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LncRNA-MIAT在肿瘤坏死因子α介导的血管内皮细胞炎症中的表达及作用 被引量:11
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作者 任成龙 张璐 +3 位作者 宁险峰 赵青 蔡尚郎 张文忠 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期607-611,共5页
目的:体外观察血管内皮细胞(ECs)在肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激下,细胞内长链非编码核糖核酸(LncR NA)心肌梗死相关转录本(LncR NA-MIAT)的表达变化,并探讨LncR NA-MIAT对ECs炎症的调控作用。方法:以TNF-α诱导ECs表达LncR NA-MIAT,采... 目的:体外观察血管内皮细胞(ECs)在肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激下,细胞内长链非编码核糖核酸(LncR NA)心肌梗死相关转录本(LncR NA-MIAT)的表达变化,并探讨LncR NA-MIAT对ECs炎症的调控作用。方法:以TNF-α诱导ECs表达LncR NA-MIAT,采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)、聚合酶链反应(PCR)及实时荧光定量PCR(qR T-PCR)方法分别检测ECs炎症状态下细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和LncR NA-MIAT的表达情况。应用MIAT小干扰核糖核酸(siR NAMIAT)转染ECs细胞,观察LncR NA-MIAT敲低对ICAM-1表达的影响。结果:Lnc RNA-MIAT随着TNF-α刺激时间的延长与浓度的增高呈上升趋势,刺激24 h、48 h分别与刺激0 h、6 h、12 h比较,Lnc RNA-MIAT表达量均增多,差异均具有统计学意义(P<0.05);TNF-α刺激浓度为1.000 ng/ml、10.000 ng/ml分别与刺激浓度为0.000 ng/ml、0.125 ng/ml比较,LncR NA-MIAT表达量增多,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。ECs经siR NAMIAT转染后,TNF-α诱导的ICAM-1蛋白表达被显著抑制(P<0.05)。结论:LncR NA-MIAT可能参与血管ECs的炎症反应,并可能起到促炎作用。 展开更多
关键词 核糖核酸酶类 肿瘤坏死因子Α 细胞间黏附分子-1
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半导体激光照射对牙齿根尖封闭效果的研究 被引量:11
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作者 苏丹丹 孙慧斌 +2 位作者 王大山 崔婷 姚如泳 《实用口腔医学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期354-357,共4页
目的:探讨常规根管预备后使用半导体激光进行根管内照射对根尖封闭性能的影响。方法:选择新鲜拔除的单根管牙60颗,分6组(n=10),去除牙冠,常规根管预备。A、B组,半导体激光1 W照射20 s;C、D组,超声荡洗1 min;E、F组,不做任何处理,作为对... 目的:探讨常规根管预备后使用半导体激光进行根管内照射对根尖封闭性能的影响。方法:选择新鲜拔除的单根管牙60颗,分6组(n=10),去除牙冠,常规根管预备。A、B组,半导体激光1 W照射20 s;C、D组,超声荡洗1 min;E、F组,不做任何处理,作为对照组。常规热牙胶垂直加压法充填6组牙根。微渗漏实验对根充后的A、C、E组牙的根尖封闭性能进行评估,扫描电镜观察B、D、F组牙根剖面。结果:A、C、E组根管微渗漏(mm)分别为1.70±0.82、2.02±0.40和4.56±2.76(A vs E,P<0.01;C vs E,P<0.05,A vs C,P>0.05),扫描电镜观察到激光组大部分牙本质小管发生熔融、缩小或封闭,超声荡洗组大部分牙本质小管内有糊剂或牙胶进入。结论:半导体激光进行根管内照射可以显著提高根充后根尖的封闭性能。 展开更多
关键词 半导体激光 熔融 根尖封闭性 微渗漏
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GSTT1和GSTM1基因多态性和PAH-DNA加合物与多发性骨髓瘤发病的关系研究 被引量:4
