的6类真菌毒素检测方法操作简单、结果准确,结果分析对玉米中真菌毒素污染检测和防控具有重要意义。
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关键词
真菌毒素
液相色谱-串联质谱
污染情况
真菌毒素同位素内标
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职称材料
题名
鹅膏毒肽酶联免疫试剂盒研制及其应用
1
作者
谭建林
马雪涛
冯雷
方淑兵
张会香
牛之瑞
彭珍华
机构
云南省产品质量监督检验研究院/国家热带农副产品质量检验检测中心
青岛普瑞邦生物工程有限公司
昆明医科大学
出处
《食品研究与开发》
2025年第7期135-140,163,共7页
基金
国家市场监督管理总局技术保障专项项目(2022YJ25)
云南省市场监督管理局科技计划项目(2023YSJK03)。
文摘
基于酶联免疫吸附原理,开展蘑菇中鹅膏毒肽酶联免疫试剂盒的研制。采用N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基卡巴朴胺作为活化剂,制备鹅膏毒肽半抗原,并进一步与钥孔帽贝血蓝蛋白和牛血清蛋白偶联制备免疫原和包被原,再利用免疫原免疫Balb/c小鼠来制备单克隆抗体。通过对抗原最佳包被量以及酶标抗体最佳稀释倍数等进行优化,研制鹅膏毒肽酶联免疫试剂盒,并对灵敏度、正确度、精密度进行评价。该试剂盒的线性范围为0.1~3.6 ng/mL,半抑制浓度(IC_(50))为0.5 ng/mL。试剂盒对于α-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽的交叉反应率分别为32%和38%,而结构类似物鬼笔毒肽的交叉反应率<0.50%,试剂盒具有良好的特异性。对于β-鹅膏毒肽的添加回收率为101.0%~106.0%,批内变异系数≤5.22%,批间变异系数≤9.24%。该试剂盒适用于蘑菇中鹅膏毒肽的现场筛查和快速检测。
关键词
蘑菇
鹅膏毒肽
酶联免疫吸附
试剂盒
快速检测
Keywords
mushroom
amanitin
enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)
kit
quick test
分类号
TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
鹅膏毒素胶体金酶联免疫层析试纸条的研制及其应用
2
作者
谭建林
彭珍华
孙皓
杨黎
王亚琴
方淑兵
辛燕斌
马雪涛
牛之瑞
机构
云南省产品质量监督检验研究院/国家热带农副产品质量检验检测中心
青岛普瑞邦生物工程有限公司
出处
《食品安全质量检测学报》
2025年第8期69-75,共7页
基金
国家市场监督管理总局技术保障专项(2022YJ25)
云南省市场监督管理局科技计划项目(2023YSJK03)。
文摘
目的基于免疫层析技术,研制检测蘑菇中鹅膏毒素的酶联免疫试纸条。方法采用N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基卡巴朴胺[N-(3-dimethylaminopropyl)-N’-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC]作为活化剂,引入6-氨基己酸得到鹅膏毒素半抗原,并进一步与钥孔帽贝血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)和牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联制备免疫原和包被原,然后利用免疫原免疫Balb/c小鼠来制备单克隆抗体。通过制备胶体金和金标抗体,优化包被抗原、二抗浓度及提取液,成功研制鹅膏毒素胶体金免疫层析试纸条,并对其进行交叉反应、稳定性、重复性、正确性进行了评价。结果试纸条对α-鹅膏毒素、β-鹅膏毒素和γ-鹅膏毒素的检出限分别为100、20和50μg/kg。灵敏度为100%,假阳性率和假阴性率为0%,且与现有仪器方法检测结果一致,同其他蘑菇毒素无交叉反应。结论该试纸条具有操作简便,重复性高、稳定性好的特点,适用于蘑菇中鹅膏毒素的现场筛查和快速检测。
关键词
鹅膏毒素
胶体金
免疫层析试纸条
蘑菇
Keywords
amanitin
colloidal gold
immunochromatographic test strip
mushroom
分类号
TS219 [轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程]
O657 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
94份玉米中6类真菌毒素检测及污染情况分析
被引量：
6
3
作者
栾杰
陈姗姗
林海潮
里南
刘红兵
机构
云南省疾病预防控制中心
陕西省产品质量监督检验研究院
青岛普瑞邦生物工程有限公司
出处
《粮食与饲料工业》
CAS
2023年第4期53-58,63,共7页
文摘
建立了玉米的一步法提取6类真菌毒素同时检测的分析方法,共分析了94份玉米中6类真菌毒素的污染情况及地域分布情况,为监测饲料质量提供技术指导。称取的样品添加6类真菌毒素同位素内标,以84%乙腈水和50%甲醇水作为提取试剂,以2 mmol/L乙酸铵0.1%甲酸水溶液和甲醇/乙腈和水为流动相梯度洗脱,采用液相色谱-串联质谱进行检测。94份玉米中6类真菌毒素的检出率为98%,单种毒素检出率最高的是伏马毒素B_(1)和B_(2),高达88%,呕吐毒素和赭曲霉毒素A检出率最低,均未检出。伏马毒素B_(1)和B_(2)、黄曲霉毒素B_(1)、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素的最高残留量分别是89.1 mg/kg、76.4μg/kg、3.95×10^(3)mg/kg和7.0 mg/kg。地域分布上具有分布范围广,污染较严重的特点。建立的6类真菌毒素检测方法操作简单、结果准确,结果分析对玉米中真菌毒素污染检测和防控具有重要意义。
关键词
真菌毒素
液相色谱-串联质谱
污染情况
真菌毒素同位素内标
Keywords
mycotoxin
Liquid chromatography-tandem mass spectrometry
pollution situation
mycotoxin isotope internal standard
分类号
S513 [农业科学—作物学]
O657.63 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鹅膏毒肽酶联免疫试剂盒研制及其应用
谭建林
马雪涛
冯雷
方淑兵
张会香
牛之瑞
彭珍华
《食品研究与开发》
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
鹅膏毒素胶体金酶联免疫层析试纸条的研制及其应用
谭建林
彭珍华
孙皓
杨黎
王亚琴
方淑兵
辛燕斌
马雪涛
牛之瑞
《食品安全质量检测学报》
2025
0
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职称材料
3
94份玉米中6类真菌毒素检测及污染情况分析
栾杰
陈姗姗
林海潮
里南
刘红兵
《粮食与饲料工业》
CAS
2023
6
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