青岛地区外来农业病虫害种类及入侵特征分析 被引量：1

1

作者 曲婉梅 郑长英 +3 位作者 周洪旭 赵洪海 赵海燕 褚栋 《山东农业科学》 2017年第6期101-106,共6页

青岛是我国重要的沿海开放城市,同时由于其特殊的地形地貌和气候条件,生物入侵形势十分严峻。目前,对青岛地区的外来农业病虫害尚未有系统调查。本研究于2013—2015年,通过查阅资料与田间调查的方法全面分析了青岛地区外来农业病虫害的... 青岛是我国重要的沿海开放城市,同时由于其特殊的地形地貌和气候条件,生物入侵形势十分严峻。目前,对青岛地区的外来农业病虫害尚未有系统调查。本研究于2013—2015年,通过查阅资料与田间调查的方法全面分析了青岛地区外来农业病虫害的种类、原产地、传入方式、为害的生态系统及其地理分布。结果表明:青岛地区外来农业病虫害共计31种,其中动物18种,微生物13种;约有56%的病虫害来源于美洲;全部病虫害通过无意识引进或自然扩散的方式入侵;约有71%的病虫害可为害农作物生态系统。调查结果对青岛地区外来农业病虫害的预防与控制提供了依据。 展开更多

关键词 外来农业病虫害 青岛地区 入侵特征

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中国有机农业发展中的问题探讨 被引量：16

2

作者 王大鹏 吴文良 +2 位作者 顾松东 牛新胜 毛文峰 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第S1期250-255,共6页

有机农业是低投入农业的一种,在农业的可持续发展中占有重要地位。该文简要地分析了中国集约化农业的现状和问题,指出了有机农业的特点和优势,并概述了中国有机农业的现状。主要针对有机农业与粮食安全、有机农业与循环农业、有机农业... 有机农业是低投入农业的一种,在农业的可持续发展中占有重要地位。该文简要地分析了中国集约化农业的现状和问题,指出了有机农业的特点和优势,并概述了中国有机农业的现状。主要针对有机农业与粮食安全、有机农业与循环农业、有机农业与区域发展以及有机农业与产业化4个方面的问题,对目前中国有机农业中存在的问题进行了分析。研究认为实现农业的可持续发展与实现农业的现代化同样重要,部分地发展有机农业有利于中国农业的发展。 展开更多

关键词 集约化农业 有机农业 粮食安全 区域发展 循环农业 产业化

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20种菊科植物不同器官的化感活性研究 被引量：18

3

作者 罗小勇 孙启涛 周世军 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第30期14672-14677,共6页

[目的]测定20种菊科植物不同器官对受体植物生菜的化感活性。[方法]采用琼脂混粉法。[结果]在10g/L的粉末添加浓度下,所有的供试植物器官粉末均对受体植物生菜幼苗的生长产生了不同程度的抑制作用,且对胚根生长的抑制明显高于对胚轴生... [目的]测定20种菊科植物不同器官对受体植物生菜的化感活性。[方法]采用琼脂混粉法。[结果]在10g/L的粉末添加浓度下,所有的供试植物器官粉末均对受体植物生菜幼苗的生长产生了不同程度的抑制作用,且对胚根生长的抑制明显高于对胚轴生长的抑制。其中,1年蓬和小刺儿菜的叶、花、根和茎,向日葵、抱茎苦荬菜、苍耳和醴肠的叶,艾蒿、苣荬菜、野塘蒿、泥胡菜、苦苣菜和万寿菊的花,细叶鸭葱的根、叶和花,艾蒿和苣荬菜的茎,以及苦菜的叶、茎和花等器官粉末对生菜胚根的生长具有较高的抑制活性;1年蓬的叶和花,小飞蓬和泥胡菜的花,向日葵的叶,小刺儿菜的根以及艾蒿的茎和花等器官对胚轴的生长也具有较高的抑制活性。[结论]20种菊科植物部分器官具有高化感活性。 展开更多

