建立紫外线A（UVA）辐射损伤HaCaT细胞的病理模型，从酸性鞘磷脂酶-JNK信号通路的角度研究扇贝多肽（Polypeptide from Chlamys farreri，PCF）抑制UVA诱导HaCaT细胞凋亡的分子机制．采用Hoechst 33258染色结合琼脂糖凝胶电泳分析细胞...建立紫外线A（UVA）辐射损伤HaCaT细胞的病理模型，从酸性鞘磷脂酶-JNK信号通路的角度研究扇贝多肽（Polypeptide from Chlamys farreri，PCF）抑制UVA诱导HaCaT细胞凋亡的分子机制．采用Hoechst 33258染色结合琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡；用RT—PCR法和细胞免疫荧光染色检测胞内酸性鞘磷脂酶（acid sphingomyelinase，aSMase）的表达；蛋白印迹法检测细胞内JNK及磷酸化JNK的蛋白水平．结果表明，PCF可明显地抑制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡；aSMase抑制剂Desipramine和JNK抑制剂SP600125均可阻断UVA引起的细胞凋亡；PCF的浓度在1．42～5．68mmol／L范围内可依赖性地抑制UVA辐射后细胞内aSMase的表达量以及JNK蛋白的磷酸化；预先加入Desipramine则抑制UVA引起的JNK蛋白的磷酸化．表明PCF通过阻断aSMase—JNK通路来抑制UVA诱导HaCaT细胞凋亡．展开更多
目的探讨益生菌对大鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法建立酒精性肝损伤模型,同时以碧悠益生菌发酵乳5×108CFU·kg-1·d-1灌胃干预,持续8周。HE染色观察各组大鼠肝组织病理学改变;透射电镜观察肝及小肠组织超微结构变化;酶...目的探讨益生菌对大鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法建立酒精性肝损伤模型,同时以碧悠益生菌发酵乳5×108CFU·kg-1·d-1灌胃干预,持续8周。HE染色观察各组大鼠肝组织病理学改变;透射电镜观察肝及小肠组织超微结构变化;酶法检测血清转氨酶及ALP活力;ELISA法检测血清DAO和D-LA水平;免疫组化法检测小肠组织FOXO4表达情况;16S r DNA高通量测序进行粪便肠道菌群结构分子生态学分析。结果益生菌干预使酒精诱导的肝脂肪变性得到明显缓解,肝及小肠组织超微结构亦得到不同程度改善,其病理学评分明显降低(P<0.05);同时,血清ALT、AST、ALP、DAO和D-LA水平均明显下降,小肠FOXO4表达明显提高(P<0.05)。益生菌干预在肠道菌群菌门、菌属水平均较酒精模型组有不同程度改变,丰度最高的前20个菌属与正常对照组一致率达到90%,对恢复肠道菌群多样性及丰度正常状态具有一定调节作用。结论益生菌对大鼠酒精性肝损伤具有一定保护作用,其作用机制可能与益生菌纠正肠道菌群结构紊乱,修复肠道屏障功能,改善肠道内环境有关。展开更多
文摘目的探讨益生菌对大鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法建立酒精性肝损伤模型,同时以碧悠益生菌发酵乳5×108CFU·kg-1·d-1灌胃干预,持续8周。HE染色观察各组大鼠肝组织病理学改变;透射电镜观察肝及小肠组织超微结构变化;酶法检测血清转氨酶及ALP活力;ELISA法检测血清DAO和D-LA水平;免疫组化法检测小肠组织FOXO4表达情况;16S r DNA高通量测序进行粪便肠道菌群结构分子生态学分析。结果益生菌干预使酒精诱导的肝脂肪变性得到明显缓解,肝及小肠组织超微结构亦得到不同程度改善,其病理学评分明显降低(P<0.05);同时,血清ALT、AST、ALP、DAO和D-LA水平均明显下降,小肠FOXO4表达明显提高(P<0.05)。益生菌干预在肠道菌群菌门、菌属水平均较酒精模型组有不同程度改变,丰度最高的前20个菌属与正常对照组一致率达到90%,对恢复肠道菌群多样性及丰度正常状态具有一定调节作用。结论益生菌对大鼠酒精性肝损伤具有一定保护作用,其作用机制可能与益生菌纠正肠道菌群结构紊乱,修复肠道屏障功能,改善肠道内环境有关。
