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下丘脑室旁核缩宫素神经元至三叉神经脊束尾核γ-氨基丁酸能神经元通路可调控慢性偏头痛痛觉敏化
1
作者
陈厚达
邹宛芸
+1 位作者
徐许峰
边疆
《浙江大学学报(医学版)》
北大核心
2025年第5期641-652,共12页
目的:探究下丘脑室旁核(PVN)缩宫素(OXT)神经元至三叉神经脊束尾核(TNC)γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的神经通路对慢性偏头痛小鼠痛觉敏化的调控作用及潜在机制。方法:通过第1、3、5、7、9天重复5次腹腔注射1mg/mL硝酸甘油(NTG,10mg/kg)...
目的:探究下丘脑室旁核(PVN)缩宫素(OXT)神经元至三叉神经脊束尾核(TNC)γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的神经通路对慢性偏头痛小鼠痛觉敏化的调控作用及潜在机制。方法:通过第1、3、5、7、9天重复5次腹腔注射1mg/mL硝酸甘油(NTG,10mg/kg)构建慢性偏头痛小鼠模型。实验分为四部分。第一部分:取24只雄性野生型C57BL/6J小鼠随机分为单次注射对照组、单次注射NTG组、重复注射对照组、重复注射NTG组,每组6只,免疫荧光染色检测PVN的OXT及Fos原癌基因(c-Fos)表达。第二部分:取6只雄性OXT-Cre转基因C57BL/6J小鼠,采用Cre重组酶依赖的顺行跨单突触神经示踪病毒和RNAscope联合免疫荧光染色检测PVN OXT神经元至TNC GABA能神经元的神经通路。第三部分:取30只OXT-Cre转基因C57BL/6J小鼠双侧PVN注射依赖于Cre重组酶表达的化学遗传学激活病毒,随机分为五组,每组6只。氯氮平N-氧化物(CNO)组和对照组分别腹腔注射0.1 mg/mL CNO溶液(1 mg/kg)和等体积等渗氯化钠溶液,3 h后取材,免疫荧光染色检测c-Fos蛋白以验证化学遗传学激活效率。模型对照组和CNO激活模型组建立慢性偏头痛模型,第10天双侧TNC分别注射等渗氯化钠溶液和CNO;阴性对照组双侧TNC注射等渗氯化钠溶液;30 min后采用Von-Frey纤毛机械刺激针和丙酮检测这三组小鼠眶周机械痛敏阈值和眶周冷痛反应时间。第四部分:取24只雄性OXT-Cre转基因C57BL/6J小鼠双侧PVN注射依赖于Cre重组酶表达的化学遗传学激活病毒,随机分为4组,每组6只,其中模型对照组、CNO激活模型组和阿托西班组构建慢性偏头痛模型。第10天,阴性对照组和模型对照组腹腔注射等渗氯化钠溶液,CNO激活模型组和阿托西班组腹腔注射CNO,15 min后阿托西班组双侧TNC注射阿托西班,其余三组均注射含1%二甲基亚砜的等渗氯化钠溶液。15min后,四组小鼠检测眶周机械痛敏阈值和眶周冷痛反应时间,高效液相色谱分析双侧TNC中GABA含量。结果:慢性偏头痛模型小鼠眶周机械痛敏阈值减小,眶周冷痛反应时间增加,且PVN区c-Fos+神经元数及c-Fos+OXT神经元百分比增加(均P<0.05)。顺行跨单突触神经示踪病毒策略结果显示,PVNOXT神经元与TNCGABA能神经元存在神经突触联系。免疫荧光染色结果显示,与对照组比较,CNO组PVNc-Fos+OXT神经元百分比增加(P<0.05)。双侧TNC注射药物实验结果显示,与模型对照组比较,CNO激活模型组眶周机械痛敏阈值增加、眶周冷痛反应时间缩短(均P<0.05)。腹腔注射药物实验结果显示,与CNO激活模型组比较,阿托西班组的眶周机械痛敏阈值减小、眶周冷痛反应时间延长(均P<0.05)。高效液相色谱分析结果显示,与阴性对照组、模型对照组及阿托西班组比较,CNO激活模型组TNC的GABA含量增加(均P<0.05)。结论:PVNOXT神经元通过其末梢释放的OXT对TNC的突触后GABA能神经元产生下行兴奋作用,从而改善慢性偏头痛的痛觉敏化。
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关键词
慢性偏头痛
缩宫素神经元
下丘脑室旁核
Γ-氨基丁酸能神经元
三叉神经脊束尾核
小鼠
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题名
下丘脑室旁核缩宫素神经元至三叉神经脊束尾核γ-氨基丁酸能神经元通路可调控慢性偏头痛痛觉敏化
1
作者
陈厚达
邹宛芸
徐许峰
边疆
机构
重庆两江新区人民医院麻醉科
青岛大学青岛医学院脑科学与疾病研究院
攀枝花市中心医院麻醉科