关键词 菊科植物 琼脂混粉法 化感活性

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琼脂混粉法的建立及其在植物叶片化感活性测定中的应用 被引量：39

4

作者 罗小勇 付艳红 周世军 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2007年第4期267-270,共4页

通过室内研究,建立了将植物组织的粉末混入0.5%琼脂溶液中冷凝后来测定植物化感作用的"琼脂混粉法",并利用该方法对40种园林植物叶片进行了测定。在10g/L的粉末添加浓度下,各供试植物均对结球生菜幼苗的生长产生了不同程度的... 通过室内研究,建立了将植物组织的粉末混入0.5%琼脂溶液中冷凝后来测定植物化感作用的"琼脂混粉法",并利用该方法对40种园林植物叶片进行了测定。在10g/L的粉末添加浓度下,各供试植物均对结球生菜幼苗的生长产生了不同程度的抑制作用,且普遍对胚根的抑制大于对胚轴的抑制。其中,南天竹、海桐、金丝桃、常春藤、复羽叶栾树、石榴、矮天牛、华山松、鸡爪槭、观赏桃、合欢和萱草等植物叶片对胚根生长的抑制率以及南天竹和华山松叶片对胚轴生长的抑制率均达90%以上。 展开更多

关键词 琼脂混粉法 化感作用 生物测定 结球生菜 园林植物

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一些十字花科植物组织的化感活性研究 被引量：12

5

作者 韩君 罗小勇 《江西农业学报》 CAS 2008年第10期76-78,83,共4页

采用琼脂混粉法对一些常见十字花科植物组织的化感活性进行了研究。首先以生菜为指示植物对油菜(苏州青、雪克青、矮脚黄)、球果焊菜、播娘蒿、荠菜以及独行菜的不同组织进行了测定,发现以独行菜果实组织的化感活性最高。进而以该组织... 采用琼脂混粉法对一些常见十字花科植物组织的化感活性进行了研究。首先以生菜为指示植物对油菜(苏州青、雪克青、矮脚黄)、球果焊菜、播娘蒿、荠菜以及独行菜的不同组织进行了测定,发现以独行菜果实组织的化感活性最高。进而以该组织为供试材料测定了其不同浓度对生菜、小麦、反枝苋和稗草4种指示植物幼苗生长的影响,发现在低浓度(0.1g/L)下对所有指示植物幼苗的生长均表现出一定的促进作用,而在5、10 g/L的高浓度下,各指示植物胚根(或种子根)和胚轴(或胚芽鞘)的生长均受到明显的抑制,计算对胚根或种子根的有效抑制浓度(EC50)分别为反枝苋(0.2373 g/L)、生菜(0.8172 g/L)、稗草(0.9901 g/L)和小麦(2.8918 g/L);对胚轴或胚芽鞘的EC50分别为反枝苋(0.4869 g/L)、稗草(3.1657 g/L)、生菜(3.6663 g/L)和小麦(5.7276 g/L)。 展开更多

关键词 琼脂混粉法 十字花科植物 化感活性 独行菜

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龙柏茎叶粗提物对植物病原真菌的抑制作用 被引量：9

6

作者 牛新威 罗兰 +3 位作者 董艳丽 梁桂淼 鲁世伟 袁忠林 《内蒙古农业科技》 2008年第4期57-58,共2页

以龙柏茎叶为材料,用乙醇进行提取,粗提物对15种植物病原真菌的抑制作用进行了测定。结果表明,粗提物浓度在67mg/ml的情况下,对15种供试植物病原菌都有一定的抑制作用,且对其中9种供试病原菌的抑制率达到了80%以上,并对抑制效果较好的8... 以龙柏茎叶为材料,用乙醇进行提取,粗提物对15种植物病原真菌的抑制作用进行了测定。结果表明,粗提物浓度在67mg/ml的情况下,对15种供试植物病原菌都有一定的抑制作用,且对其中9种供试病原菌的抑制率达到了80%以上,并对抑制效果较好的8种植物病原菌进行了进一步的测定,测定出了抑制作用的有效浓度。 展开更多

