1株鸡毒支原体的分离鉴定及致病性研究

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作者 张伯顺 卜德新 +5 位作者 吕虹雨 黄冬 王睿智 于春梅 王进江 丛雁方 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第3期50-56,共7页

为了对1株从鸡场分离到的鸡毒支原体(MG)进行遗传进化分析及致病性研究。用MG的16S rRNA引物对山东省莱西市某鸡场疑似MG感染的气囊病料进行了PCR鉴定,结果可扩增到特异性条带。通过病原分离培养、16S rRNA基因测序比对获得MG分离株,命... 为了对1株从鸡场分离到的鸡毒支原体(MG)进行遗传进化分析及致病性研究。用MG的16S rRNA引物对山东省莱西市某鸡场疑似MG感染的气囊病料进行了PCR鉴定,结果可扩增到特异性条带。通过病原分离培养、16S rRNA基因测序比对获得MG分离株,命名为SDMg01株;低倍显微镜观察到,菌落呈典型的“荷包蛋”状;生化鉴定结果表明,该分离株能发酵葡萄糖,不水解精氨酸,不利用尿素。对分离株16S rRNA序列进行MEGA分析和构建系统进化树发现SDMg01分离株与其他MG菌株在同一进化分支上,其中与MG参考菌株(PG31)相似性为99.8%。对分离株SDMg01进行动物试验,感染8周龄的SPF鸡14 d后进行解剖,观察临床症状及气囊病理学变化;结果表明,SDMg01分离株致病性较强,可引起典型的气囊炎。本研究为MG诊断试剂的研制和疫苗候选毒株的筛选奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡毒支原体 16S rRNA 系统进化树 致病性

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伪狂犬病病毒gE/gI缺失株CY-6的构建及免疫效力初步研究

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作者 曲信芹 魏波 +5 位作者 徐丽丽 刁治君 韩成昊 蔡青秀 丛雁方 马爱琴 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第3期9-18,共10页

构建针对伪狂犬病病毒gE和gI基因缺失的重组转移质粒pBL-gI-gE,将PRV-CY-ΔgI/gE-GFP病毒、pBL-gI-gE转移载体和Lipofectamin 2000转染试剂共转染BHK-21细胞,蚀斑筛选纯化法得到重组病毒PRV-CY-ΔgI/gE,命名为CY-6株。将CY-6株C1代在BHK... 构建针对伪狂犬病病毒gE和gI基因缺失的重组转移质粒pBL-gI-gE,将PRV-CY-ΔgI/gE-GFP病毒、pBL-gI-gE转移载体和Lipofectamin 2000转染试剂共转染BHK-21细胞,蚀斑筛选纯化法得到重组病毒PRV-CY-ΔgI/gE,命名为CY-6株。将CY-6株C1代在BHK-21细胞增殖并传至10代,测定生长曲线、病毒含量、基因鉴定、特异性、纯净、毒力和免疫原性。结果CY-6株的生长曲线与亲本CY株无明显变化,C1~C10代毒的病毒含量为10^(8.17)~10^(8.68) TCID50/mL,基因鉴定显示gE基因无366 bp的目的条带,gD基因有1条217 bp的目的条带,gI基因无331 bp的目的条带,特异性检验显示均能被伪狂犬病病毒特异性阳性血清中和;纯净检验该毒种无菌、支原体及外源病毒污染;毒力试验试验猪均5/5健活,免疫原性试验免疫组5/5保护,CY株攻毒对照组5/5发病,其中3/5死亡。以上结果表明伪狂犬病病毒CY-6株符合生产用毒种的初步要求,为研制新型伪狂犬病病毒基因缺失灭活疫苗奠定基础。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 基因缺失 免疫效力

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二丁提取散的抗炎、镇痛和解热作用研究 被引量：2

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作者 陈昱骁 付海宁 +8 位作者 陈玲 栾明娜 张会梅 姚德勇 王艳玲 蔡青秀 章安源 尹伶灵 孙亚磊 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3861-3868,共8页

