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表达猪瘟病毒E0-E2基因重组腺病毒疫苗在小鼠体内的存留时间分析
被引量：
1
1
作者
熊贝嘉
张会
+3 位作者
孙永科
范根成
张恒
杨玉艾
《动物医学进展》
北大核心
2019年第3期49-53,共5页
研究E0-E2基因和表达蛋白及抗体水平在小鼠体内的最长存留时间,以确定表达猪瘟病毒E0-E2基因重组腺病毒疫苗(rAd-E0-E2)在小鼠体内的存留规律。本试验选用30只SPF级别的健康小鼠,随机分为A、B组,各免疫组以1×106 IFU/只剂量接种rAd...
研究E0-E2基因和表达蛋白及抗体水平在小鼠体内的最长存留时间,以确定表达猪瘟病毒E0-E2基因重组腺病毒疫苗(rAd-E0-E2)在小鼠体内的存留规律。本试验选用30只SPF级别的健康小鼠,随机分为A、B组,各免疫组以1×106 IFU/只剂量接种rAd-E0-E2,对照组注射生理盐水。A组20只于接种后不同特定时间(2只/次)采集血液和组织进行PCR和IFA检测E0-E2基因及表达蛋白残留情况;B组10只于接种后1、3、5、7、10、14、21、28d采集血清检测猪瘟抗体水平。PCR和IFA检测显示,在接种12、24、36h后肝、脾、肾组织和血清中E0-E2基因和蛋白检出率为100%,接种48h后小鼠肝、脾组织检出率为50%,肾组织和血清检出率为100%。接种72h以后,小鼠血液和组织检测均为阴性。接种后7d试验组体内抗体阳性率为40%,接种后10d小鼠体内抗体阳性率为100%,抗体阻断率在43%～51.2%,接种后28d,猪瘟抗体阳性率为100%,抗体阻断率在75.6%～87.5%。表明rAd-E0-E2在小鼠体内的存留时间最长72h,接种时间与E2抗体水平呈正相关。
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关键词
猪瘟病毒
E0-E2基因
重组腺病毒疫苗
存留规律
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职称材料
1群4型禽腺病毒的分离鉴定及Fiber-2蛋白的免疫效果分析
被引量：
6
2
作者
程增青
范根成
+4 位作者
窦小龙
刘红祥
申茂欣
徐全刚
杨汉春
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第10期2463-2471,共9页
旨在鉴定河南某蛋鸡场以心包积液、肝肿大出血为特征的病原,并对病原的免疫原性蛋白进行表达和效果分析。本研究采用病毒分离、血清学试验、PCR检测及测序分析、动物回归试验、大肠杆菌表达、蛋白纯化、攻毒保护等方法进行研究。结果显...
旨在鉴定河南某蛋鸡场以心包积液、肝肿大出血为特征的病原,并对病原的免疫原性蛋白进行表达和效果分析。本研究采用病毒分离、血清学试验、PCR检测及测序分析、动物回归试验、大肠杆菌表达、蛋白纯化、攻毒保护等方法进行研究。结果显示,所采集样品经卵黄囊途径接种7日龄SPF鸡胚,盲传2代后获得病毒;PCR可扩增出约900 bp的Hexon基因片段,经测序,其Hexon基因与血清C4型毒株的相似性为100%;血清中和试验结果表明分离的禽腺病毒为1群血清4型禽腺病毒,命名为HN-ZK株。该毒株可在鸡胚原代肝细胞上产生CPE,病毒含量可达10^(7.5)TCID50·0.1 mL^-1。动物回归试验表明,该分离毒株可使35日龄SPF鸡100%(10/10)表现出发病症状。以分离株的DNA为模板,利用大肠杆菌原核表达系统,获得相对分子质量约为33 ku的Fiber-2蛋白,离心浓缩、纯化后蛋白含量为300 mg·mL^-1。将表达的Fiber-2蛋白用不同的剂量免疫SPF鸡,结果表明20μg·只^-1的剂量能使鸡完全抵抗强毒株的攻击,说明Fiber-2蛋白具有较好的免疫原性。本研究可为禽心包积水-肝炎综合征的诊断和基因工程亚单位疫苗的研制提供数据参考。
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关键词
I群禽腺病毒
鉴定
Fiber-2蛋白
亚单位疫苗
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职称材料
禽脑脊髓炎病毒VR株的致病性研究
被引量：
1
3
作者
王红
曹志
+2 位作者
韩乃君
郭伟伟
范根成
《动物医学进展》
北大核心
2016年第10期57-59,共3页
为探索禽脑脊髓炎病毒强毒VR株对SPF鸡的致病性,开展了不同接种途径和不同日龄SPF鸡的致病力试验。不同接种途径致病力试验结果表明,AEV VR株口服后不能引起发病;刺种、肌肉注射途径接种随着日龄增大,发病率降低;脑内注射途径接种可引...
