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rAAV2-slug-siRNA对原位胰腺癌移植瘤转移和血管生成影响的实验研究 被引量：2
1
作者 陈俭云 崔海宁 +1 位作者 王正文 张克君 《海南医学院学报》 CAS 2012年第1期5-8,11,共5页
目的:研究slug基因的RNA干扰重组腺病毒载体(rAAV2-slug-siRNA)对原位胰腺癌移植瘤的转移和血管生成的影响。方法:建立胰腺癌细胞株AsPC-1裸鼠原位胰腺癌移植瘤模型,随机分成3组,每组8只,分为空白对照组(腹腔注射生理盐水)、阴性对照组... 目的:研究slug基因的RNA干扰重组腺病毒载体(rAAV2-slug-siRNA)对原位胰腺癌移植瘤的转移和血管生成的影响。方法:建立胰腺癌细胞株AsPC-1裸鼠原位胰腺癌移植瘤模型,随机分成3组,每组8只,分为空白对照组(腹腔注射生理盐水)、阴性对照组(腹腔注射rAAV2-GFP)、实验组(腹腔注射rAAV2-slug-siRNA)。10周后利用CO2麻醉法处死裸鼠,观察原位胰腺癌移植瘤的重量,抑瘤率,肝、胃肠、腹腔转移,腹水等情况,及肿瘤细胞微血管密度(MVD)。RT-PCR检测移植瘤的slug mR-NA表达,Western blot检测slug蛋白的表达。结果:胰腺癌细胞株AsPC-1裸鼠原位胰腺癌移植瘤模型建立成功,成瘤率100%。实验组原位胰腺癌移植瘤瘤重明显低于阴性对照组(P<0.05),抑瘤率为70.83%。阴性对照组诱发的裸鼠胰腺癌质地硬,肿块向四周浸润并形成癌性粘连,与阴性对照组相比,实验组腹膜、肝、毗邻脏器转移率和形成腹水率均明显下降(P<0.05)。实验组MVD明显少于阴性对照组(P<0.05),slug mRNA相对表达量(RT-PCR)和slug蛋白相对表达量(Western blot)明显低于阴性对照组(P<0.05)。结论:rAAV2-slug-siRNA可能通过抑制肿瘤血管生成而抑制原位胰腺癌移植瘤转移。 展开更多
关键词 胰腺癌 slug基因的RNA干扰重组腺病毒载体 移植瘤转移 血管生成
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rAAV2-EGFP-Slug-siRNA-U6对人胰腺癌血管生成的影响及其机制探讨
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作者 崔海宁 陈俭云 +7 位作者 王正文 张克君 余壮明 王齐全 王明华 朱东明 宋彩霞 张泽米 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1161-1164,共4页
目的:构建并制备携带目的基因的rAAV2-EGFP-Slug-siRNA-U6(Slug-siRNA)腺相关病毒载体,探讨Slug干扰对人胰腺癌细胞株AsPC-1血管生成的影响及其机制。方法:利用以前试验的方法构建重组质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA-U6。鸡胚绒毛尿囊膜(... 目的:构建并制备携带目的基因的rAAV2-EGFP-Slug-siRNA-U6(Slug-siRNA)腺相关病毒载体,探讨Slug干扰对人胰腺癌细胞株AsPC-1血管生成的影响及其机制。方法:利用以前试验的方法构建重组质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA-U6。鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验检测rAAV2-EGFP-Slug-siRNA-U6对细胞血管生成的影响。Western blot及RT-PCR方法鉴定转染前后AsPC-1细胞Slug与VEGF蛋白及mRNA表达。结果:携带编码靶向Slug的小发夹状干扰RNA序列的腺相关病毒载体rAAV2-EGFP-Slug-siRNA-U6成功构建。rAAV2-EGFP-Slug-siRNA-U6抑制细胞血管生成。Slug-siRNA有效抑制AsPC-1细胞Slug与VEGF蛋白及mRNA的表达。结论:rAAV2-EGFP-Slug-siRNA-U6抑制细胞血管生成,其机制可能与干扰Slug及VEGF的表达有关。 展开更多
关键词 SLUG 小干扰RNA 腺相关病毒 胰腺癌 血管生成
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