关键词 龙柏 乙醇提取物 抑菌活性

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转基因植物检测技术研究 被引量：1

7

作者 武海斌 孙红炜 +2 位作者 杨崇良 李宝笃 路兴波 《河北农业科学》 2008年第7期49-51,57,共4页

随着转基因植物(Transgenic plant,TP)的迅速发展,TP及产品大量涌向市场,其安全性在全球范围内引起普遍的关注。一些国家正努力加强对TP及产品的管理,而加强检测技术的研究是必不可少的。TP检测方法主要包括聚合酶链式反应(PCR)法,外源... 随着转基因植物(Transgenic plant,TP)的迅速发展,TP及产品大量涌向市场,其安全性在全球范围内引起普遍的关注。一些国家正努力加强对TP及产品的管理,而加强检测技术的研究是必不可少的。TP检测方法主要包括聚合酶链式反应(PCR)法,外源蛋白检测法,基因芯片检测技术。随着TP检测技术的发展情况及研究趋势,基因芯片检测法将是未来转基因植物及产品检测方法的新手段。 展开更多

关键词 转基因植物 检测方法 基因芯片

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保护地番茄晚疫病发生流行预测模型的建立与应用 被引量：3

8

作者 鄢洪海 《长江蔬菜》 2009年第05X期72-74,共3页

以山东省临邑县2000-2005年的气象资料和番茄晚疫病发生程度为基础,运用数据处理软件DPS分析了番茄晚疫病发生流行程度和气象因子间的关系,并建立了预测模型:Y=4.778458+0.315706X5-0.023627X6经检验历史符合率较高。

关键词 番茄晚疫病 气象因子 DPS 预测模型

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保护地蔬菜枯萎病生防菌的筛选

9

作者 梁晨 李宝笃 +1 位作者 路炳声 王旭 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2007年第4期271-273,共3页

从蔬菜保护地采集上壤样本7份，分离纯化获得11个木霉菌株和1个黑曲霉菌株，通过对峙培养筛选番茄、黄瓜及辣椒等3种蔬菜枯萎病的生防真菌，并测定枯草芽孢菌株XM16对3种枯萎病菌的拮抗作用。试验结果表明：枯草芽孢杆菌对番茄、黄瓜及... 从蔬菜保护地采集上壤样本7份，分离纯化获得11个木霉菌株和1个黑曲霉菌株，通过对峙培养筛选番茄、黄瓜及辣椒等3种蔬菜枯萎病的生防真菌，并测定枯草芽孢菌株XM16对3种枯萎病菌的拮抗作用。试验结果表明：枯草芽孢杆菌对番茄、黄瓜及辣椒枯萎病的抑制率均在69％以上；此外，木霉T1和T4菌株对番茄、黄瓜及辣椒枯萎病的抑制率为50％左右；木霉T2和T3对番茄和辣椒枯萎病的抑制率为50％以上；木霉T5和T6对黄瓜和辣椒枯萎病的抑制率为45％～65％。 展开更多

关键词 枯萎病 拮抗作用 生防真菌 对峙培养

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双委夜蛾不同虫态耐寒性及体内生化物质含量变化 被引量：21

10

作者 郭婷婷 于志浩 +5 位作者 门兴元 于毅 郑长英 孙廷林 张思聪 李丽莉 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1291-1297,共7页