为探索禽脑脊髓炎病毒强毒VR株对SPF鸡的致病性,开展了不同接种途径和不同日龄SPF鸡的致病力试验。不同接种途径致病力试验结果表明,AEV VR株口服后不能引起发病;刺种、肌肉注射途径接种随着日龄增大,发病率降低;脑内注射途径接种可引起试验鸡全部发病。最小致病量试验结果显示,VR株脑内注射攻毒的最小致病量为10^(2.0) EID_(50)。不同日龄SPF鸡的致病力试验结果表明,随着试验鸡日龄的增大,其致病力略有差异,日龄越小,发病率越高。结果表明,AEV VR株脑内攻毒70日龄内SPF鸡的发病率为80%及以上,攻毒剂量为10^(4.0)EID_(50)。
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关键词
禽脑脊髓炎病毒VR株
接种途径
日龄
最小致病量
致病性
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职称材料
题名
表达猪瘟病毒E0-E2基因重组腺病毒疫苗在小鼠体内的存留时间分析
被引量：
1
1
作者
熊贝嘉
张会
孙永科
范根成
张恒
杨玉艾
机构
云南农业大学
动物
医学院
青岛易邦生物工程有限公司/动物基因工程疫苗国家重点实验室
山东莱钢绿建国际建筑
工程
有限公司
出处
《动物医学进展》
北大核心
2019年第3期49-53,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31560704)
动物基因工程疫苗国家重点实验室经费资助
文摘
研究E0-E2基因和表达蛋白及抗体水平在小鼠体内的最长存留时间,以确定表达猪瘟病毒E0-E2基因重组腺病毒疫苗(rAd-E0-E2)在小鼠体内的存留规律。本试验选用30只SPF级别的健康小鼠,随机分为A、B组,各免疫组以1×106 IFU/只剂量接种rAd-E0-E2,对照组注射生理盐水。A组20只于接种后不同特定时间(2只/次)采集血液和组织进行PCR和IFA检测E0-E2基因及表达蛋白残留情况;B组10只于接种后1、3、5、7、10、14、21、28d采集血清检测猪瘟抗体水平。PCR和IFA检测显示,在接种12、24、36h后肝、脾、肾组织和血清中E0-E2基因和蛋白检出率为100%,接种48h后小鼠肝、脾组织检出率为50%,肾组织和血清检出率为100%。接种72h以后,小鼠血液和组织检测均为阴性。接种后7d试验组体内抗体阳性率为40%,接种后10d小鼠体内抗体阳性率为100%,抗体阻断率在43%～51.2%,接种后28d,猪瘟抗体阳性率为100%,抗体阻断率在75.6%～87.5%。表明rAd-E0-E2在小鼠体内的存留时间最长72h,接种时间与E2抗体水平呈正相关。
关键词
猪瘟病毒
E0-E2基因
重组腺病毒疫苗
存留规律
Keywords
Classical swine fever virus
E0-E2 gene
rAd-E0-E2
rule of retention
分类号
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
1群4型禽腺病毒的分离鉴定及Fiber-2蛋白的免疫效果分析
被引量：
6
2
作者
程增青
范根成
窦小龙
刘红祥
申茂欣
徐全刚
杨汉春
机构
中国农业大学
动物
医学院
青岛易邦生物工程有限公司/动物基因工程疫苗国家重点实验室
中国
动物
卫生与流行病学中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第10期2463-2471,共9页
基金
青岛市动物保健品行业智库联合基金二期18-6-3-1-jch科技服务计划(科技金融专项-智库基金)。
文摘
