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MicroRNA与人类血液系统疾病的研究进展 被引量:5
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作者 孟冬梅 苗志敏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期979-983,共5页
microRNA(miRNA)是一类长约22nt(19-25nt)在进化方面属保守的非编码RNAs,miRNA与靶mRNA3′端非翻译区序列不完全互补结合,抑制翻译,在转录后水平调控靶基因的表达。miRNA在人体内发挥着非常广泛而重要的调控作用。本文对miRNA的特征、... microRNA(miRNA)是一类长约22nt(19-25nt)在进化方面属保守的非编码RNAs,miRNA与靶mRNA3′端非翻译区序列不完全互补结合,抑制翻译,在转录后水平调控靶基因的表达。miRNA在人体内发挥着非常广泛而重要的调控作用。本文对miRNA的特征、功能特点及在人类血液系统肿瘤发生中的作用等方面的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 MICRORNA 基因调控 血液系统肿瘤
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藏红花素对HL-60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用及其机制 被引量:13
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作者 徐慧娟 仲任 +6 位作者 赵艳霞 李学荣 卢愿 宋爱琴 庞秀英 姚如永 孙立荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期887-892,共6页
本研究探讨藏红花素(crocin)对人急性白血病细胞HL-60增殖抑制的影响及其促凋亡机制。测定HL-60细胞在不同浓度crocin作用后的生长曲线,用荧光显微镜观察细胞形态学变化,MTT法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR检测... 本研究探讨藏红花素(crocin)对人急性白血病细胞HL-60增殖抑制的影响及其促凋亡机制。测定HL-60细胞在不同浓度crocin作用后的生长曲线,用荧光显微镜观察细胞形态学变化,MTT法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR检测bcl-2、bax基因的表达。结果表明,不同浓度crocin作用后HL-60细胞生长明显受抑制,并呈现出剂量时间依赖关系。在0-5mg/ml范围内HL-60细胞凋亡率逐渐升高。当crocin浓度高于5mg/ml时,HL-60细胞凋亡率并没有升高,反而下降,表现为细胞坏死。流式细胞术检测结果显示,细胞周期被阻滞于G0/G1,且在5mg/ml时阻滞作用最明显。RT-PCR结果显示,bcl-2基因表达明显下调,bax基因表达上调。结论:crocin可诱导HL-60细胞凋亡,并对细胞周期起阻滞作用,其作用机制可能与bcl-2基因表达抑制及bax基因表达激活有关。 展开更多
关键词 藏红花素 HL-60细胞 细胞凋亡 bcl-2基因 BAX基因
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联合免疫抑制剂治疗儿童重型再生障碍性贫血临床研究 被引量:7
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作者 王高燕 李学荣 +5 位作者 孙立荣 仲任 赵艳霞 卢愿 宋爱琴 庞秀英 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期779-783,共5页
目的观察抗胸腺细胞免疫球蛋白(ATG)、环孢素(CsA)和大剂量丙种球蛋白(HDIVIG)联合免疫抑制治疗儿童重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效,并评价其临床安全性。方法选取2004年5月—2009年3月确诊并采用ATG+CsA+HDIVIG联合治疗的SAA儿童20例,... 目的观察抗胸腺细胞免疫球蛋白(ATG)、环孢素(CsA)和大剂量丙种球蛋白(HDIVIG)联合免疫抑制治疗儿童重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效,并评价其临床安全性。方法选取2004年5月—2009年3月确诊并采用ATG+CsA+HDIVIG联合治疗的SAA儿童20例,对其临床资料进行分析。结果 ATG+CsA+HDIVIG联合治疗儿童SAA有效率和显效率分别为80%(16/20)和70%(14/20),20例中基本治愈11例,缓解3例,进步2例,无效4例(其中死亡2例)。ATG用药期间出现过敏反应2例,治疗相关鼻衄5例,其中2例同时合并肉眼血尿。治疗过程中17例患儿发生不同程度感染,发生血清病反应2例,继发性糖尿病5例,高血压7例,低蛋白血症8例。随访期内未发现克隆性疾病。结论联合免疫抑制剂(ATG+CsA+HDIVIG)是治疗儿童SAA的一种安全有效的治疗方法。 展开更多
关键词 联合免疫抑制 再生障碍性贫血 治疗 抗胸腺细胞免疫球蛋白 环孢素 丙种球蛋白