【目的】研究二丁提取散的抗炎、镇痛和解热作用。【方法】利用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、冰醋酸致小鼠扭体、脂多糖(LPS)致家兔发热法来研究二丁提取散的抗炎、镇痛和解热作用。试验小鼠随机分为5组,每组10只,分别为二丁提取散低、中、高... 【目的】研究二丁提取散的抗炎、镇痛和解热作用。【方法】利用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、冰醋酸致小鼠扭体、脂多糖(LPS)致家兔发热法来研究二丁提取散的抗炎、镇痛和解热作用。试验小鼠随机分为5组,每组10只,分别为二丁提取散低、中、高剂量组,阳性对照组(蒲地蓝组/阿司匹林组)和模型对照组。二丁提取散低、中、高剂量组及蒲地蓝组每日分别以含生药3.9、7.8、15.6和4.8 g/kg的剂量灌胃给药1次,连续给药4 d,阿司匹林组于第4天灌胃0.2 g/kg阿司匹林,模型对照组灌服等量纯化水,给药结束后按照不同试验具体操作。家兔经耳缘静脉注射0.3 mL/kg LPS溶液(2μg/mL)构建LPS致热模型,将满足试验要求的家兔随机分为5组,其中二丁提取散低、中、高剂量组以及阿司匹林组分别以含生药1.4、2.8、5.6和0.1 g/kg剂量灌胃给药,模型对照组灌服等量纯化水,分别于给药后1、2、3、4、5、6 h测量家兔体温变化情况。【结果】二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验结果显示,与模型对照组相比,二丁提取散高、中剂量组小鼠耳廓肿胀程度极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05);与蒲地蓝组相比,二丁提取散各剂量组差异不显著(P>0.05)。冰醋酸致小鼠扭体试验结果显示,与模型对照组相比,二丁提取散高、中剂量组小鼠扭体数极显著或显著减少(P<0.01;P<0.05);与阿司匹林组相比,二丁提取散高剂量组差异不显著(P>0.05),中、低剂量组小鼠扭体数显著或极显著增加(P<0.05;P<0.01)。LPS致家兔发热试验结果显示,与模型对照组相比,给药后2 h,阿司匹林组及二丁提取散高、中剂量组家兔体温极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05);与阿司匹林组相比,给药后2 h,二丁提取散中剂量组家兔体温显著升高(P<0.05)。【结论】二丁提取散具有一定的抗炎、镇痛和解热作用,研究结果为二丁提取散的临床应用及进一步研究提供理论依据。 展开更多

关键词 二丁提取散 抗炎 镇痛 解热

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猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗的佐剂筛选 被引量：1

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作者 孙莹慧 赵玉惠 +6 位作者 夏叶 陈鹏飞 丛雁方 于春梅 魏波 李斐 缪德年 《上海畜牧兽医通讯》 2023年第2期10-13,共4页

为筛选适合猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)基因工程亚单位疫苗的佐剂,将重组的PCV2 Cap蛋白抗原与佐剂混合,分别制备氢氧化铝胶佐剂、ISA 15A VG佐剂和IMS 251C VG佐剂疫苗,并选择PCV2阴性仔猪(14日龄)开展动物安全性... 为筛选适合猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)基因工程亚单位疫苗的佐剂,将重组的PCV2 Cap蛋白抗原与佐剂混合,分别制备氢氧化铝胶佐剂、ISA 15A VG佐剂和IMS 251C VG佐剂疫苗,并选择PCV2阴性仔猪(14日龄)开展动物安全性检验和免疫效力检验。安全性检验结果显示:3组免疫高剂量(2倍免疫剂量)佐剂疫苗的仔猪在免疫后14 d内,精神、食欲、呼吸均正常,注射部位及其周围组织未见异常,仅IMS 251C VG佐剂组有2头仔猪出现发热症状(1~2 d)。免疫效力检验结果显示:3种佐剂疫苗免疫攻毒组仔猪免疫当天(接种前)PCV2抗体均为阴性,免疫第28天抗体均为阳性,其中ISA 15A VG佐剂组、IMS 251C VG佐剂组仔猪抗体S/P值均显著高于氢氧化铝胶佐剂组(P<0.05),均极显著高于空白对照组(P<0.01);于免疫第28天进行攻毒实验,攻毒对照组100%(5/5)发病,氢氧化铝胶佐剂组60%(3/5)保护,ISA 15A VG佐剂组和IMS 251C VG佐剂组均100%(5/5)保护。结果表明:ISA 15A VG是PCV2基因工程亚单位疫苗的适宜佐剂。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 佐剂 疫苗 攻毒

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盐酸多西环素溶液含量测定方法研究 被引量：2

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作者 林扬 孙亚磊 +7 位作者 王艳玲 蒋贻海 刘元元 马丰英 王英俊 李忠顺 游长海 王进江 《中国家禽》 北大核心 2021年第6期100-103,共4页

