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日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗抗生殖免疫的研究 被引量:37
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作者 易新元 曾宪忠 +3 位作者 曾宪芳 汪世平 舒新华 LarryMcreynolds 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第1期45-47,共3页
目的 探讨日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗的保护。方法 分别用Sj31BIN免疫昆明鼠和BALB/c 小鼠,攻击感染后6w 计数成虫负荷及粪便和组织内虫卵数。结果 用构建的Sj31BIN免疫小鼠可影响成虫发育,肝组织减... 目的 探讨日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗的保护。方法 分别用Sj31BIN免疫昆明鼠和BALB/c 小鼠,攻击感染后6w 计数成虫负荷及粪便和组织内虫卵数。结果 用构建的Sj31BIN免疫小鼠可影响成虫发育,肝组织减卵率为59-3%~65-0% ,肠组织减卵率为57-6% ~62-1% ,粪便减卵率为86-5% 。结论 Sj31BIN 可诱导小鼠产生抑制雌虫生殖的免疫力。 展开更多
关键词 日本血吸虫 组织蛋白酶B DNA疫苗 抗生殖系统
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RNA原位杂交法检测组织内弓形虫的实验研究 被引量:10
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作者 史晓燕 赵恒梅 +1 位作者 曾宪忠 韩敏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期214-216,共3页
目的 探讨RNA原位杂交法在弓形虫病理检测中的应用。方法 设计并合成弓形虫SAG2基因来源的寡核苷酸探针。弓形虫RH株感染昆明株小鼠 ,分别于感染后第 2、3、4、5、6、7天处死 ,取肝组织制备石蜡标本进行RNA原位杂交 ,结果同HE染色及... 目的 探讨RNA原位杂交法在弓形虫病理检测中的应用。方法 设计并合成弓形虫SAG2基因来源的寡核苷酸探针。弓形虫RH株感染昆明株小鼠 ,分别于感染后第 2、3、4、5、6、7天处死 ,取肝组织制备石蜡标本进行RNA原位杂交 ,结果同HE染色及免疫组化相比较。结果 RNA原位杂交法于感染后第 2天检到阳性结果 ,组织内弓形虫的检出率 (2 8/ 2 8)高于免疫组化 (2 1/ 2 8)及HE染色法 (16 / 2 8)。结论 RNA原位杂交法是一种简便准确的弓形虫病理检测方法。 展开更多
关键词 RNA原位杂交法 检测 弓形虫 实验研究 免疫组化 病理诊断
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日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗血清抗体与抗生殖免疫关系的初步研究 被引量:7
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作者 曾宪忠 易新元 曾宪芳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期40-42,共3页
目的 探讨日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗 (Sj31B1N)抗生殖免疫的可能机理。 方法 用Sj31B1N免疫小鼠 ,每 2周 1次 ,每次免疫前均尾静脉采血 1次 ,作血清抗体动态变化分析 ,免疫 4次后尾蚴攻击感染。感染后 4 5天 ,计数成虫负荷和肝、... 目的 探讨日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗 (Sj31B1N)抗生殖免疫的可能机理。 方法 用Sj31B1N免疫小鼠 ,每 2周 1次 ,每次免疫前均尾静脉采血 1次 ,作血清抗体动态变化分析 ,免疫 4次后尾蚴攻击感染。感染后 4 5天 ,计数成虫负荷和肝、肠组织内虫卵数。结果 用Sj31B1N免疫小鼠后第 2周部分小鼠血清中出现了抗体 ,随时间延长 ,出现抗体阳性组小鼠数量增多 ,抗体滴度增加。抗体阳性组小鼠与阴性组小鼠对比 ,成虫减少率为 4 0 .6% ,肝组织减卵率为 4 8.0 % ,肠组织减卵率为 4 5.4 %。结论 核酸疫苗Sj31B1N可有效地诱导小鼠产生抗体 ,并且具有免疫保护作用。核酸疫苗Sj31B1N所诱导的体液免疫可能是抗日本血吸虫生殖免疫的机理之一。 展开更多