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作者 王渊渊 王伟 +3 位作者 杨颉 李广伦 庄立琨 卢力丽 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期728-732,共5页
目的:分析代谢酶基因谷胱甘肽硫转移酶(GST)T1和M1基因多态性及多环芳烃(PAH)-DNA加合物与多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)发病的关系。方法:收集37例初诊MM患者及52例对照人群的骨髓液样本,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(P... 目的:分析代谢酶基因谷胱甘肽硫转移酶(GST)T1和M1基因多态性及多环芳烃(PAH)-DNA加合物与多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)发病的关系。方法:收集37例初诊MM患者及52例对照人群的骨髓液样本,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法测定骨髓液中GSTT1和GSTM1基因多态性,并进一步分析其与MM临床指标相关关系;采用竞争性酶联免疫吸附法(ELISA)检测PAH-DNA加合物浓度。结果:GSTT1缺失型基因型个体患MM的风险是非缺失型者的2.57倍(P=0.035),GSTM1缺失型个体患MM风险是非缺失型者的1.37倍,但差异无统计学意义(P>0.05);在MM患者中,Ⅲ期GSTT1缺失型基因型明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P=0.038),而GSTT1基因多态性在不同年龄、类型、血红蛋白、β2-MG、白蛋白中的分布无显著性差异(P>0.05)。初诊Hb<85 g/L与Hb≥85 g/L的M M患者相比,其GSTM1缺失型基因型明显增加(P=0.017);MM患者的PAH-DNA加合物浓度明显高于对照人群(2 358±1 182 pg/ml vs 1 853±996 pg/m L)(P=0.032);GSTT1缺失型个体DNA加合物水平高于(或等于)2 100 pg/ml时,患MM的风险升高(OR=4.500,P=0.01)。结论:G STT1缺失型基因型有可能增加M M的危险性,并且GSTT1基因多态性与MM分期相关,G STM1基因多态性与M M血红蛋白水平相关,PAH-DNA加合物可能参与M M的发病,并且GSTT1缺失型个体DNA加合物水平高,更容易增加MM危险性。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 谷胱苷肽硫转移酶T1 谷胱苷肽硫转移酶M1 基因多态性 多环芳烃-DNA
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Jagged1在增生性糖尿病视网膜病变纤维血管膜中的表达及其意义 被引量:7
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作者 郭庆敏 孟旭霞 +1 位作者 杨堃 余川 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期29-34,共6页
目的观察Notch配体Jagged1在增生性糖尿病视网膜病变(PDR)纤维血管膜中的表达及其意义。方法于2014年7月至2015年7月在青岛大学附属医院眼科收集PDR患者57例60眼玻璃体切割术中纤维血管膜标本。根据术前是否行抗血管内皮生长因子药物玻... 目的观察Notch配体Jagged1在增生性糖尿病视网膜病变(PDR)纤维血管膜中的表达及其意义。方法于2014年7月至2015年7月在青岛大学附属医院眼科收集PDR患者57例60眼玻璃体切割术中纤维血管膜标本。根据术前是否行抗血管内皮生长因子药物玻璃体内注射将患眼分为未注药组30例32眼和注药组27例28眼,其中注药组患眼于手术前2~7 d行雷珠单抗玻璃体内注射。收集同期非糖尿病伴特发性黄斑前膜患者18例18眼黄斑前膜标本为对照组。采用苏木精-伊红染色观察各组标本结构特征;采用免疫组织化学染色法检测未注药组与注药组病理标本中Jagged1、Delta样配体4(Dll4)和Notch1蛋白的表达;采用实时荧光定量PCR测定各组标本中Jagged1、Dll4和Notch1 mRNA相对表达量。采用Pearson线性相关分析评估PDR纤维血管膜标本中Jagged1 mRNA相对表达量与Dll4 mRNA和Notch1 mRNA相对表达量关系。