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CD133抗原在白血病及MDS骨髓细胞中的表达 被引量:4
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作者 王伟 汪洪毅 +2 位作者 赵会霞 崔中光 李广伦 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期470-473,共4页
为了探讨CD133抗原与白血病和骨髓增生异常综合症(MDS)发病的关系,采用免疫细胞化学方法检测CD133抗原在白血病和MDS中的表达。结果显示,43例急性白血病患者CD133表达的阳性率为51.2%,急性髓系白血病(AML)组(16/29,55.2%)CD133的表达与... 为了探讨CD133抗原与白血病和骨髓增生异常综合症(MDS)发病的关系,采用免疫细胞化学方法检测CD133抗原在白血病和MDS中的表达。结果显示,43例急性白血病患者CD133表达的阳性率为51.2%,急性髓系白血病(AML)组(16/29,55.2%)CD133的表达与对照组(2/15,13.3%)间的差别有统计学意义(P<0.05),慢性髓系白血病(CML)的CD133表达阳性率(2/6)与对照组间的差别无统计学意义(P>0.05)。9例MDS患者中有5例呈CD133表达阳性,阳性率为55.6%,与对照组相比无显著差异(P>0.05)。在所有白血病患者中CD34+患者的CD133表达率高于CD34-患者,且差异有统计学意义(P<0.05)。CD133表达与性别、年龄、骨髓白血病细胞比例、外周血原幼细胞比例、外周血白细胞数、血红蛋白、血小板数及乳酸脱氢酶水平无显著相关性。结论:AML患者骨髓细胞CD133表达高于正常对照,CD133表达与CD34表达有相关性。CD133高表达可能是急性白血病不良预后的一个因素。 展开更多
关键词 白血病 MDS CD133 CD34 预后
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急性髓细胞白血病细胞来源的树突状细胞的诱导及功能研究(英文) 被引量:4
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作者 孟冬梅 赵春亭 +2 位作者 吴少玲 王宝中 吕振华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期625-631,共7页
为了研究急性髓细胞白血病 (AML)细胞诱导成树突状细胞 (DC)的方法及其DC的功能 ,分离 2 5例AML患者骨髓或外周血单个核细胞 ,在含有细胞因子rhGM CSF ,rhIL 4 ,rhTNF α的IMDM完全培养基中培养 8- 12天 ,进行细胞形态学、表型、遗传学... 为了研究急性髓细胞白血病 (AML)细胞诱导成树突状细胞 (DC)的方法及其DC的功能 ,分离 2 5例AML患者骨髓或外周血单个核细胞 ,在含有细胞因子rhGM CSF ,rhIL 4 ,rhTNF α的IMDM完全培养基中培养 8- 12天 ,进行细胞形态学、表型、遗传学及功能测定。结果表明 :2 0 2 5例自诱导培养的第 3天起 ,在倒置显微镜下可观察到部分细胞体积增大 ,形态由圆形变得不规则 ,可见驼峰样或细刺状胞浆突起 ;在第 8- 9天 ,该类细胞所占的比例达到峰值。至第 12天 ,细胞总数及上述形态的细胞数量明显减少。诱导培养结束时收集细胞 ,应用流式细胞术检测 11 2 0例诱导前后细胞表面标志的表达 ,结果表明诱导前细胞不表达CD1a、CD80及CD83,低表达CD86、CD5 4和HLA DR ;诱导后细胞CD1a、CD80、CD83、CD86、CD5 4及HLA DR的表达明显上调。在同种异体混合淋巴细胞反应 (Allo MLR)中 ,该类细胞刺激同种异体淋巴细胞增殖—对3H TdR的摄取能力明显高于AML细胞。FISH证实诱导生成的具有DC特征细胞的AML起源。结论 :体外联合应用细胞因子可将AML细胞诱导成具有DC形态、表型及功能特征的细胞 (AML DC)。 展开更多
关键词 急性髓细胞白血病 树突状细胞 细胞因子
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儿童朗格汉斯细胞组织细胞增生症26例临床分析 被引量:5
6
作者 宋爱琴 李学荣 +4 位作者 庞秀英 卢愿 仲任 赵艳霞 孙立荣 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期431-434,共4页
目的提高对儿童朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)临床特点的认识,探讨应用改良LCH-Ⅲ方案治疗的有效性和安全性。方法 26例LCH患儿均在确诊前完善必要的实验室检查、皮疹印片或组织病理检查,按Lavin-Osband法进行分级和分型。轻型者仅... 目的提高对儿童朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)临床特点的认识,探讨应用改良LCH-Ⅲ方案治疗的有效性和安全性。方法 26例LCH患儿均在确诊前完善必要的实验室检查、皮疹印片或组织病理检查,按Lavin-Osband法进行分级和分型。轻型者仅行局部治疗,其余病例共分为3组,分别按照改良LCH-Ⅲ方案进行化疗。结果 LCH病变可累及多个系统和脏器,可伴有不同程度功能障碍。26例患儿中,4例采用局部治疗,22例采用改良LCH-Ⅲ方案治疗(其中1例先采用局部治疗,病情进展再用此方案),6周时总有效率为72.7%,18个月时总有效率为86.4%。中位随访期36个月(24~50个月),治愈15例,稳定6例,进展或恶化3例,死亡2例。结论 LCH确诊时临床表现多样,病情轻重不一。改良LCH-Ⅲ方案可针对LCH临床分型和分级进行分层治疗,疗效满意,不良反应及治疗相关并发症少,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 郎格汉斯细胞组织细胞增生症 化疗 儿童
