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体外合成的ABC转运蛋白2 mRNA在小鼠体内表达促进尿酸排泄
被引量:
4
1
作者
孙忠兴
葛科立
+3 位作者
张志霞
贾少平
张金玉
葛银林
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第8期1100-1109,共10页
高尿酸血症是指嘌呤代谢紊乱尿酸在体内堆积所导致的慢性代谢疾病,近年来其发病率增高且发病年龄呈现年轻化趋势,寻找有效的治疗靶点以及治疗方法是当前研究的热点。尿酸盐转运蛋白ABC转运蛋白2(ATP-binding cassette subfamily G membe...
高尿酸血症是指嘌呤代谢紊乱尿酸在体内堆积所导致的慢性代谢疾病,近年来其发病率增高且发病年龄呈现年轻化趋势,寻找有效的治疗靶点以及治疗方法是当前研究的热点。尿酸盐转运蛋白ABC转运蛋白2(ATP-binding cassette subfamily G member 2,ABCG2)主要表达于肾,促进尿酸排泄。本研究通过体外合成ABCG2 mRNA,将其转染至高尿酸血症模型小鼠体内,观察对小鼠尿酸的影响及其相关作用。化学合成ABCG2 mRNA的DNA模板,体外转录mRNA修饰后转染到小鼠肾小管上皮细胞TCMK-1,Western印迹检测细胞中的蛋白质表达。结果显示,TCMK-1细胞中的蛋白质表达量与mRNA转染量呈正相关(P<0.01),提示转染成功。动物实验,将24只SPF级小鼠随机分为正常组、高尿酸血症模型组、苯溴马隆治疗组[20 mg/(kg·d)]和mRNA治疗组[2 mg/(kg·3d)],共4组(n=6)。边造模边治疗持续28 d,治疗结束后检测其血尿酸、尿液中尿酸、血肌酐、血尿素氮和肝中黄嘌呤氧化酶指标。结果显示,与模型组小鼠相比,mRNA治疗能显著降低小鼠血尿酸(100.38±10.94)及血尿素氮(6.30±1.10)、肌酐(30.86±5.78)水平(P<0.05或P<0.01),升高小鼠尿液尿酸(617.48±50.34)水平(P<0.05),促进尿酸排泄,对肝中黄嘌呤氧化酶活性(26.19±2.58)无显著影响。HE染色观察小鼠肾病理结构改变。结果显示,与模型组小鼠相比,mRNA治疗组小鼠肾内肾小管细胞水肿、炎细胞浸润等病理损伤得到明显改善。qRT-PCR检测小鼠肾组织mRNA相对表达量,免疫组化、Western印迹检测小鼠肾ABCG2蛋白质表达水平。结果显示,mRNA组小鼠肾组织中ABCG2 mRNA及其蛋白质相对表达量明显上调(P<0.01)。综上所述,体外修饰合成的ABCG2 mRNA可以在高尿酸小鼠模型体内成功表达,并促进尿酸及其它有机离子排泄,同时改善小鼠肾损伤。该结果为临床利用ABCG2基因作为治疗高尿酸血症相关疾病的靶点提供了实验依据。
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关键词
高尿酸血症
ABC转运蛋白2
mRNA治疗
肾功能
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题名
体外合成的ABC转运蛋白2 mRNA在小鼠体内表达促进尿酸排泄
被引量:
4
1
作者
孙忠兴
葛科立
张志霞
贾少平
张金玉
葛银林
机构
青岛大学
基础
医学院
生物化学与分子生物学系
青岛大学基础医学院中西医结合中心
枣庄职业
学院
医学院
基础
医学
教研室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第8期1100-1109,共10页
基金
山东省科技计划(No.2014GGH218023)
山东省重点研发项目(No.2017GSF218084)
青岛市应用基础研究项目(No.19-6-2-31-cg)资助。
文摘
高尿酸血症是指嘌呤代谢紊乱尿酸在体内堆积所导致的慢性代谢疾病,近年来其发病率增高且发病年龄呈现年轻化趋势,寻找有效的治疗靶点以及治疗方法是当前研究的热点。尿酸盐转运蛋白ABC转运蛋白2(ATP-binding cassette subfamily G member 2,ABCG2)主要表达于肾,促进尿酸排泄。本研究通过体外合成ABCG2 mRNA,将其转染至高尿酸血症模型小鼠体内,观察对小鼠尿酸的影响及其相关作用。化学合成ABCG2 mRNA的DNA模板,体外转录mRNA修饰后转染到小鼠肾小管上皮细胞TCMK-1,Western印迹检测细胞中的蛋白质表达。结果显示,TCMK-1细胞中的蛋白质表达量与mRNA转染量呈正相关(P<0.01),提示转染成功。动物实验,将24只SPF级小鼠随机分为正常组、高尿酸血症模型组、苯溴马隆治疗组[20 mg/(kg·d)]和mRNA治疗组[2 mg/(kg·3d)],共4组(n=6)。边造模边治疗持续28 d,治疗结束后检测其血尿酸、尿液中尿酸、血肌酐、血尿素氮和肝中黄嘌呤氧化酶指标。结果显示,与模型组小鼠相比,mRNA治疗能显著降低小鼠血尿酸(100.38±10.94)及血尿素氮(6.30±1.10)、肌酐(30.86±5.78)水平(P<0.05或P<0.01),升高小鼠尿液尿酸(617.48±50.34)水平(P<0.05),促进尿酸排泄,对肝中黄嘌呤氧化酶活性(26.19±2.58)无显著影响。HE染色观察小鼠肾病理结构改变。结果显示,与模型组小鼠相比,mRNA治疗组小鼠肾内肾小管细胞水肿、炎细胞浸润等病理损伤得到明显改善。qRT-PCR检测小鼠肾组织mRNA相对表达量,免疫组化、Western印迹检测小鼠肾ABCG2蛋白质表达水平。结果显示,mRNA组小鼠肾组织中ABCG2 mRNA及其蛋白质相对表达量明显上调(P<0.01)。综上所述,体外修饰合成的ABCG2 mRNA可以在高尿酸小鼠模型体内成功表达,并促进尿酸及其它有机离子排泄,同时改善小鼠肾损伤。该结果为临床利用ABCG2基因作为治疗高尿酸血症相关疾病的靶点提供了实验依据。
关键词
高尿酸血症
ABC转运蛋白2
mRNA治疗
肾功能
Keywords
hyperuricemia
ATP-binding cassette subfamily G member 2(ABCG2)
mRNA treatment
renal function
分类号
R34 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
体外合成的ABC转运蛋白2 mRNA在小鼠体内表达促进尿酸排泄
孙忠兴
葛科立
张志霞
贾少平
张金玉
葛银林
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
4
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