【目的】探索双委夜蛾Athetis dissimilis(Hampson)的耐寒策略及越冬虫态。【方法】以室内双委夜蛾种群为虫源,分别测定3龄、4龄、5龄、6龄和老熟幼虫以及蛹的过冷却点(supercooling point,SCP)、结冰点(freezing point,FP)、含水量以... 【目的】探索双委夜蛾Athetis dissimilis(Hampson)的耐寒策略及越冬虫态。【方法】以室内双委夜蛾种群为虫源,分别测定3龄、4龄、5龄、6龄和老熟幼虫以及蛹的过冷却点(supercooling point,SCP)、结冰点(freezing point,FP)、含水量以及脂肪、蛋白质、甘油、山梨醇和海藻糖含量。【结果】不同龄期幼虫和蛹之间过冷却点和结冰点存在显著差异,低龄幼虫SCP和FP较高;随着龄期增长,二者均降低,老熟幼虫的SCP和FP最低,分别为-18.20℃和-11.72℃。不同龄期幼虫和蛹的生化物质含量均存在显著差异。随着龄期的增加,含水量和甘油含量呈降低的趋势,蛹的含水量(65.33%)和甘油含量(154.90μg/mg)最低;脂肪和蛋白质含量随龄期的增加呈现增加的趋势,蛹的脂肪和蛋白质含量最高,分别为25.36%和2 298.37μg/mg。老熟幼虫海藻糖含量相对较高(57.28 mg/g),而山梨醇含量较低(15.49 mg/g)。【结论】与其他龄期相比,双委夜蛾老熟幼虫和蛹的耐寒性最强,是最可能的越冬虫态;脂肪、蛋白质和海藻糖可能是双委夜蛾重要的耐寒物质。 展开更多

关键词 双委夜蛾 越冬虫态 耐寒性 耐寒物质 过冷却点

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中国苹果树腐烂病发生和防治情况调查 被引量：171

11

作者 曹克强 国立耘 +2 位作者 李保华 孙广宇 陈汉杰 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期114-117,共4页

2008年4～5月，通过国家苹果产业技术体系网络系统，对我国10个苹果主产省市的147个果园进行了苹果树腐烂病发生和防治情况调查。结果显示，在所调查苹果树中，总体发病率达52．7％。随着树龄的增大，腐烂病发病株率提高，4～10年生果... 2008年4～5月，通过国家苹果产业技术体系网络系统，对我国10个苹果主产省市的147个果园进行了苹果树腐烂病发生和防治情况调查。结果显示，在所调查苹果树中，总体发病率达52．7％。随着树龄的增大，腐烂病发病株率提高，4～10年生果树株发病率为26．8％，11～17年树龄的果树株发病率为54．0％，18~24年树龄的树株发病率为59．3％。不同省份之间以及不同品种之间，腐烂病在发生程度上存在一些差异，但不很明显。在腐烂病的化学防治中，石硫合剂是使用最多的药剂。在刮治病斑中，使用最多的是福美胂，其他还包括松焦油、腐殖酸、腐殖酸铜、过氧乙酸等。调查中发现防治腐烂病的用药比较混乱，由于福美胂毒性高，在无公害果园生产中已被禁用，因此研究替代福美胂的药剂成为当务之急。 展开更多

关键词 苹果树腐烂病 病害发生 化学防治 调查 苹果黑腐皮壳

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转基因玉米转化体特异性寡核苷酸芯片检测方法的研制 被引量：10

12

作者 路兴波 武海斌 +3 位作者 王敏 李宝笃 杨崇良 孙红炜 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1432-1438,共7页

根据7种转基因玉米Bt11、Bt176、Mon810、Mon863、TC1507、GA21和NK603的重组DNA结构,利用Primerpremier5.0引物设计软件分别设计转化体特异性引物,优化PCR反应条件,对引物特异性及灵敏度进行验证。结果表明,所设计引物特异性强,灵敏度... 根据7种转基因玉米Bt11、Bt176、Mon810、Mon863、TC1507、GA21和NK603的重组DNA结构,利用Primerpremier5.0引物设计软件分别设计转化体特异性引物,优化PCR反应条件,对引物特异性及灵敏度进行验证。结果表明,所设计引物特异性强,灵敏度达0.1%。在植物基因组与外源基因的连接区域,利用PrimerPremier5.0和Oligo6.0软件分别设计和筛选7种转基因玉米40merOligo转化体特异性探针,制备转基因玉米的寡核苷酸芯片,并对芯片检测的特异性、重复性及检测灵敏度进行检验。证明所设计探针特异性强,灵敏度达0.01%。与PCR检测方法相比,基因芯片检测法灵敏度高、特异性强,可有效检测及鉴定多种转基因玉米,大大提高检测的准确率和效率。 展开更多