关键词 核酸疫苗 日本血吸虫 抗体 抗生殖免疫 组织蛋白酶B
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恶性疟原虫AMA-1(Ⅲ)基因在毕赤酵母系统中的高效表达 被引量:4
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作者 张忠广 赵恒梅 宫玉香 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第3期240-243,共4页
目的 利用毕赤酵母高效表达系统表达用于下游实验的恶性疟原虫AMA - 1(Ⅲ )重组蛋白。方法 将测序正确的AMA - 1(Ⅲ )基因插入毕赤酵母分泌型表达载体 pPIC9k中 ,用高压电穿孔转化法将目的基因转化入酵母感受态细胞GS115 ,筛选高拷贝... 目的 利用毕赤酵母高效表达系统表达用于下游实验的恶性疟原虫AMA - 1(Ⅲ )重组蛋白。方法 将测序正确的AMA - 1(Ⅲ )基因插入毕赤酵母分泌型表达载体 pPIC9k中 ,用高压电穿孔转化法将目的基因转化入酵母感受态细胞GS115 ,筛选高拷贝转化子 ,利用甲醇进行诱导表达。表达产物用SDS -PAGE和免疫印迹进行检测。结果 AMA - 1(Ⅲ )蛋白表达于培养上清 ,蛋白的相对分子质量分别为 16 .3ku ,免疫印迹结果表明AMA - 1(Ⅲ )基因表达蛋白能被抗AMA - 1(Ⅲ )的单抗所识别 ,出现特异条带 ,推算AMA - 1(Ⅲ )蛋白的表达量为 0 .8g/L。 结论 酵母细胞表达系统可高效表达在构象方面接近天然蛋白的AMA - 1(Ⅲ ) 展开更多
关键词 疟原虫 恶性 裂殖子顶端膜抗原1 疟疾疫苗 毕赤氏酵母
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恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白1C末端片段在毕赤酵母表达系统的高效表达与纯化(英文) 被引量:3
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作者 张忠广 赵恒梅 宫玉香 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第12期1047-1051,共5页
目的利用毕赤酵母表达系统高效表达并获得纯度较为理想的恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白1 C末端片段(MSP-119)重组蛋白。方法将带有6-his基因的MSP-119基因序列插入毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9k中,用高压电穿孔转化法将目的基因转化入... 目的利用毕赤酵母表达系统高效表达并获得纯度较为理想的恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白1 C末端片段(MSP-119)重组蛋白。方法将带有6-his基因的MSP-119基因序列插入毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9k中,用高压电穿孔转化法将目的基因转化入酵母感受态细胞GS115,筛选出高拷贝转化子,优化表达条件,利用甲醇进行诱导表达。表达产物用SDS-PAGE和免疫印迹进行检测。结果毕赤酵母分泌表达MSP-119蛋白,免疫印迹结果表明MSP-119基因表达蛋白能被抗MSP-119的单抗所识别,出现特异条带,将培养上清利用Ni-NTA柱纯化后,推算MSP-119蛋白的表达量为1.0g/L。结论酵母细胞表达系统可高效表达可免疫识别的MSP-119重组蛋白。 展开更多
关键词 疟原虫 恶性 MSP1 疟疾疫苗 毕赤氏酵母 表达
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PCR技术对大鼠卡氏肺孢子虫DNA的检测 被引量:5
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作者 宫玉香 张忠广 +1 位作者 韩敏 孟庆军 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第1期77-78,共2页