为测定盐酸多西环素溶液中盐酸多西环素含量,采用色谱柱Xtimate C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为醋酸盐缓冲液(0.25 mol/L醋酸铵溶液-0.1 mol/L乙二胺四醋酸二钠-三乙胺(100∶10∶1),醋酸或氨水调节pH值至8.8)-乙腈(85∶15),流速... 为测定盐酸多西环素溶液中盐酸多西环素含量,采用色谱柱Xtimate C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为醋酸盐缓冲液(0.25 mol/L醋酸铵溶液-0.1 mol/L乙二胺四醋酸二钠-三乙胺(100∶10∶1),醋酸或氨水调节pH值至8.8)-乙腈(85∶15),流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为280 nm,进样量为20μL的高效液相色谱方法。结果显示:盐酸多西环素溶液主成分与相关杂质分离良好,空白辅料对测定无干扰;在0.06~0.20 mg/mL范围内线性关系良好,线性回归方程y=36105x+6.4566(R2=0.9999),含量测定平均回收率为99.64%,相对标准偏差为0.49%。表明建立的方法专属性、准确度、重复性均良好,可用于盐酸多西环素溶液含量的测定。 展开更多

关键词 盐酸多西环素 溶液 含量 高效液相色谱法

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重组鸡γ-干扰素联合鸡新城疫和禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗免疫效果的研究 被引量：1

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作者 刘晓婧 魏波 +1 位作者 蒋贻海 曲信芹 《山东畜牧兽医》 2019年第3期1-2,共2页

为研究重组鸡γ-干扰素(Chicken interferonγ, ChIFN-γ)对鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(La Sota株+WD株)的免疫增强效果,取重组鸡γ-干扰素作为免疫增强剂,联合鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗免疫SPF鸡,在免疫后24h和48... 为研究重组鸡γ-干扰素(Chicken interferonγ, ChIFN-γ)对鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(La Sota株+WD株)的免疫增强效果,取重组鸡γ-干扰素作为免疫增强剂,联合鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗免疫SPF鸡,在免疫后24h和48h采集全血进行细胞因子检测,结果显示免疫后联合免疫组的IFN-γ和IL-4细胞因子水平要高于单独免疫疫苗组;免疫后7、14、21、28和35d分别采集血清测定抗体效价,通过检测血清中针对鸡新城疫病毒和禽流感病毒(H9亚型)的HI抗体水平可知,联合免疫组产生的针对鸡新城疫病毒和禽流感病毒(H9亚型)的抗体均高于单独免疫疫苗组。试验结果表明,重组鸡γ-干扰素对鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(La Sota株+WD株)具有免疫增强作用。 展开更多

关键词 鸡新城疫病毒 禽流感病毒 灭活疫苗 鸡γ-干扰素 免疫效果

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柴芍口服液临床推荐剂量筛选试验研究 被引量：1

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作者 张会梅 孙亚磊 +7 位作者 魏秀丽 王艳玲 钟英杰 付海宁 栾明娜 庞云露 蒋贻海 徐恩民 《中兽医医药杂志》 2020年第1期45-49,共5页

目的:研究柴芍口服液的临床推荐剂量。方法:通过对阴性对照组、阳性对照组、不同剂量的柴芍口服液组进行不同的给药方式处理,以便获得最佳的临床推荐剂量。结果:分别在饮水中添加0.5%、1.0%的柴芍口服液(以体积计算),对四氯化碳(CCl4)... 目的:研究柴芍口服液的临床推荐剂量。方法:通过对阴性对照组、阳性对照组、不同剂量的柴芍口服液组进行不同的给药方式处理,以便获得最佳的临床推荐剂量。结果:分别在饮水中添加0.5%、1.0%的柴芍口服液(以体积计算),对四氯化碳(CCl4)所致实验鸡肝损伤有显著的缓解效果。结论:柴芍口服液具有防治CCl4所致实验鸡肝损伤的功效,且柴芍口服液临床推荐剂量为在饮水中添加0.5%,连续投药7 d。 展开更多

关键词 柴芍口服液 临床推荐剂量 CCL4 鸡肝损伤

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犬干扰素的中试生产工艺及临床前研究 被引量：1

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作者 赵明 蒋贻海 +1 位作者 魏波 曲信芹 《山东畜牧兽医》 2019年第12期12-14,共3页