结果光学显微镜下可见PDR纤维血管膜中新生血管生成,且注药组血管管腔狭窄,未注药组血管管腔相对扩张,黄斑前膜中未见新生血管。未注药组和注药组病理标本中均有Jagged1、Dll4和Notch1蛋白表达,主要位于新生血管内皮组织中。未注药组病理标本中Jagged1、Dll4和Notch1蛋白阳性染色吸光度(A)值分别为6.25±1.82、6.87±1.89和5.12±2.14,高于注药组的1.46±0.37、1.55±0.24和1.32±0.53,差异均有统计学意义(t=5.168,P=0.014;t=6.012,P=0.008;t=3.453,P=0.030)。未注药组、注药组和对照组病理标本中Jagged1、Dll4和Notch1 mRNA相对表达量总体比较,差异均有统计学意义(F=77.337、62.305、51.869,均P<0.01);其中,未注药组和注药组病理标本中Jagged1、Dll4和Notch1 mRNA相对表达量均显著高于对照组,注药组病理标本中Jagged1、Dll4和Notch1 mRNA相对表达量均较未注药组明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Jagged1 mRNA相对表达量与Dll4和Notch1 mRNA相对表达量均呈显著正相关(r=0.925、0.950,均P<0.05)。结论Jagged1在PDR纤维血管膜血管内皮中呈高表达,且与Dll4和Notch1的表达均呈正相关,Jagged1参与新生血管形成的作用途径可能与Dll4及Notch1相关。 展开更多
关键词 视网膜新生血管 糖尿病视网膜病变 增生性 Jagged1蛋白
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全反式维甲酸对球囊损伤大鼠胸主动脉内皮后内膜增生及PDGF-BB表达的影响 被引量:2
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作者 张先明 董果雄 +3 位作者 张社华 褚现明 张斌 李宁 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期637-639,共3页
目的 研究全反式维甲酸 (all transretinoicacid ,ATRA)对球囊损伤大鼠胸主动脉内皮后内膜增生及血小板衍生生长因子B(BDGF BB)表达的影响。方法 球囊剥脱大鼠胸主动脉内皮 ,并随机将大鼠分为手术组、ATRA治疗组及对照组 ,各组大鼠均... 目的 研究全反式维甲酸 (all transretinoicacid ,ATRA)对球囊损伤大鼠胸主动脉内皮后内膜增生及血小板衍生生长因子B(BDGF BB)表达的影响。方法 球囊剥脱大鼠胸主动脉内皮 ,并随机将大鼠分为手术组、ATRA治疗组及对照组 ,各组大鼠均于术前 4d灌胃 ,分别在术后 2、7、14和 18d处死大鼠并摘除胸主动脉。通过组织学检查和免疫组化技术检测内膜增生情况、PDGF BB的表达及ATRA[30mg/ (kg·d) ]灌胃对它们的影响。结果  (1)对照组及内皮损伤后 2d均无血管内膜增厚 ,7d内膜开始增生 ,2 8d血管平滑肌细胞 (VSMCs)的增殖减弱 ,但细胞外基质增加 ,内膜继续增生 ;(2 )PDGF BB的表达于术后 2d开始升高 ,至 14d达高峰 ;(3)使用ATRA后内膜增生程度及PDGF BB的表达明显降低。结论 ATRA可有效地抑制血管损伤后内膜增生 ,其机制可能是通过抑制PDGF BB表达 。 展开更多
关键词 PDGF-BB 内膜增生 大鼠 胸主动脉 表达 ATRA 内皮 灌胃 增殖 全反式维甲酸
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基质金属蛋白酶2及其抑制剂在大鼠青光眼滤过术后滤过泡组织中的动态表达 被引量:3
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作者 刘梦迎 王玲 +1 位作者 王大博 姚如永 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期324-329,共6页