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COX-2在慢性白血病骨髓细胞中的表达及其意义 被引量:6
7
作者 鲍振华 李广伦 于军红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期923-926,共4页
本研究探讨慢性白血病患者骨髓细胞COX-2的表达水平及其作用机制和意义。采用Western blot方法检测了67例慢性白血病患者骨髓细胞COX-2及内参照β-actin的表达水平,以14名健康供者骨髓为阴性对照。结果表明:CML-CP组COX-2的阳性表达率为... 本研究探讨慢性白血病患者骨髓细胞COX-2的表达水平及其作用机制和意义。采用Western blot方法检测了67例慢性白血病患者骨髓细胞COX-2及内参照β-actin的表达水平,以14名健康供者骨髓为阴性对照。结果表明:CML-CP组COX-2的阳性表达率为76.32%(29/38),高于对照组,有显著统计学意义(p=0.0000),CLL组COX-2的阳性表达率为75.86%(22/29),高于对照组,有显著统计学意义(p=0.0000)。COX-2在CML-CP组和CLL组的表达水平差别无统计学意义(p>0.05)。COX-2阳性组LDH水平高于COX-2阴性组,差别有统计学意义(p<0.001)。结论:在慢性髓系白血病慢性期和慢性淋巴细胞白血病中均表达COX-2,而且LDH水平也偏高。 展开更多
关键词 环加氧酶-2 慢性白血病 骨髓细胞
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儿童郎格罕斯细胞组织细胞增生症免疫功能检测意义 被引量:4
8
作者 宋爱琴 庞秀英 +4 位作者 卢愿 李学荣 赵艳霞 仲任 孙立荣 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期735-737,共3页
目的了解郎格罕斯细胞组织细胞增生症(LCH)患儿治疗前后细胞和体液免疫功能状态。方法将30例LCH患儿按Lavin-Osband法分为3组。采用流式细胞仪检测LCH患儿及26例正常对照组儿童外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD3-CD(16+56)+、CD19+含量,采用... 目的了解郎格罕斯细胞组织细胞增生症(LCH)患儿治疗前后细胞和体液免疫功能状态。方法将30例LCH患儿按Lavin-Osband法分为3组。采用流式细胞仪检测LCH患儿及26例正常对照组儿童外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD3-CD(16+56)+、CD19+含量,采用特定蛋白分析仪检测患儿及正常对照儿童血清IgA、IgM、IgG含量。结果三组LCH患儿确诊时,各组间CD3+、CD19+差异均无统计学意义(P均>0.05),Ⅲ组LCH患儿CD4+/CD8+、CD3-CD(16+56)+低于其他组,差异均有统计学意义(P均<0.05);LCH患儿确诊时各组间血清Ig与正常对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05);Ⅱ组和Ⅲ组LCH患儿治疗6个月时CD4+/CD8+分别低于治疗前,差异均有统计学意义(P均<0.05);LCH患儿治疗前后CD3-CD(16+56)+、CD19+比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。LCH患儿治疗前后血清Ig比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论LCH患儿发病时存在细胞免疫功能降低,与病情轻重有关;体液免疫功能无明显改变。LCH患儿化疗后可出现细胞免疫功能紊乱加重。检测LCH患儿的免疫功能,可为免疫调节治疗提供客观依据。 展开更多
关键词 郎格罕斯细胞组织细胞增生症 免疫功能 儿童
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98-方案诊治儿童急性淋巴细胞白血病疗效和预后因素分析 被引量:5
9
作者 刘瑞海 宋亮 +2 位作者 刘华林 孙立荣 梁卉 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期423-427,共5页