为了探索基因工程重组犬干扰素500L发酵罐中试规模生产工艺的建立以及犬干扰素的临床评价而进行了研究;结果表明,中试生产得到的犬干扰素纯度为98.4%,比活性为2.97×106U/mg,内毒素含量为19IU/ml,符合产业化要求。

关键词 重组犬干扰素 中试 生产工艺

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一起“北牛黔调”引起的肉牛运输应激综合征的诊治

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作者 陆安法 赵晨辰 +6 位作者 杨喆 杨前兵 田海蓉 周礼 赖靖 孙伟 李群 《中国动物保健》 2024年第12期191-193,共3页

近年来,贵州大力发展肉牛产业,“北牛黔调”“黔牛外调”情况普遍,2023年贵州省调进肉牛16.37万头,调出肉牛14.23万头。肉牛运输应激综合征的发生严重影响动物的健康和造成养牛户的经济损失,一直是困扰贵州省肉牛发展的难题。2023年贵... 近年来,贵州大力发展肉牛产业,“北牛黔调”“黔牛外调”情况普遍,2023年贵州省调进肉牛16.37万头,调出肉牛14.23万头。肉牛运输应激综合征的发生严重影响动物的健康和造成养牛户的经济损失,一直是困扰贵州省肉牛发展的难题。2023年贵州省印江土家族苗族自治县发生一起典型的肉牛运输应激综合征事件,因及时采取有效的综合防治措施,降低了养殖户的经济损失,供同行参考。 展开更多

关键词 肉牛运输应激综合征 诊治

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铜仁市部分区县牛结节性皮肤病流行病学调查 被引量：1

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作者 陆安法 赵晨辰 +5 位作者 孙伟 刘杉杉 郭义军 高俊波 李华磊 任明晋 《中国动物保健》 2023年第3期123-124,共2页

牛结节性皮肤病(LSD)是由牛结节性皮肤病病毒感染引起的一种虫媒病,对牛产业发展具有重大影响。本文主要通过问卷调查、临床现场观察等方法,对铜仁市LSD的流行情况进行了解。结果显示,本地区LSD总体发病率在0.6%~5.5%之间,死亡率较低。... 牛结节性皮肤病(LSD)是由牛结节性皮肤病病毒感染引起的一种虫媒病,对牛产业发展具有重大影响。本文主要通过问卷调查、临床现场观察等方法,对铜仁市LSD的流行情况进行了解。结果显示,本地区LSD总体发病率在0.6%~5.5%之间,死亡率较低。临床表现上,LSD主要会造成牛皮肤出现典型的结节性损伤,同时也会伤及到乳房、睾丸、口腔等部位。同时,结合实际情况,我们对LSD的科学防控提出4条合理化的防控措施,对于降低LSD的发生具有一定的指导意义。 展开更多

关键词 牛结节性皮肤病 流行病调查 防控措施

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禽用新中药复方制剂的急性和亚慢性毒性试验 被引量：3

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作者 付海宁 孙亚磊 +7 位作者 王艳玲 栾明娜 钟英杰 张会梅 袁延文 魏秀丽 蒋贻海 张传津 《中国家禽》 北大核心 2019年第4期60-63,共4页

为了评价新中药复方制剂的毒性,研究采用小鼠急性经口毒性试验和大鼠亚慢性毒性试验,急性毒性试验结果显示:本品小鼠经口给药,LD50大于5 g/kg·b·w。根据WTO有关外源性化学物急性毒性分级标准进行评价,本品属实际无毒。亚慢性... 为了评价新中药复方制剂的毒性,研究采用小鼠急性经口毒性试验和大鼠亚慢性毒性试验,急性毒性试验结果显示:本品小鼠经口给药,LD50大于5 g/kg·b·w。根据WTO有关外源性化学物急性毒性分级标准进行评价,本品属实际无毒。亚慢性毒性试验结果表明:在试验条件下,未发现本品对大鼠的生长发育产生影响,中长期重复应用无亚慢性毒性。 展开更多

关键词 肾复康颗粒 急性毒性 亚慢性毒性

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二丁提取散中半边莲的薄层色谱鉴别

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作者 付海宁 陈昱骁 +7 位作者 陈玲 张会梅 姚德勇 王艳玲 蔡青秀 章安源 尹伶灵 孙亚磊 《动物医学进展》 北大核心 2023年第12期54-60,共7页