背景青光眼滤过术后瘢痕形成是导致手术失败的主要原因,探讨球结膜滤过泡中基质金属蛋白酶2(MMP-2)及组织金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达对于术后瘢痕形成的发病机制研究具有重要意义。目的观察大鼠球结膜滤过泡模型滤过区组织中... 背景青光眼滤过术后瘢痕形成是导致手术失败的主要原因,探讨球结膜滤过泡中基质金属蛋白酶2(MMP-2)及组织金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达对于术后瘢痕形成的发病机制研究具有重要意义。目的观察大鼠球结膜滤过泡模型滤过区组织中MMP-2及TIMP-2的表达与瘢痕形成进程的关系。方法采用完全随机化分组法将63只6~8周龄清洁级雄性SD大鼠分为正常对照组和术后1、3、5、7、14、28d组,每只大鼠任选-侧眼为实验眼。采用前房引流管植入术建立大鼠球结膜滤过泡模型,术后裂隙灯显微镜下观察大鼠球结膜滤过泡的形成情况及眼前节反应,各组于相应时间点颈椎脱臼法处死大鼠,其中3只眼制备完整眼球冰冻切片,采用免疫荧光化学染色法检测标本中MMP-2及TIMP-2的表达和定位;另取6只大鼠结膜滤过区组织行Westernblot检测,观察MMP-2和TIMP-2在滤过区组织中的动态表达。结果所有术眼在术后第1天均形成不同程度隆起的滤过泡,维持时间为7—17d,平均生存时间为12d。Westernblot检测结果显示,正常对照组大鼠滤过区组织中MMP-2蛋白的相对表达量为121.67±4.37,在术后3d组开始逐渐增高,为183.67±5.61,术后7d组达峰值,为230.50±8.48,随后逐渐降低,术后28d组为172.33±8.43,仍高于正常对照组,各组大鼠滤过区组织中MMP-2蛋白的相对表达量总体比较差异有统计学意义(F=280.18,P〈0.05)。正常对照组大鼠滤过区组织中TIMP-2蛋白的相对表达量为102.50±6.25,在术后3d组开始明显升高,为162.67±7.00,术后5d组TIMP-2蛋白表达量达峰值,为232.00±11.03,之后逐渐下降,术后28d组降至150.50±6.41,但仍高于正常对照组,各组间滤过区组织中TIMP-2蛋白的相对表达量的总体比较差异有统计学意义(F=145.34,P〈0.05)。免疫荧光组织化学结果显示,正常对照组MMP-2、TIMP-2仅在大鼠结膜上皮层微弱表达,呈红色荧光,而在术后大鼠滤过区结膜组织上皮层和固有层均呈强荧光。结论MMP-2和TIMP-2在大鼠青光眼滤过术后滤过区组织的动态表达与滤过泡的纤维化过程相-致,提示MMP-2和TIMP-2参与结膜滤过泡的瘢痕化过程。 展开更多
关键词 青光眼/手术 滤过泡 瘢痕化 基质金属蛋白酶2 组织金属蛋白酶抑制剂2 WISTAR大鼠
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氢气减弱脂多糖对人牙周膜细胞成骨能力的抑制 被引量:1
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作者 刘红卫 袁昌青 +2 位作者 于新波 吉秋霞 隋爱华 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期797-800,共4页
目的:研究氢气(H_2)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)刺激的人牙周膜成纤维细胞(hPDLCs)成骨能力的影响。方法:取生长状态良好的hPDLCs分为对照组、成骨诱导组、成骨诱导+LPS(100 ng/ml)刺激组及成骨诱导+H,(3%)+LPS(100 ng/ml)组培养3... 目的:研究氢气(H_2)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)刺激的人牙周膜成纤维细胞(hPDLCs)成骨能力的影响。方法:取生长状态良好的hPDLCs分为对照组、成骨诱导组、成骨诱导+LPS(100 ng/ml)刺激组及成骨诱导+H,(3%)+LPS(100 ng/ml)组培养3周后行茜素红(ARS)染色,另取上述各组处理培养7 d的细胞提取RNA进行RT^DCR检测比较碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)的表达差异。结果:hPDLCs成骨、成脂诱导后具有定向分化能力。钙化物含量LPS刺激组少于成骨诱导组(P<0.01);H_2+LPS处理组多于LPS刺激组(P<0.05)。LPS刺激组细胞ALP表达降低(P<0.001),OC表达降低(P<0.001);与LPS刺激组相比H_2+LPS处理组细胞ALP表达增高(P<0.05),OC表达增高(P<0.05)。结论:高浓度P.g-LPS能够抑制hPDLC的成骨能力,而氢气能够一定程度上改善P.g-LPS对hPDLC成骨能力的抑制作用。 展开更多
关键词 氢气 人牙周膜成纤维细胞(h PDLCs) 成骨能力 P.g-LPS 碱性磷酸酶(ALP) 骨钙素(OC)
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靶向小鼠TNF-α基因RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定 被引量:1
8
