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植物内生枯草芽孢杆菌纳豆激酶同源基因的序列分析及其在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 姜嵛 梁晨 姜国勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期97-99,共3页
利用基因组学和生物信息学的方法,从一种植物内生枯草芽孢杆菌菌株Bs0922的基因组DNA中克隆了纳豆激酶的同源基因NK-Bs0922,长度为1 149 bp。通过重组和转化在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了一个大小为48.0 kD的重组蛋白。
关键词 内生菌 枯草芽孢杆菌 纳豆激酶 同源基因
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抗除草剂海带孢子体培育技术的初步研究
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作者 王爱华 伊铖铖 +2 位作者 姜国勇 邹积华 崔从光 《青岛农业大学学报(自然科学版)》 2017年第2期133-136,共4页
海带孢子体的培育是海带育种育苗技术中的关键步骤,通过转基因技术与海带孢子体育苗相结合来实施有目的的海带品种改良是一项亟待解决的关键技术。本研究利用基因枪法将抗除草剂Bar(bialaphos resistance)基因转入海带雌配子体中,再将... 海带孢子体的培育是海带育种育苗技术中的关键步骤,通过转基因技术与海带孢子体育苗相结合来实施有目的的海带品种改良是一项亟待解决的关键技术。本研究利用基因枪法将抗除草剂Bar(bialaphos resistance)基因转入海带雌配子体中,再将转化获得的雌配子体细胞与雄配子体细胞进行杂交,获得了含有抗除草剂基因的海带孢子体幼苗,为海带的转基因技术条件下的育种应用开拓了新的途径。经PCR扩增证明,利用基因枪法转化海带雌配子体细胞,Bar基因已整合到海带配子体细胞的核基因组中,目标基因的转化率可达16.7%。雌配子体的转化体细胞与雄配子体细胞在15℃下共培养10天,就会有大量的合子形成,共培养20天以后许多合子形成孢子体,大约80%左右的合子细胞发育成孢子体,到了30天就会有肉眼可见的2mm左右的孢子体幼苗。 展开更多
关键词 海带 孢子体 抗除草剂基因 转基因
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玉米核糖体失活蛋白基因z108在烟草原生质体中的转化及其表达 被引量:2
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作者 周颖 姜国勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期99-102,共4页
利用与根癌农杆菌共培养的方法将玉米核糖体失活蛋白基因z108及其融合基因GUS导入烟草叶肉原生质体细胞。试验结果表明,烟草叶片在含有1.0%纤维素酶和0.5%离析酶的裂解液中,以0.5M甘露醇、5000.0mg/LCaCl2为渗透压调节剂,25℃保温12-14h... 利用与根癌农杆菌共培养的方法将玉米核糖体失活蛋白基因z108及其融合基因GUS导入烟草叶肉原生质体细胞。试验结果表明,烟草叶片在含有1.0%纤维素酶和0.5%离析酶的裂解液中,以0.5M甘露醇、5000.0mg/LCaCl2为渗透压调节剂,25℃保温12-14h,可获得纯化的原生质体细胞;纯化的叶肉原生质体细胞与根癌农杆菌菌株pCam1301/91-108共培养30min,经25mg/L潮霉素筛选,转化率可达17.84%。转化体细胞经X-Gluc染色、PCR和RT-PCR检测证明玉米核糖体失活蛋白基因z108已整合到烟草原生质体细胞的核基因组中并获得表达。 展开更多
关键词 玉米核糖体失活蛋白 烟草原生质体 转化
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朝天椒Tm-2^(nv)-Like基因的同源克隆及其表达验证
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作者 于曙光 何忠诚 +1 位作者 王恒 姜国勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期85-87,共3页
番茄的Tm-2nv基因是一个NBS-LRR类型的病毒抗性基因。本研究以该基因的保守序列作为扩增引物,对辣椒栽培种朝天椒的基因组DNA进行电子分析、同源扩增和表达验证,首次获得了具有70%相似性的同源基因。生物信息学分析显示,朝天椒Tm-2nv-l... 番茄的Tm-2nv基因是一个NBS-LRR类型的病毒抗性基因。本研究以该基因的保守序列作为扩增引物,对辣椒栽培种朝天椒的基因组DNA进行电子分析、同源扩增和表达验证,首次获得了具有70%相似性的同源基因。生物信息学分析显示,朝天椒Tm-2nv-like基因的N端289~300 nt处和316~333 nt处分别含有12和18个碱基的插入,并且含有一个ATP/GTP结合位点的基序A(P-loop),以及3个依赖于cAMP和cGMP的蛋白激酶磷酸化位点。这一结果对于辣椒抗病基因功能的研究具有重要意义。 展开更多
关键词 朝天椒 Tm-2nv-like基因 同源克隆
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日本榧原生质体的分离与纯化 被引量:1
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作者 张云璇 苗积广 +3 位作者 谢明春 田松 董明哲 姜国勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期75-78,共4页
日本榧原生质体的分离与纯化对于建立日本榧悬浮细胞无性系,从而获得次生代谢产物榧黄素等具有重要的经济价值。以日本榧一年生以及当年生叶片为分离材料,采用酶解法成功获得了完整的原生质体。试验结果表明,日本榧叶片细胞原生质体获... 日本榧原生质体的分离与纯化对于建立日本榧悬浮细胞无性系,从而获得次生代谢产物榧黄素等具有重要的经济价值。以日本榧一年生以及当年生叶片为分离材料,采用酶解法成功获得了完整的原生质体。试验结果表明,日本榧叶片细胞原生质体获得的最适酶浓度为:CPW+纤维素酶(Cellulase R-10)3.0%-6.0%、离析酶(Macerozyme R-10)5.0%-6.0%。原生质体的纯化使用蔗糖浓度为30%-44%。日本榧原生质体在0.7 mol/L甘露醇+50 mmol/L MES+0.5%PVP等渗液中做连续培养可以保持完整的细胞形态。 展开更多
关键词 日本榧 原生质体分离 纯化
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