关键词 转基因玉米 转化体特异性 寡核苷酸芯片 Oligo探针 灵敏度

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北京延庆县甘蓝枯萎病病原菌的分离及其生物学特性的研究 被引量：21

13

作者 耿丽华 迟胜起 +2 位作者 焦晓辉 康俊根 田仁鹏 《中国蔬菜》 北大核心 2009年第2期34-37,共4页

从北京延庆县甘蓝生产区采集典型的甘蓝枯萎病病样,进行病原菌的分离和纯化,通过致病性试验和形态学鉴定,确认甘蓝枯萎病病原菌为尖孢镰刀菌粘团专化型〔Fusarium oxysporumSchl.f.sp.conglutinans(Wollenw.)Snyder & Hansen〕;对... 从北京延庆县甘蓝生产区采集典型的甘蓝枯萎病病样,进行病原菌的分离和纯化,通过致病性试验和形态学鉴定,确认甘蓝枯萎病病原菌为尖孢镰刀菌粘团专化型〔Fusarium oxysporumSchl.f.sp.conglutinans(Wollenw.)Snyder & Hansen〕;对其生物学特性进行研究,结果表明该病原菌生长适宜温度为20～25℃,低于5℃或高于35℃时不能生长;在pH值为3～10的范围内均能生长,pH值为8的条件下生长最快;能利用多种碳源,氮源以硝酸钾、硝酸钙和硝酸钠比较适宜。 展开更多

关键词 甘蓝枯萎病 病原菌 生物学特性

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苹果褐斑病在山东烟台的发生与防治 被引量：10

14

作者 李保华 董向丽 +1 位作者 李桂舫 王彩霞 《中国果树》 北大核心 2008年第6期33-35,共3页

苹果褐斑病是导致苹果早期落叶的主要病害,其症状变化大,诊断特征是病斑中央的褐色小亮点,即病原菌的分生孢子盘。苹果褐斑病病原菌主要随病叶在地面上越冬,次年产生分生孢子进行初侵染。分生孢子主要随雨水传播,传播距离近,初侵染主要... 苹果褐斑病是导致苹果早期落叶的主要病害,其症状变化大,诊断特征是病斑中央的褐色小亮点,即病原菌的分生孢子盘。苹果褐斑病病原菌主要随病叶在地面上越冬,次年产生分生孢子进行初侵染。分生孢子主要随雨水传播,传播距离近,初侵染主要发生在树冠下部的叶片上。病原菌的最适侵染温度为20～25℃。降雨是苹果褐斑病流行的主导因素,雨量超过2mm,使叶面结露超过7小时的降雨可导致病原菌侵染,叶片发病,降雨持续时间越长,侵染量越大。5月是病原菌的初侵染期,6月是病原菌的快速累积期,也是病害防治的关键时期,7—8月是病害的高发期。戊唑醇等三唑类杀菌剂对苹果褐斑病有较好的内吸治疗效果,波尔多液是较为理想的保护剂。冬春季节清除落叶,发病初期剪除病枝以及发病期的药剂防治是防治苹果褐斑病的主要措施。 展开更多