旨在鉴定河南某蛋鸡场以心包积液、肝肿大出血为特征的病原,并对病原的免疫原性蛋白进行表达和效果分析。本研究采用病毒分离、血清学试验、PCR检测及测序分析、动物回归试验、大肠杆菌表达、蛋白纯化、攻毒保护等方法进行研究。结果显示,所采集样品经卵黄囊途径接种7日龄SPF鸡胚,盲传2代后获得病毒;PCR可扩增出约900 bp的Hexon基因片段,经测序,其Hexon基因与血清C4型毒株的相似性为100%;血清中和试验结果表明分离的禽腺病毒为1群血清4型禽腺病毒,命名为HN-ZK株。该毒株可在鸡胚原代肝细胞上产生CPE,病毒含量可达10^(7.5)TCID50·0.1 mL^-1。动物回归试验表明,该分离毒株可使35日龄SPF鸡100%(10/10)表现出发病症状。以分离株的DNA为模板,利用大肠杆菌原核表达系统,获得相对分子质量约为33 ku的Fiber-2蛋白,离心浓缩、纯化后蛋白含量为300 mg·mL^-1。将表达的Fiber-2蛋白用不同的剂量免疫SPF鸡,结果表明20μg·只^-1的剂量能使鸡完全抵抗强毒株的攻击,说明Fiber-2蛋白具有较好的免疫原性。本研究可为禽心包积水-肝炎综合征的诊断和基因工程亚单位疫苗的研制提供数据参考。
关键词
I群禽腺病毒
鉴定
Fiber-2蛋白
亚单位疫苗
Keywords
group I avian adenovirus
identification
fiber-2 protein
subunit vaccine
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
禽脑脊髓炎病毒VR株的致病性研究
被引量：
1
3
作者
王红
曹志
韩乃君
郭伟伟
范根成
机构
青岛易邦生物工程有限公司/动物基因工程疫苗国家重点实验室
出处
《动物医学进展》
北大核心
2016年第10期57-59,共3页
文摘
为探索禽脑脊髓炎病毒强毒VR株对SPF鸡的致病性,开展了不同接种途径和不同日龄SPF鸡的致病力试验。不同接种途径致病力试验结果表明,AEV VR株口服后不能引起发病;刺种、肌肉注射途径接种随着日龄增大,发病率降低;脑内注射途径接种可引起试验鸡全部发病。最小致病量试验结果显示,VR株脑内注射攻毒的最小致病量为10^(2.0) EID_(50)。不同日龄SPF鸡的致病力试验结果表明,随着试验鸡日龄的增大,其致病力略有差异,日龄越小,发病率越高。结果表明,AEV VR株脑内攻毒70日龄内SPF鸡的发病率为80%及以上,攻毒剂量为10^(4.0)EID_(50)。
关键词
禽脑脊髓炎病毒VR株
接种途径
日龄
最小致病量
致病性
Keywords
Avian encephalomyelitis virus Van Roekel stain
route of administration
day age
minimum pathogenic dose
pathogenicity
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
表达猪瘟病毒E0-E2基因重组腺病毒疫苗在小鼠体内的存留时间分析
熊贝嘉
张会
孙永科
范根成
张恒
杨玉艾
《动物医学进展》
北大核心
2019
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
1群4型禽腺病毒的分离鉴定及Fiber-2蛋白的免疫效果分析
程增青
范根成
窦小龙
刘红祥
申茂欣
徐全刚
杨汉春
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
禽脑脊髓炎病毒VR株的致病性研究
王红
曹志
韩乃君
郭伟伟
范根成
《动物医学进展》
北大核心
2016
1
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职称材料
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