为了建立中药复方制剂二丁提取散中半边莲的薄层鉴别方法,分别从样品的前处理方法、薄层色谱的展开剂、检视方法、薄层板类型、点样量等方面建立了二丁提取散的半边莲的鉴别方法。并从不同厂家/批次的薄层板、不同的环境温度、湿度等方... 为了建立中药复方制剂二丁提取散中半边莲的薄层鉴别方法,分别从样品的前处理方法、薄层色谱的展开剂、检视方法、薄层板类型、点样量等方面建立了二丁提取散的半边莲的鉴别方法。并从不同厂家/批次的薄层板、不同的环境温度、湿度等方面对检出方法的稳定性进行了研究,成功建立了二丁提取散中半边莲的薄层鉴别方法。结果表明,建立的半边莲的薄层鉴别方法专属性强,稳定性好,可用于二丁提取散中半边莲的定性鉴别。 展开更多

关键词 二丁提取散 半边莲 薄层鉴别 方法优化 稳定性

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不同佐剂制备鸡新城疫、禽流感二联灭活苗免疫效果评价试验 被引量：3

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作者 刘晓婧 丛雁方 +5 位作者 魏波 王宏华 王艳玲 蒋贻海 袁延文 张春革 《山东畜牧兽医》 2019年第1期8-10,共3页

基于对市场现有佐剂产品的了解取不同佐剂产品作比较,以禽类疫苗为例。选取鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(Lasota株+WD株)灭活后抗原液,按不同佐剂的配苗比例分别配制灭活苗,验证其免疫效果。将添加不同佐剂配制的灭活苗分别免疫... 基于对市场现有佐剂产品的了解取不同佐剂产品作比较,以禽类疫苗为例。选取鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(Lasota株+WD株)灭活后抗原液,按不同佐剂的配苗比例分别配制灭活苗,验证其免疫效果。将添加不同佐剂配制的灭活苗分别免疫7日龄商品肉鸡,分6组,每组30只,其中1～5组分别免疫5种不同佐剂配制的禽流感灭活疫苗,6组为空白对照,各免疫0.3ml/只。分别于免疫后14、21、28、35d采血,离心后取血清,利用血凝抑制方法分别检测鸡新城疫和H9亚型禽流感血清抗体。计算抗体平均滴度。试验结果显示,MF59、GEL02和ISA70VG等新型佐剂较传统佐剂均能产生较高的抗体水平且能使机体在短期内快速产生免疫应答反应并能很好的维持其抗体水平。 展开更多

关键词 灭活苗 佐剂 免疫效果

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兽药行业管理政策及兽药评审新举措解读

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作者 孙亚磊 《中国动物保健》 2019年第11期7-8,28,共3页

2019年10月30日,以“增强创新技术能力,拓宽行业发展方向”为主题的中国畜牧兽医学会动物药品学分会新兽药研发相关问题研讨会在郑州举行。此次会议,大咖云集,重磅信息频发,干货满满,引得三百余人参会,充分说明大家对行业发展及创新意... 2019年10月30日,以“增强创新技术能力,拓宽行业发展方向”为主题的中国畜牧兽医学会动物药品学分会新兽药研发相关问题研讨会在郑州举行。此次会议,大咖云集,重磅信息频发,干货满满,引得三百余人参会,充分说明大家对行业发展及创新意识的关注度提升。农业农村部畜牧兽医局药政药械处谷红处长和中国兽医药品监察所化药评审处董义春处长对近期兽药行业新政进行了解读。 展开更多

关键词 动物药品 新兽药 兽药行业 问题研讨会 行业发展方向 评审

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肾复康合剂的HPLC法测定

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作者 栾明娜 孙亚磊 +4 位作者 王艳玲 魏秀丽 袁延文 付海宁 蒋贻海 《中兽医医药杂志》 2019年第3期50-52,共3页

建立高效液相色谱法测定芦丁和落新妇苷,采用Eclipse Plus C18色谱柱,以甲醇-0.1%醋酸溶液为流动相,双波长检测芦丁和落新妇苷,分别在14.9～299μg/mL和5.8～116μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率分别为97.1%和98.3%。建立的色谱条... 建立高效液相色谱法测定芦丁和落新妇苷,采用Eclipse Plus C18色谱柱,以甲醇-0.1%醋酸溶液为流动相,双波长检测芦丁和落新妇苷,分别在14.9～299μg/mL和5.8～116μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率分别为97.1%和98.3%。建立的色谱条件可同时测定2种指标成分,简便快捷。 展开更多

关键词 肾复康合剂 高效液相色谱 落新妇苷 芦丁

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