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lncRNA MEG3对脂多糖诱导人牙髓干细胞衰老的影响
被引量：
3
1
作者
朱婷婷
胡青芳
+3 位作者
刘学玉
孙德刚
辛秉昌
高嫘娜
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第3期294-300,共7页
目的探讨lncRNA母源性印记基因3(maternal imprinting gene 3,MEG3)通过调控ROCK1对LPS诱导人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)衰老的影响。方法从成人牙髓中分离培养hDPSCs,采用10 ng/mL LPS刺激hDPSCs,分别刺激1次(6...
目的探讨lncRNA母源性印记基因3(maternal imprinting gene 3,MEG3)通过调控ROCK1对LPS诱导人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)衰老的影响。方法从成人牙髓中分离培养hDPSCs,采用10 ng/mL LPS刺激hDPSCs,分别刺激1次(6 h)、3次(每次6 h,48 h 1次)、6次(每次6 h,24 h 1次),以生理盐水组为对照组。利用脂质体转染技术分别将lncRNA MEG3 shRNA(sh-MEG3)、sh-NC、ROCK1 siRNA(si-ROCK1)、pcDNA3.1-ROCK1(OE-ROCK1)、si-NC以及OE-NC转染进hDPSCs,构建过表达和沉默细胞模型。采用qRT-PCR法检测lncRNA MEG3的表达水平;Western blot法检测ROCK1和衰老相关蛋白p21和p53的表达水平;SA-β-gal染色检测hDPSCs衰老情况。结果随着LPS刺激时间的延长,lncRNA MEG3、ROCK1、p53和p21的表达逐渐升高,LPS刺激6次组的表达水平均显著高于对照组(P<0.001)。敲降lncRNA MEG3(sh-MEG3)或敲降ROCK1(si-ROCK1)均能下调LPS刺激hDPSCs 6次后ROCK1、p53和p21蛋白的表达水平(P<0.05),且减少了细胞中SA-β-gal阳性细胞数(P<0.01)。同时敲降lncRNA MEG3且过表达ROCK1(sh-MEG3+OE-ROCK1)时,ROCK1、p53和p21的表达水平及SA-β-gal阳性细胞数在LPS刺激6次hDPSCs中均显著低于OE-ROCK1组(P<0.05)。结论敲降lncRNA MEG3可缓解LPS诱导hDPSCs衰老,其机制是通过下调ROCK1表达抑制衰老相关蛋白的表达。
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关键词
人牙髓干细胞
脂多糖
衰老
lncRNA
MEG3
ROCK1
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职称材料
题名
lncRNA MEG3对脂多糖诱导人牙髓干细胞衰老的影响
被引量：
3
1
作者
朱婷婷
胡青芳
刘学玉
孙德刚
辛秉昌
高嫘娜
机构
青岛
大学附属
青岛市
口腔
医院
牙体牙髓
科
青岛市中心医院职业病科
青岛
大学附属
青岛市
口腔
医院
儿童口腔
科
出处
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第3期294-300,共7页
基金
青岛市医疗卫生重点学科建设项目
青岛市医疗卫生优秀人才培养项目
青岛市口腔医院青年基金(2018QN07)。
文摘
目的探讨lncRNA母源性印记基因3(maternal imprinting gene 3,MEG3)通过调控ROCK1对LPS诱导人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)衰老的影响。方法从成人牙髓中分离培养hDPSCs,采用10 ng/mL LPS刺激hDPSCs,分别刺激1次(6 h)、3次(每次6 h,48 h 1次)、6次(每次6 h,24 h 1次),以生理盐水组为对照组。利用脂质体转染技术分别将lncRNA MEG3 shRNA(sh-MEG3)、sh-NC、ROCK1 siRNA(si-ROCK1)、pcDNA3.1-ROCK1(OE-ROCK1)、si-NC以及OE-NC转染进hDPSCs,构建过表达和沉默细胞模型。采用qRT-PCR法检测lncRNA MEG3的表达水平;Western blot法检测ROCK1和衰老相关蛋白p21和p53的表达水平;SA-β-gal染色检测hDPSCs衰老情况。结果随着LPS刺激时间的延长,lncRNA MEG3、ROCK1、p53和p21的表达逐渐升高,LPS刺激6次组的表达水平均显著高于对照组(P<0.001)。敲降lncRNA MEG3(sh-MEG3)或敲降ROCK1(si-ROCK1)均能下调LPS刺激hDPSCs 6次后ROCK1、p53和p21蛋白的表达水平(P<0.05),且减少了细胞中SA-β-gal阳性细胞数(P<0.01)。同时敲降lncRNA MEG3且过表达ROCK1(sh-MEG3+OE-ROCK1)时,ROCK1、p53和p21的表达水平及SA-β-gal阳性细胞数在LPS刺激6次hDPSCs中均显著低于OE-ROCK1组(P<0.05)。结论敲降lncRNA MEG3可缓解LPS诱导hDPSCs衰老,其机制是通过下调ROCK1表达抑制衰老相关蛋白的表达。
关键词
人牙髓干细胞
脂多糖
衰老
lncRNA
MEG3
ROCK1
Keywords
human dental pulp stem cells
lipopolysaccharide
senescence
lncRNA MEG3
ROCK1
分类号
R780.2 [医药卫生—口腔医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
lncRNA MEG3对脂多糖诱导人牙髓干细胞衰老的影响
朱婷婷
胡青芳
刘学玉
孙德刚
辛秉昌
高嫘娜
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
3
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