目的探讨98-方案诊治儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的疗效和预后因素,以便进一步提高儿童ALL无事生存率(EFS)。方法回顾性分析1998年10月—2003年7月83例初诊儿童ALL临床资料,采用Kaplan Meier法评估各因素对患儿5年无事生存率(5-year E... 目的探讨98-方案诊治儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的疗效和预后因素,以便进一步提高儿童ALL无事生存率(EFS)。方法回顾性分析1998年10月—2003年7月83例初诊儿童ALL临床资料,采用Kaplan Meier法评估各因素对患儿5年无事生存率(5-year EFS)的影响,组间患儿5-year EFS差异比较采用Log-Rank检验,COX比例风险回归模型分析各变量的独立预后价值。结果83例儿童ALL完全缓解(CR)率为96.4%,总体5-year EFS为(62.0±6.0)%。多因素分析表明泼尼松诱导试验不良是预后不良的独立因素,其相对危险度(RR)为1.577;而治疗顺从是预后良好的独立因素,其RR为0.443。泼尼松诱导试验高度敏感对预后不良预测的敏感度和特异度分别为67.9%和76.7%,泼尼松诱导试验高度敏感+敏感对预后不良预测的敏感度和特异度分别为94.3%和33.3%。结论采用98-方案治疗儿童ALL疗效满意,泼尼松诱导试验不良是预后不良的独立因素,泼尼松诱导试验高度敏感对预后不良预测的敏感度和特异度都比较高,治疗顺从是预后良好的重要因素。 展开更多
关键词 儿童 急性淋巴细胞白血病 无事生存 COX比例风险回归模型
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树突状细胞对自体自然杀伤细胞体外扩增及功能的影响 被引量:2
10
作者 李娟 赵春亭 +4 位作者 孟冬梅 孙篷篷 杨颉 陈兵 赵新东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期898-902,共5页
本研究探讨树突状细胞(DC)对自体自然杀伤(NK)细胞体外扩增和功能的影响及其机制。用干细胞培养液(SCGM)在37℃、5%CO2、饱和湿度培养条件下以rhIL-2体外扩增NK细胞10天后,将自体DC与NK细胞以5∶1(5∶1组)和1∶1(1∶1组)的比例混合继续... 本研究探讨树突状细胞(DC)对自体自然杀伤(NK)细胞体外扩增和功能的影响及其机制。用干细胞培养液(SCGM)在37℃、5%CO2、饱和湿度培养条件下以rhIL-2体外扩增NK细胞10天后,将自体DC与NK细胞以5∶1(5∶1组)和1∶1(1∶1组)的比例混合继续培养。14、21天时计算5∶1组、1∶1组和对照组的NK细胞扩增倍数,流式细胞术测定细胞表面CD3、CD56/16的表达,MTT法检测NK细胞的功能,ELISA法检测各培养组上清液中TNF-α和IL-12p70的含量。结果表明:14天时5∶1、1∶1组和对照组的扩增倍数分别为29.25±4.01、21.23±2.91和16.26±1.58,3组间比较差别有统计学意义(p<0.05)。同组不同时间比较,14天时扩增倍数最高(p<0.05)。14天时3组CD3-、CD56/16+表达率分别为(64.6±7.8)%、(50.6±8.7)%和(34.8±5.1)%,5∶1组表达率最高(p<0.05)。14天时3组对K562细胞的杀伤率分别为(87.4±6.8)%、(75.4±6.3)%和(63.7±3.8)%,5∶1组杀伤活性明显高于其它2组(p<0.05)。5∶1组上清液中TNF-α和IL-12p70的含量均分别高于其它各组(p均<0.05)。结论:DC与NK细胞混合培养,能以比例依赖的方式增加NK细胞的扩增倍数,增强NK细胞的功能。DC增加NK细胞的扩增倍数与DC分泌的IL-12有关,NK细胞功能增强与NK细胞分泌的TNF-α增高有关。 展开更多
关键词 自体自然杀伤细胞 树突状细胞 体外扩增 细胞毒性
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中期因子及血管内皮生长因子在多发性骨髓瘤患者骨髓中的表达及意义 被引量:5
11
作者 高顺姬 李广伦 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期1464-1467,共4页
本研究旨在探讨多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者中期因子(midkine,MK)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达水平及其与血管新生、临床预后的关系。应用实时荧光定量PCR检测31例MM患者和20例对照... 本研究旨在探讨多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者中期因子(midkine,MK)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达水平及其与血管新生、临床预后的关系。应用实时荧光定量PCR检测31例MM患者和20例对照组骨髓单个核细胞MK和VEGF mRNA的表达。结果表明:MM患者骨髓MNC中MK和VEGF表达量均明显高于对照组(p<0.05,p<0.01),且MK和VEGF的表达之间有显著相关性(r=0.692,p<0.01)。MK和VEGF的表达在Ⅰ期和Ⅱ期患者之间无显著差异(p>0.05),而Ⅲ期患者MK、VEGF表达均较Ⅰ期和Ⅱ期显著升高(p<0.05,p<0.01),治疗前后骨髓MNC中MK、VEGF mRNA表达水平存在显著差异(p<0.05,p<0.01)。结论:MK、VEGF高表达可能与MM血管新生、病情进展有关,且二者存在一定的协同作用,因此监测MK和VEGF表达水平可能对指导MM治疗和估计预后有一定意义。 展开更多
关键词 中期因子 血管内皮生长因子 多发性骨髓瘤 实时荧光定量PCR