目的 探讨诊断卡氏肺孢子虫感染的最佳方法。方法 建立大鼠动物模型,肺涂片用吉氏染色法查肺孢子虫包囊,支气管灌洗液、肺组织和血液标本,用PCR技术进行卡氏肺孢子虫DNA的检测,共计实验组大鼠12 只及对照组8 只。结果 ... 目的 探讨诊断卡氏肺孢子虫感染的最佳方法。方法 建立大鼠动物模型,肺涂片用吉氏染色法查肺孢子虫包囊,支气管灌洗液、肺组织和血液标本,用PCR技术进行卡氏肺孢子虫DNA的检测,共计实验组大鼠12 只及对照组8 只。结果 实验组大鼠,吉氏染色法卡氏肺孢子虫包囊检出率为66-7% ,PCR技术支气管灌洗液、肺组织和血液标本,卡氏肺孢子虫DNA检出率分别为81-8 % 、50% 和50% 。比肺印片提前2 周检出。对照组大鼠,吉氏染色法未检出卡氏肺孢子虫包囊,在支气管灌洗液和血液标本中,PCR技术测出了卡氏肺孢子虫DNA。结论 在血液标本中PCR的成功应用,为卡氏肺孢子虫感染的流行病学调查及人类卡氏肺孢子虫肺炎的诊断,提供了一种有用的、非创伤性的方法。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 卡氏肺孢子虫 DNA
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免疫抑制不同时间血液及BALF中细胞成分的变化与卡氏肺孢子虫及炎性细胞反应之观察
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作者 曾宪忠 宫玉香 +3 位作者 张忠广 常志尚 王元松 刘宪珍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期984-986,共3页
目的实验观察GC免疫抑制对卡氏肺孢子虫肺炎的发病影响。方法采用清洁级Wistar大鼠31只,26只大鼠每w 2次皮下注射地塞米松建立PCP模型,阴性对照组(5只),在第2、4、6、8w分别杀死大鼠,采集血液及BALF进行细胞计数并涂片分析血液和BALF中... 目的实验观察GC免疫抑制对卡氏肺孢子虫肺炎的发病影响。方法采用清洁级Wistar大鼠31只,26只大鼠每w 2次皮下注射地塞米松建立PCP模型,阴性对照组(5只),在第2、4、6、8w分别杀死大鼠,采集血液及BALF进行细胞计数并涂片分析血液和BALF中细胞成分。结果PCP大鼠血液中白细胞总数为(35.8±4.35)×109/L,淋巴细胞比例为(23.4±8.2)%,巨噬细胞数为(8.4±1.09)%,中性粒细胞比例为(68.2±8.35)%。PCP大鼠BALF中白细胞细胞总数为(35.24±8.10)×106/L,巨噬细胞比例为(84.9±2.49)%,淋巴细胞比例为(10.0±2.56)%,中性粒细胞比例为(5.1±1.73)%。结论PCP组中淋巴细胞减少是导致大鼠发生卡氏肺孢子虫感染的最关键的原因。大鼠BALF中巨噬细胞减少和功能减弱对卡氏肺孢子虫感染发生起主要帮助作用。中性粒细胞增加,推测和肺损伤有关。 展开更多
关键词 卡氏肺孢子虫(PCP) 支气管肺泡灌洗液(BALF) 白细胞 病理变化
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弓形虫滋养体的二维结构图像分析
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作者 赵恒梅 赵炜 +1 位作者 孙勇力 张忠广 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第11期958-959,共2页
目的建立并分析弓形虫滋养体的形态学数据和参数,为其构建三维结构奠定基础。方法用图象分析仪测量弓形虫滋养体及其细胞核的长径、短径、等效直径、圆度和长宽比计算其体积等参数。结果弓形虫滋养体长径为3.66±0.57μm,短径为1.79... 目的建立并分析弓形虫滋养体的形态学数据和参数,为其构建三维结构奠定基础。方法用图象分析仪测量弓形虫滋养体及其细胞核的长径、短径、等效直径、圆度和长宽比计算其体积等参数。结果弓形虫滋养体长径为3.66±0.57μm,短径为1.79±0.30μm,等效直径为2.29±0.37μm,周长为9.35±0.88μm,圆度为0.62±0.16,长宽比为0.51±0.16。细胞核的长径为2.18±0.60μm,短径为1.23±0.31μm,等效直径为1.48±0.38μm,周长为5.61±0.93μm,圆度为0.74±0.17,长宽比为0.60±0.16,虫体的表面积为4.37±0.97μm2,体积为7.09±1.75μm3;虫体细胞核的表面积为1.89±0.85μm2,体积为2.21±1.34μm3。结论本研究对虫体形态学数据和参数的建立,为量化和评价虫体的形态特征奠定了基础。 展开更多
关键词 弓形虫 滋养体 图象分析 形态测量 虫体细胞核
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