作者 赵颖杰 王吉波 +4 位作者 辛苗苗 梁宏达 刘相萍 杨堃 隋爱华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期927-932,共6页
目的:构建靶向小鼠TNF-α基因的RNA干扰慢病毒载体,为RNA干扰基因治疗提供基础。方法:设计、合成3组靶向TNF-α基因的特异小干扰RNA(siRNA):siRNA1、siRNA2、siRNA3及阴性对照siRNA,体外转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7,用real-time PCR和EL... 目的:构建靶向小鼠TNF-α基因的RNA干扰慢病毒载体,为RNA干扰基因治疗提供基础。方法:设计、合成3组靶向TNF-α基因的特异小干扰RNA(siRNA):siRNA1、siRNA2、siRNA3及阴性对照siRNA,体外转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7,用real-time PCR和ELISA法检测其对经脂多糖刺激的RAW264.7细胞表达TNF-α、IL-1β、IL-6的影响。筛选出特异且抑制性高的siRNA,根据其序列设计合成寡核苷酸链,构建表达短发卡RNA(shRNA)的重组慢病毒质粒并测序,经鉴定质粒与包装质粒共转染293T细胞生产慢病毒颗粒,计算病毒颗粒滴度。结果:①siRNA1、siRNA2、siRNA3组的TNF-αmRNA相对表达量分别为0.24±0.01、0.16±0.02、0.19±0.01,与阴性对照0.95±0.02相比差别均具有统计学意义(F=531.3,P<0.001);与阴性对照相比,mRNA表达抑制率分别为74.26%、83.09%、79.93%。siRNA1、siRNA2、siRNA3及阴性对照组的IL-1βmRNA或IL-6 mRNA相对表达量之间差别无统计学意义(F=0.981,P=0.980 7>0.05;F=0.739,P=0.586 7>0.05)。②siRNA1、siRNA2、siRNA3的TNF-α蛋白表达分别为(23.95±1.21)、(17.27±1.46)、(19.07±1.57)ng/ml与阴性对照的(35.37±2.93)ng/ml相比,差别均具有统计学意义(F=18.1,P=0.000 6<0.001);与阴性对照相比,TNF-α蛋白表达抑制率分别为32.29%、51.16%、46.08%。③以siRNA2序列设计、合成寡核苷酸链,构建重组慢病毒穿梭质粒,其PCR产物电泳结果为343 bp,空载体PCR产物306 bp;DNA测序显示pGCSIL-GFP-shRNA测序反应中断,但已显示部分插入序列。④转染后的293T细胞,生长良好,荧光表达强,慢病毒滴度为2×106TU/μl。结论:靶向小鼠TNF-α基因RNAi慢病毒载体构建成功。 展开更多
关键词 RNA干扰 慢病毒载体 巨噬细胞 肿瘤坏死因子-Α
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一种小粒径壳聚糖纳米粒作为基因载体的研究 被引量:1
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作者 张文华 梁晔 +5 位作者 周泉 李彤 李明钰 苗玉 徐文华 王丽萍 《功能材料》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第12期12084-12093,共10页
系统比较了不同分子量的壳聚糖与TPP离子交联制备的纳米粒,用于基因转运载体,评价其对质粒和siRNA的转运效果。通过粒度仪测定壳聚糖纳米粒(CSNPs)的粒径、多分散系数以及Zeta电位;透射电镜观察CSNPs的形态;MTT法测定其细胞毒性;通过CS... 系统比较了不同分子量的壳聚糖与TPP离子交联制备的纳米粒,用于基因转运载体,评价其对质粒和siRNA的转运效果。通过粒度仪测定壳聚糖纳米粒(CSNPs)的粒径、多分散系数以及Zeta电位;透射电镜观察CSNPs的形态;MTT法测定其细胞毒性;通过CSNPs在小鼠肌肉内的组织切片观察其生物相容性。CSNPs分别包载质粒和siRNA,凝胶电泳和分光光度法测定其包载能力,荧光显微镜、激光共聚焦或流式细胞术分析其对肿瘤细胞的转染效果;溶血实验和血凝实验分析其血液相容性。结果表明,1 mg/mL的CS(160 k Da)和TPP(质量比为10∶1)制备的CSNPs粒径约100 nm,且分布均一、稳定,透射电镜下为形态规则的类球型粒子;其细胞毒性均在0~1级,符合生物医用材料毒性标准;组织切片没有发现明显的炎症反应,生物相容性良好;CSNPs对质粒和siRNA的包载率较高,并能成功将其转运至细胞内,但小粒径的纳米粒转染质粒后荧光较弱,而携带siRNA的CSNPs转染后荧光较强,且流式细胞术结果表明其与商品化转染试剂相比转染率较高;溶血及血凝实验也发现材料具有良好的血液相容性。所以,制备的小粒径CSNPs更适合作为一种安全高效的siRNA转运载体,后续可以加以修饰应用于肿瘤的基因靶向治疗中。 展开更多