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儿童嗜酸性粒细胞增多症15例临床分析 被引量:3
12
作者 潘华 孙立荣 +5 位作者 李学荣 庞秀英 卢愿 宋爱琴 仲任 赵艳霞 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期679-681,共3页
目的探讨嗜酸性粒细胞增多症的病因、临床表现、诊断和转归,提高对儿童嗜酸性粒细胞增多症的认识。方法回顾性分析2001年4月-2007年4月住院的15例嗜酸性粒细胞增多症患儿的临床资料。结果病因主要为变态反应性疾病(4例)、恶性肿瘤(4例)... 目的探讨嗜酸性粒细胞增多症的病因、临床表现、诊断和转归,提高对儿童嗜酸性粒细胞增多症的认识。方法回顾性分析2001年4月-2007年4月住院的15例嗜酸性粒细胞增多症患儿的临床资料。结果病因主要为变态反应性疾病(4例)、恶性肿瘤(4例)、感染性疾病(寄生虫感染3例,病毒感染1例)、药物反应(2例),原因不明1例;临床表现多为发热(86.7%)、乏力(46.7%)、咳嗽(40.0%)、浅表淋巴结及肝脾肿大(53.3%);除恶性肿瘤外,经治疗多数预后良好。结论儿童嗜酸性粒细胞增多症以继发性为主,多见于变态反应性疾病、恶性肿瘤、寄生虫感染;对嗜酸性粒细胞增多患儿需进行全身各系统评估,寻找病因,警惕肿瘤,予以积极病因治疗。 展开更多
关键词 嗜酸性粒细胞增多症 继发性 儿童
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血清神经元特异性烯醇化酶对神经母细胞瘤的诊治价值 被引量:7
13
作者 李晓玲 孙立荣 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期435-437,共3页
目的探讨血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)在神经母细胞瘤(NB)患儿的诊断、分期及疗效评价中的作用。方法分析30例NB患儿、20例肾母细胞瘤(WT)及横纹肌肉瘤(RB)患儿,以及20例正常儿童的临床资料,检测血清NSE水平,分析其与疾病的关系。结果... 目的探讨血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)在神经母细胞瘤(NB)患儿的诊断、分期及疗效评价中的作用。方法分析30例NB患儿、20例肾母细胞瘤(WT)及横纹肌肉瘤(RB)患儿,以及20例正常儿童的临床资料,检测血清NSE水平,分析其与疾病的关系。结果 30例初诊NB患儿的血清NSE水平升高,为(87.5±69.5)ng/ml,30例初诊WT及RB患儿血清NSE水平处于正常范围,为(6.30±3.30)ng/ml,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ期NB患儿血清NSE较Ⅰ、Ⅱ期增高;经2个疗程强化疗后,NB患儿血清NSE水平[(12.8±4.20)ng/ml]较治疗前明显下降(P<0.05);复发的7例血清NSE水平均升高,为(54.9±34.8)ng/ml,无复发的23例患儿血清NSE为(12.0±4.0)ng/ml,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NSE测定对神经母细胞瘤的早期诊断、分期及治疗过程中动态监测疗效评价具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 神经特异性烯醇化酶 神经母细胞瘤 儿童
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人K562白血病细胞来源的树突状细胞低温冻存方法的研究 被引量:1
14
作者 孟冬梅 赵春亭 +2 位作者 王宝中 杨颉 陈兵 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期788-792,共5页
本研究的目的是探讨经低温保存的树突状细胞 (dendriticcell,DC)的生物学特性 ,寻找一种较为简便有效的冻存方式 ,为DC的临床过继回输提供保存方法。将由K5 62细胞诱导培养产生的DC(K5 62 DC) ,用含 10 %二甲亚砜 (DMSO)及 2 0 %胎牛血... 本研究的目的是探讨经低温保存的树突状细胞 (dendriticcell,DC)的生物学特性 ,寻找一种较为简便有效的冻存方式 ,为DC的临床过继回输提供保存方法。将由K5 62细胞诱导培养产生的DC(K5 62 DC) ,用含 10 %二甲亚砜 (DMSO)及 2 0 %胎牛血清 (FCS)的RPMI 1640作为冻存剂 ,利用分步法分别将其冻存于 - 80℃冰箱及- 196℃液氮中 ,然后于不同时间将K5 62 DC复苏 ,复苏后检测两组细胞的存活率、表面分子表达、刺激指数及其介导CTL对K5 62细胞的杀伤率 ,比较冻存前后及两组间的差异。结果发现 ,冻存前后K5 62 DC (K5 62 DC于- 80℃或液氮冻存 1月 )细胞形态无明显变化 ,表面分子表达及刺激T细胞增殖的能力无明显差别 (P >0 .0 5 )。此外 ,在 - 80℃冰箱及 - 196℃液氮中冻存的K5 62 DC ,在冻存后 1月以内复苏 ,细胞的存活率、刺激T细胞增殖的能力及其介导的杀伤效应无差别 ;但当冻存时间超过 1月时 ,两组间有明显差别。结论 ,两种冻存方式冻存K5 62 DC ,冻存时间较短时 ( 1月以内 ) ,其刺激淋巴细胞及其介导CTL的杀伤能力相同 ;冻存时间较长时 ( >1月 ) ,- 196℃液氮效果明显优于 - 80℃超低温冰箱。 展开更多