出处
《浙江大学学报(医学版)》
北大核心
2025年第5期641-652,共12页
基金
四川省卫生健康委员会科技项目(24QNMP019)
攀枝花市省级定向财力转移支付科技项目(22ZYZF-S-02)。
文摘
目的:探究下丘脑室旁核(PVN)缩宫素(OXT)神经元至三叉神经脊束尾核(TNC)γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的神经通路对慢性偏头痛小鼠痛觉敏化的调控作用及潜在机制。方法:通过第1、3、5、7、9天重复5次腹腔注射1mg/mL硝酸甘油(NTG,10mg/kg)构建慢性偏头痛小鼠模型。实验分为四部分。第一部分:取24只雄性野生型C57BL/6J小鼠随机分为单次注射对照组、单次注射NTG组、重复注射对照组、重复注射NTG组,每组6只,免疫荧光染色检测PVN的OXT及Fos原癌基因(c-Fos)表达。第二部分:取6只雄性OXT-Cre转基因C57BL/6J小鼠,采用Cre重组酶依赖的顺行跨单突触神经示踪病毒和RNAscope联合免疫荧光染色检测PVN OXT神经元至TNC GABA能神经元的神经通路。第三部分:取30只OXT-Cre转基因C57BL/6J小鼠双侧PVN注射依赖于Cre重组酶表达的化学遗传学激活病毒,随机分为五组,每组6只。氯氮平N-氧化物(CNO)组和对照组分别腹腔注射0.1 mg/mL CNO溶液(1 mg/kg)和等体积等渗氯化钠溶液,3 h后取材,免疫荧光染色检测c-Fos蛋白以验证化学遗传学激活效率。模型对照组和CNO激活模型组建立慢性偏头痛模型,第10天双侧TNC分别注射等渗氯化钠溶液和CNO;阴性对照组双侧TNC注射等渗氯化钠溶液;30 min后采用Von-Frey纤毛机械刺激针和丙酮检测这三组小鼠眶周机械痛敏阈值和眶周冷痛反应时间。第四部分:取24只雄性OXT-Cre转基因C57BL/6J小鼠双侧PVN注射依赖于Cre重组酶表达的化学遗传学激活病毒,随机分为4组,每组6只,其中模型对照组、CNO激活模型组和阿托西班组构建慢性偏头痛模型。第10天,阴性对照组和模型对照组腹腔注射等渗氯化钠溶液,CNO激活模型组和阿托西班组腹腔注射CNO,15 min后阿托西班组双侧TNC注射阿托西班,其余三组均注射含1%二甲基亚砜的等渗氯化钠溶液。15min后,四组小鼠检测眶周机械痛敏阈值和眶周冷痛反应时间,高效液相色谱分析双侧TNC中GABA含量。结果:慢性偏头痛模型小鼠眶周机械痛敏阈值减小,眶周冷痛反应时间增加,且PVN区c-Fos+神经元数及c-Fos+OXT神经元百分比增加(均P<0.05)。顺行跨单突触神经示踪病毒策略结果显示,PVNOXT神经元与TNCGABA能神经元存在神经突触联系。免疫荧光染色结果显示,与对照组比较,CNO组PVNc-Fos+OXT神经元百分比增加(P<0.05)。双侧TNC注射药物实验结果显示,与模型对照组比较,CNO激活模型组眶周机械痛敏阈值增加、眶周冷痛反应时间缩短(均P<0.05)。腹腔注射药物实验结果显示,与CNO激活模型组比较,阿托西班组的眶周机械痛敏阈值减小、眶周冷痛反应时间延长(均P<0.05)。高效液相色谱分析结果显示,与阴性对照组、模型对照组及阿托西班组比较,CNO激活模型组TNC的GABA含量增加(均P<0.05)。结论:PVNOXT神经元通过其末梢释放的OXT对TNC的突触后GABA能神经元产生下行兴奋作用,从而改善慢性偏头痛的痛觉敏化。
关键词
慢性偏头痛
缩宫素神经元
下丘脑室旁核
Γ-氨基丁酸能神经元
三叉神经脊束尾核
小鼠
Keywords
Chronic migraine
Oxytocin neuron
Paraventricular hypothalamic nucleus
GABAergic neuron
Trigeminal nucleus caudalis
Mice
分类号
R747.2 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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作者
出处
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被引量
操作
1
下丘脑室旁核缩宫素神经元至三叉神经脊束尾核γ-氨基丁酸能神经元通路可调控慢性偏头痛痛觉敏化
陈厚达
邹宛芸
徐许峰
边疆
《浙江大学学报(医学版)》
北大核心
2025
0
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