关键词 壳聚糖 TPP 纳米粒 基因转运
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肝细胞癌中CAⅨ表达与侵袭转移的关系 被引量:2
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作者 冯琨 杨堃 +3 位作者 宋海云 王鸿宇 姜慧峰 李秋尧 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1280-1285,共6页
目的探讨碳酸酐酶Ⅸ(carbonic anhydraseⅨ,CAⅨ)在肝细胞癌和癌旁组织中的表达及与肝细胞癌侵袭、转移的关系。方法采用免疫组化LDP法检测67例肝细胞癌及癌旁组织中CAⅨ的表达,并分析其与临床病理特征及预后的关系。将CAⅨ过表达载体... 目的探讨碳酸酐酶Ⅸ(carbonic anhydraseⅨ,CAⅨ)在肝细胞癌和癌旁组织中的表达及与肝细胞癌侵袭、转移的关系。方法采用免疫组化LDP法检测67例肝细胞癌及癌旁组织中CAⅨ的表达,并分析其与临床病理特征及预后的关系。将CAⅨ过表达载体及干扰表达的siRNA分别转染至人肝癌细胞株HepG2后,应用qRT-PCR法检测各组CAⅨ的表达,CCK-8实验检测CAⅨ对肝癌细胞增殖能力的影响,细胞迁移/侵袭实验检测其对肝癌细胞侵袭转移能力的影响。从TCGA数据库中检索肝细胞癌CAⅨ表达与预后的资料,进行对比分析。结果CAⅨ在肝细胞癌中的表达显著高于癌旁组织(P<0.05),且随着肝细胞癌分化程度的降低其阳性率逐渐升高(P<0.05)。随访中位时间17个月,Kaplan-Meier生存曲线显示,CAⅨ阳性者和阴性者的总生存率差异有统计学意义(P<0.05)。TCGA数据库中CAⅨmiRNA高表达的肝细胞癌患者总生存率显著低于低/中等表达者(P=0.00045)。细胞增殖实验及细胞迁移/侵袭实验显示,CAⅨ过表达能促进肝癌细胞HepG2的增殖及侵袭转移能力,siRNA干扰沉默HepG2细胞中CAⅨ的表达抑制其增殖及侵袭转移能力(P<0.05)。结论CAⅨ表达升高与肝细胞癌组织分化程度密切相关,且提示预后较差,其在肝癌组织的高表达可能具有促进肝癌细胞增殖及侵袭转移的能力。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 细胞增殖 侵袭转移 CAⅨ
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羧甲基壳聚糖及羧甲基甲壳素对TGF-β诱导的角膜上皮纤维化的抑制作用研究
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作者 王哲颖 隋爱华 +4 位作者 徐文华 刘成玉 周泉 王丽萍 梁晔 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期96-104,共9页
本实验旨在研究不同分子量的羧甲基壳聚糖(CMCTS)和羧甲基甲壳素(CMCT)对转化生长因子β(TGF-β)诱导的人角膜上皮细胞纤维化的抑制作用,并初探其作用机制。MTT法检测不同分子量的CMCTS和CMCT对人角膜上皮细胞系(HCE)生长增殖能力的影响... 本实验旨在研究不同分子量的羧甲基壳聚糖(CMCTS)和羧甲基甲壳素(CMCT)对转化生长因子β(TGF-β)诱导的人角膜上皮细胞纤维化的抑制作用,并初探其作用机制。MTT法检测不同分子量的CMCTS和CMCT对人角膜上皮细胞系(HCE)生长增殖能力的影响;细胞划痕实验研究TGF-β诱导的HCE细胞纤维化过程中CMCTS和CMCT的作用;western blot方法在蛋白水平探究不同分子量的CMCTS和CMCT对角膜上皮细胞纤维化相关的TGF-β/Smad通路信号分子的影响。结果表明,在10~1 000μg/mL浓度范围内,4种多糖对HCE细胞均具有较好的相容性。此外,不论大分子还是小分子的CMCTS对TGF-β诱导的HCE细胞纤维化均具有显著的抑制作用,其作用机制与抑制TGF-β/Smad信号通路Smad2和Smad3分子的磷酸化有关。然而,两种分子量的CMCT均没有抑制纤维化的作用。因此,CMCTS可以作为一种有发展潜力的生物医用材料应用于人角膜上皮损伤修复,发挥其抗纤维化的作用。 展开更多
关键词 羧甲基壳聚糖 角膜上皮 纤维化 TGF-Β
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