关键词 K562细胞 树突状细胞 冷冻保存 混合淋巴细胞反应
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胞壁酰二肽对儿童急性白血病骨髓树突状细胞体外扩增的影响 被引量:3
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作者 李晓玲 孙立荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期963-966,共4页
本研究旨在探讨胞壁酰二肽(muramyl dipeptide,MDP)对急性白血病儿童骨髓树突状细胞(DC)体外扩增及成熟的影响。采用Ficoll-Hypaque法分离急性白血病患儿骨髓单个核细胞。实验分为4组:对照组DC以含10%FCS的RPMI1640培养液培养;实验1组:D... 本研究旨在探讨胞壁酰二肽(muramyl dipeptide,MDP)对急性白血病儿童骨髓树突状细胞(DC)体外扩增及成熟的影响。采用Ficoll-Hypaque法分离急性白血病患儿骨髓单个核细胞。实验分为4组:对照组DC以含10%FCS的RPMI1640培养液培养;实验1组:DC单独应用胞壁酰二肽;培养实验2组:DC用rhGM-CSF+rhIL-4+rhTNF-α培养;实验3组:DC用rhGM-CSF+rhIL-4+rhTNF-α+MDP培养,分别诱导培养DC。每日光学显微镜下观察细胞生长情况及细胞形态,培养8天后,计数各组细胞数量,并应用流式细胞术检测各组细胞免疫表型。结果表明:①实验各组均得到一定数量典型的DC,对照组DC数(0.85±0.23)×105/L,而实验1组、实验2组、实验3组DC数分别为(2.31±0.24)、(3.26±0.37)及(4.16±0.34)×105/L,均明显高于对照组(p均<0.01);实验1组DC数低于2组及3组(p均<0.01);实验3组DC数明显高于2组(p<0.01)。②对照组、实验1组、实验2组及实验3组的HLA-DR细胞比例分别为19.98±3.74、37.24±4.32、58.81±2.08、77.48±5.57,实验1组明显高于对照组(p<0.01),而低于实验2组、实验3组(p均<0.01);实验3组明显高于2组(p<0.01)。对照组、实验1组、实验2组及实验3组的CD1a细胞比例分别为11.46±2.43、28.71±6.64、46.92±4.78、57.03±3.07,实验1组明显高于对照组(p<0.01),而低于实验2组、实验3组(p均<0.01);实验3组明显高于2组(t=3.98,p<0.01)。对照组、实验1组、实验2组及实验3组的CD83细胞比例分别为(13.05±5.70)%、(36.32±5.61)%、(54.95±7.83)%、(75.70±6.67)%,实验1组明显高于对照组(p<0.01),而低于实验2组、实验3组(p均<0.01);实验3组明显高于2组(p<0.01)。结论:MDP不仅对急性白血病患儿骨髓DC有扩增作用,而且能促进其成熟,并能协同细胞因子促进DC增殖和成熟,但MDP促进DC增殖的能力弱于其与细胞因子的联合作用。 展开更多
关键词 胞壁酰二肽 骨髓树突状细胞 急性白血病 细胞扩增
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急性淋巴细胞性白血病门冬酰胺酶治疗期间凝血功能检测的必要性及干预治疗 被引量:1
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作者 孙立荣 庞秀英 +4 位作者 李学荣 卢愿 宋爱琴 仲任 赵艳霞 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期930-932,共3页
目的探讨儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)采用左旋门冬酰胺酶(L-Asp)治疗期间凝血功能检测的必要性及干预治疗的效果。方法将采用L-Asp治疗的196例ALL患儿随机分为对照组和干预组(输注新鲜冰冻血浆),分析应用L-Asp前后凝血指标包括凝血... 目的探讨儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)采用左旋门冬酰胺酶(L-Asp)治疗期间凝血功能检测的必要性及干预治疗的效果。方法将采用L-Asp治疗的196例ALL患儿随机分为对照组和干预组(输注新鲜冰冻血浆),分析应用L-Asp前后凝血指标包括凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原定量(FIB)、抗凝血酶Ⅲ(AT)及D-二聚体的变化;血凝异常与肝转氨酶及血清蛋白质水平的关系;血凝异常的相关并发症及预防性输注新鲜冰冻血浆对血凝和出血倾向的影响。结果①L-Asp应用2次后,两组均有少数患儿出现APTT延长;L-Asp应用4次后,干预组APTT、FIB、及AT异常率分别为11.2%、11.2%和7.5%,而对照组分别为25.8%、43.8%和23.6%。②对照组与干预组在L-Asp应用前血清白蛋白及球蛋白水平均在正常水平,L-Asp应用6次时,两组白蛋白及球蛋白水平均明显下降,以对照组下降明显。对照组FIB及AT含量与血清蛋白质总量呈高度正相关。③血凝异常的程度与转氨酶升高程度无相关性。④对照组1例出现血凝异常的同时伴有颅内出血。而干预组无1例血栓形成或出血等并发症。结论ALL患儿应用L-Asp后APTT延长,FIB及AT显著下降,而与D-二聚体水平、肝转氨酶升高程度无关,与血清蛋白质水平密切相关。预防性新鲜冰冻血浆可以减少血栓/出血并发症。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞性白血病 儿童 左旋门冬酰胺酶 凝血功能 新鲜冰冻血浆
