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lncRNA PWAR5通过靶向miR-30a-5p/SOCS3分子轴降低心肌炎心肌细胞的损伤 被引量:2
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作者 卢英红 迟伟峰 +3 位作者 谭玉婷 王春筱 纪文岩 吴赛 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第12期1955-1959,共5页
目的研究长链非编码(lncRNA)PWAR5在脂多糖诱导心肌炎时对心肌细胞的保护作用及分子机制。方法分离培养大鼠原代心肌细胞,分别采用载有PWAR5序列的慢病毒(PWAR5组)和空载慢病毒(Control组)进行感染,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测感染效... 目的研究长链非编码(lncRNA)PWAR5在脂多糖诱导心肌炎时对心肌细胞的保护作用及分子机制。方法分离培养大鼠原代心肌细胞,分别采用载有PWAR5序列的慢病毒(PWAR5组)和空载慢病毒(Control组)进行感染,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测感染效率。采用脂多糖诱导心肌炎后,MTS法检测PWAR5对大鼠原代心肌细胞活力的影响,ELISA法检测上清液中白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量,流式细胞术分别检测PWAR5对大鼠原代心肌细胞凋亡的影响。分别采用生物信息学方法和双荧光素酶报告基因实验预测和验证PWAR5的靶基因。qRT-PCR检测靶基因的表达。Western blot法检测靶基因蛋白及凋亡相关蛋白的表达。结果与Control组相比,PWAR5组细胞中PWAR5表达增加(P<0.01)。脂多糖处理后,与Control组相比,PWAR5组细胞活力增加(P<0.01),上清液中IL-1β和TNF-α的含量下降(均P<0.01),PWAR5组细胞凋亡比例下降(P<0.01)。PWAR5的靶基因可能是miR-30a-5p,PWAR5可与miR-30a-5p互补结合(P<0.01)。与Control组相比,PWAR5组细胞中miR-30a-5p的表达下降(P<0.01),细胞因子信号传导抑制因子3(SOCS3)mRNA的表达增加(P<0.01)。与Control组相比,PWAR5组细胞中SOCS3和Bcl-2蛋白表达上升,Bax和Caspase-3蛋白表达下降。结论PWAR5可通过靶向调控miR-30a-5p/SOCS3分子轴,降低心肌炎导致的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 心肌炎 PWAR5 miR-30a-5p SOCS3 细胞凋亡
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蕨麻多糖通过调控miR-421表达对LPS诱导的心肌细胞炎症反应及凋亡的影响 被引量:4
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作者 官庆华 姜雪梅 李新焕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期81-85,共5页
目的:探讨蕨麻多糖(PAP)对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞炎症反应及凋亡的影响及其可能作用机制。方法:采用LPS诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞损伤模型,用浓度为0.05、0.1、0.2 mg/ml蕨麻多糖处理细胞,anti-miR-NC、antimiR-421分别转染至... 目的:探讨蕨麻多糖(PAP)对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞炎症反应及凋亡的影响及其可能作用机制。方法:采用LPS诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞损伤模型,用浓度为0.05、0.1、0.2 mg/ml蕨麻多糖处理细胞,anti-miR-NC、antimiR-421分别转染至心肌细胞后用LPS处理细胞,miR-NC、miR-421 mimics分别转染至心肌细胞后用蕨麻多糖与LPS共同处理细胞;ELISA法检测细胞培养液中TNF-α、IL-6的水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR法检测miR-421的表达量。结果:蕨麻多糖呈浓度依赖性降低LPS诱导的心肌细胞培养液中TNF-α、IL-6的水平(P<0.05),并可降低细胞凋亡率(P<0.05),还可降低miR-421的表达量(P<0.05);转染anti-miR-421后LPS诱导的心肌细胞培养液中TNF-α、IL-6的水平降低(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05);转染miR-421 mimics能够逆转蕨麻多糖对LPS诱导的心肌细胞炎症反应及凋亡的作用。结论:蕨麻多糖可通过抑制miR-421的表达抑制心肌细胞炎症反应及细胞凋亡,进而减轻LPS诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 蕨麻多糖 miR-421 脂多糖 心肌细胞 细胞凋亡 炎症反应
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