关键词 苹果褐斑病 传播 侵染 流行 预测 病害防治

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离体肉鸡小肠对纳米氧化铜吸收速率的研究 被引量：9

15

作者 盖文婷 朱连勤 +2 位作者 朱风华 孙金全 曲韵笙 《中国饲料》 北大核心 2008年第9期32-34,共3页

采用翻转肠囊法研究离体肉鸡小肠对硫酸铜、氧化铜、纳米氧化铜的吸收速率。结果显示,在培养时间为0.5h时,纳米氧化铜的吸收速率显著高于硫酸铜与氧化铜(P<0.05);在1h和1.5h时,吸收速率纳米氧化铜高于硫酸铜与氧化铜,但三者之间差异... 采用翻转肠囊法研究离体肉鸡小肠对硫酸铜、氧化铜、纳米氧化铜的吸收速率。结果显示,在培养时间为0.5h时,纳米氧化铜的吸收速率显著高于硫酸铜与氧化铜(P<0.05);在1h和1.5h时,吸收速率纳米氧化铜高于硫酸铜与氧化铜,但三者之间差异不显著(P>0.05);各组肠道吸收速率前段均高于后段(P>0.05)。试验表明,肉鸡小肠对纳米氧化铜的吸收速率高于硫酸铜和氧化铜。 展开更多

关键词 翻转肠囊 硫酸铜 氧化铜 纳米氧化铜 吸收速率

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枯草芽孢杆菌XL12发酵液蛋白对冬枣黑斑病病原的抑制效果 被引量：12

16

作者 王军 陈爱香 辛玉成 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第2期114-116,共3页

为寻求冬枣病害切实可行的生物防治方法,采用硫酸铵分级盐析法,测定枯草芽孢杆菌菌株XL12发酵液抑菌活性组分及菌株蛋白量与抑制效果相关性,并进行了2年的田间小区防治试验。结果表明:发酵液蛋白组分对病原菌丝抑制率达91.6%;70%硫酸铵... 为寻求冬枣病害切实可行的生物防治方法,采用硫酸铵分级盐析法,测定枯草芽孢杆菌菌株XL12发酵液抑菌活性组分及菌株蛋白量与抑制效果相关性,并进行了2年的田间小区防治试验。结果表明:发酵液蛋白组分对病原菌丝抑制率达91.6%;70%硫酸铵分离出蛋白组分为208μg/mL时,其抑菌活性最高,为94.3%。在田间小区防治试验中,经发酵液粗蛋白处理的防治效果,2008年分别为84.5%和86.3%,2009年分别为80.7%和87.5%,明显高于化学药剂防治区效果。 展开更多

关键词 黑斑病 XL12发酵液蛋白 生物防治 冬枣

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12个真姬菇菌株拮抗试验及部分同工酶分析 被引量：22

17

作者 刘蕾 宁丽 +2 位作者 郭立忠 李翠翠 董伟 《食用菌》 北大核心 2008年第1期12-14,共3页

测定了真姬菇的12个不同菌株间的拮抗性及部分同工酶,结果表明:12个菌株Rf值为0.8时可分为5大类;菌株编号为3、4、5号菌株亲缘关系最近。聚类分析结果与拮抗试验结果基本一致。

关键词 真姬菇 拈抗性 同工酶

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干制辣椒红色素丧失与病原菌的关系 被引量：6

18

作者 李桂舫 金静 +3 位作者 傅德峰 王远路 蒋雯雯 刘建萍 《中国蔬菜》 北大核心 2008年第12期27-29,共3页

通过对褪色的干制辣椒种子及组织的分离培养,得到4种真菌的菌株,分别为Acremonium sp.、Alternaria sp.、Cladosporium sp.和Fusarium sp.。采用刺伤法将这4种真菌接种到转红期的健康辣椒果实上,初步发现Acremonium sp.和Fusarium sp.... 通过对褪色的干制辣椒种子及组织的分离培养,得到4种真菌的菌株,分别为Acremonium sp.、Alternaria sp.、Cladosporium sp.和Fusarium sp.。采用刺伤法将这4种真菌接种到转红期的健康辣椒果实上,初步发现Acremonium sp.和Fusarium sp.可混合侵染引起辣椒红色素丧失。 展开更多