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组织因子途径抑制物2诱导人卵巢癌A2780细胞凋亡及其机制研究 被引量:5
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作者 仲任 宋善俊 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期635-638,共4页
目的探讨组织因子途径抑制物2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)表达对卵巢癌细胞杀伤和诱导凋亡的机制。方法脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2转染卵巢癌细胞系A2780,用G418筛选阳性细胞,经逆转录聚合... 目的探讨组织因子途径抑制物2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)表达对卵巢癌细胞杀伤和诱导凋亡的机制。方法脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2转染卵巢癌细胞系A2780,用G418筛选阳性细胞,经逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、Western blot技术检测转染前后卵巢癌细胞中TFPI-2 mRNA以及相应蛋白质表达情况;利用流式细胞仪检测转染前后卵巢癌细胞凋亡率的改变;通过Western blot技术检测转染前后凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的变化情况。结果转染成功的卵巢癌细胞证实有TFPI-2 mRNA和相应蛋白质的表达;转染TFPI-2后细胞凋亡率明显增加[(62.32±3.72)%vs(0.56±0.17)%,P<0.01],且Caspase-3、Caspase-9比转染前高表达。结论 TFPI-2可通过增加Caspase-3、Caspase-9的活性,诱导卵巢癌细胞的凋亡,为进一步开展卵巢癌基因治疗提供实验依据。 展开更多
关键词 组织因子途径抑制物2 卵巢肿瘤 细胞凋亡
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卡介苗HSP70基因转染HL-60细胞瘤苗制备及抗瘤机制的研究 被引量:1
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作者 李晓玲 刘春雷 孙立荣 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期462-466,共5页
目的构建卡介苗(BCG)热休克蛋白70(HSP70)的真核表达载体,通过基因转染表达HL-60细胞表面,研究其抗瘤作用和机制。方法利用多聚酶链反应(PCR)方法扩增HSP70基因,与真核表达载体pDisplay连接,构建重组载体pDisplay-HSP70,并利用脂质体200... 目的构建卡介苗(BCG)热休克蛋白70(HSP70)的真核表达载体,通过基因转染表达HL-60细胞表面,研究其抗瘤作用和机制。方法利用多聚酶链反应(PCR)方法扩增HSP70基因,与真核表达载体pDisplay连接,构建重组载体pDisplay-HSP70,并利用脂质体2000将其转染HL-60细胞。HL-60细胞分为未转染的HL60-wt组、转染空载体pDisplay的HL60-pDisplay组、转染重组载体pDisplay-HSP70的HL60-HSP70组,分别与外周血T淋巴细胞培养72 h,羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记和流式细胞术测定淋巴细胞增殖指数,ELISA法检测IFN-γ水平;各组HL-60细胞与T淋巴细胞混合培养6 d后获细胞毒性T淋巴细胞(CTL)效应细胞,加入HL-60靶细胞以不同效靶比共培育12 h,LDH释放改良法检测CTL细胞杀伤活性。结果扩增获得的HSP70基因大小与理论值一致,重组载体pDisplay-HSP70构建正确。HSP70表达在转染后的HL-60细胞表面。转染后的HL-60细胞,即HL60-HSP70组能明显促进异体T细胞扩增,该组CFSE阳性率、IFN-γ含量、CTL杀伤率均高于HL60-wt和HL60-pDisplay组,差异均有统计学意义(P<0.05);后两组间差异则无统计学意义(P>0.05);随效靶比增大,HL60-HSP70组CTL细胞杀伤活性逐渐增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建真核表达载体pDisplay-HSP70,并制备膜表面表达BCG HSP70的HL-60细胞瘤苗,HSP70基因转染后能明显增强HL-60细胞的免疫原性。 展开更多
关键词 卡介苗 热休克蛋白70 基因转染 HL-60 肿瘤疫苗
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卡介苗HSP70基因转染对小鼠淋巴细胞白血病细胞免疫原性的影响 被引量:1
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作者 李晓玲 孙立荣 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期174-178,共5页
目的探讨卡介苗热休克蛋白70(BCG HSP70)基因转染对小鼠淋巴细胞白血病细胞(L1210)致瘤性及免疫原性的影响。方法利用脂质体2000将BCG HSP70基因转入小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210表面,获得高表达HSP70分子的L1210-HSP70细胞,作为肿瘤... 目的探讨卡介苗热休克蛋白70(BCG HSP70)基因转染对小鼠淋巴细胞白血病细胞(L1210)致瘤性及免疫原性的影响。方法利用脂质体2000将BCG HSP70基因转入小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210表面,获得高表达HSP70分子的L1210-HSP70细胞,作为肿瘤疫苗分别对裸鼠及同系小鼠致瘤性、瘤苗对荷瘤小鼠的免疫治疗作用以及瘤苗对L1210细胞攻击的免疫保护作用进行研究。结果 BCG HSP70成功表达在转染后的L1210细胞表面,并具有与野生型细胞同样的致瘤性。同系小鼠DBA/2皮下接种L1210-HSP70细胞后肿瘤生长缓慢或不成瘤;相对于L1210组和L1210-neo组,生存期明显延长,小鼠脾淋巴细胞中针对L1210细胞的特异性T细胞数量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);瘤体病理切片示彻底凝固性坏死,周边可见淋巴样细胞,免疫组化检测示大量CD8+T淋巴细胞浸润。L1210-HSP70细胞瘤苗具有对荷瘤小鼠的免疫治疗作用,以及抗肿瘤攻击的免疫保护作用,均表现为肿瘤出瘤时间明显延长,生长受到显著抑制,瘤体平均直径明显减小;荷瘤小鼠生存时间明显长于L1210组、L1210-neo组和PBS组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BCG HSP70基因转染能有效增强肿瘤细胞的免疫原性,激活特异性T细胞,降低肿瘤细胞的致瘤性;并具有提高宿主抗瘤免疫作用。 展开更多
关键词 卡介苗 热休克蛋白70 肿瘤疫苗 肿瘤免疫 小鼠
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骨髓增生异常综合征患者骨髓细胞nm23-H_1 mRNA表达及临床意义
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作者 赵新东 吴少玲 +1 位作者 迟作华 刘金兰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期190-192,共3页
The purpose of this investigation was to explore the expression of nm23 H 1 gene in patients with myelodysplastic syndrome(MDS) and evaluate the relationship between nm23 H 1 expression and therapeutic outcomes. Semi ... The purpose of this investigation was to explore the expression of nm23 H 1 gene in patients with myelodysplastic syndrome(MDS) and evaluate the relationship between nm23 H 1 expression and therapeutic outcomes. Semi quantitative RT PCR was used to detect the expression of nm23 H 1 mRNA in marrow mononuclear cells from 28 MDS patients and 15 normal subjects. nm23 H 1/GAPDH ratio≥0.5 was believed to a positive case. The expression of nm23 H 1 was positive in 24 of 28 MDS patients, and the average level was 0.89±0.56. nm23 H 1 mRNA was negative in normal controls. The overexpression of nm23 H 1 mRNA in MDS patients could predict outcome of treatment and prognosis for MDR patients. 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 骨髓细胞 NM23-H1基因 基因表达 白血病
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