关键词 干制辣椒 辣椒红色素 褪色病原菌

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甲基丁香酚挥发物对桔小实蝇成虫的引诱作用 被引量：32

19

作者 孙阳 张淑颖 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第20期8685-8687,共3页

[目的]研究甲基丁香酚对桔小实蝇成虫的引诱效果。[方法]利用Y型嗅觉仪测试了不同生理状态下(性成熟与性未成熟)桔小实蝇两性成虫在不同时间内(5、10、15、20、30、40、50和60 min)对不同剂量甲基丁香酚(0.001、0.010、0.1000、1.000和1... [目的]研究甲基丁香酚对桔小实蝇成虫的引诱效果。[方法]利用Y型嗅觉仪测试了不同生理状态下(性成熟与性未成熟)桔小实蝇两性成虫在不同时间内(5、10、15、20、30、40、50和60 min)对不同剂量甲基丁香酚(0.001、0.010、0.1000、1.000和10.000 mg)挥发物的反应。[结果]甲基丁香酚对桔小实蝇对性成熟雄虫有显著引诱作用,但对性成熟雌虫及雄虫、性未成熟雄虫均无引诱作用。测试剂量为0.001 g时性成熟雄虫在10 min时即对甲基丁香酚产生显著反应;在测试剂量达到0.01 g以上时,性成熟雄虫均在5min时即产生显著反应。[结论]甲基丁香酚仅对性成熟雄虫有引诱作用,对性未成熟雄虫、未成熟雌虫、成熟雌虫无引诱作用。 展开更多

关键词 桔小实蝇 甲基丁香酚 挥发物 反应

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华北大黑鳃金龟两种围食膜蛋白cDNA的分子克隆与序列分析 被引量：3

20

作者 周洪旭 谭秀梅 +4 位作者 李长友 王俊平 孙绪艮 郭巍 李国勋 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期10-16,共7页

6本文以华北大黑鳃金龟Holotrichia oblita中肠为材料,依据Stratagene公司文库构建试剂盒方法,构建其中肠cDNA表达文库,该文库滴度为1.9×106pfu/mL,重组率为99.97%。依据现代免疫学原理,利用棉铃虫Helicoverpaarmigera围食膜蛋白... 6本文以华北大黑鳃金龟Holotrichia oblita中肠为材料,依据Stratagene公司文库构建试剂盒方法,构建其中肠cDNA表达文库,该文库滴度为1.9×106pfu/mL,重组率为99.97%。依据现代免疫学原理,利用棉铃虫Helicoverpaarmigera围食膜蛋白多克隆抗体筛选文库,得到两个编码华北大黑鳃金龟围食膜蛋白的cDNA克隆Ho-Peritrophin1与Ho-Peritrophin2,其cDNA长分别为2385bp和1633bp,在polyA末端上游各有3个多聚腺苷酸信号序列AATAAA,最长开放阅读框(ORF)分别编码729个和477个氨基酸,与粉纹夜蛾Trichoplusia niCBP2(chitin bindingprotein2)的相似性最高,分别为21.9%和19.1%。结构域分析表明,Ho-Peritrophin1与Ho-Peritrophin2分别具有9个和6个几丁质结合功能域,只含有较少的O-糖基化位点,不含有类粘蛋白结构域。胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶对两种蛋白的作用位点主要位于几丁质结合功能域(chitin binding domain,CBD)内部,而因受几丁质结合功能域保护,这两种蛋白能够抵抗这些蛋白酶的降解。与正常CBD比较,这两种蛋白C端的CBD只含有4个Cys,只在第1与第3、第4与第5个Cys之间形成两对二硫键,缺少由第2与第6个Cys形成的二硫键。推测其N端还应包括信号肽序列和几丁质结合功能域的未知序列。 展开更多

关键词 华北大黑鳃金龟 中肠 CDNA表达文库 围食膜蛋白 序列分析

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