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水貂犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子的细胞定位及组织分布
被引量：
6
1
作者
黄娟
王聪
+1 位作者
张洪亮
单虎
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期289-294,共6页
为探讨犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子(SLAM)的细胞定位、在水貂组织中的分布及病毒感染对受体表达水平的影响,本研究采用间接免疫荧光法(IFA)进行了SLAM细胞定位。以IFA检测感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织的犬瘟热病毒抗原,...
为探讨犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子(SLAM)的细胞定位、在水貂组织中的分布及病毒感染对受体表达水平的影响,本研究采用间接免疫荧光法(IFA)进行了SLAM细胞定位。以IFA检测感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织的犬瘟热病毒抗原,以半定量PCR和间接免疫组化法(IHA)检测健康水貂及感染水貂SLAM在以上组织中的分布。结果表明,在Vero-SLAM细胞膜及细胞质内可见SLAM特异性荧光;感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织均可见大量犬瘟热病毒抗原阳性细胞,健康水貂及感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织SLAM PCR阳性,IHA检出数量不一的SLAM阳性着色细胞,且感染水貂相应组织的SLAM阳性着色细胞显著多于健康水貂(P<0.05);感染水貂的肾、脾、肺组织中犬瘟热病毒阳性细胞显著多于SLAM阳性着色细胞。说明SLAM受体表达于细胞膜和细胞质,在肝、脾、肺、肾、脑组织中均有分布;犬瘟热病毒感染引起SLAM受体表达的上调;在水貂体内除了SLAM受体,还有其它犬瘟热病毒受体存在。
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关键词
犬瘟热病毒
受体
信号淋巴细胞激活因子(SLAM)
细胞定位
组织分布
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职称材料
猪繁殖与呼吸综合征病毒新结构蛋白基因ORF5a分子特征
被引量：
3
2
作者
黄娟
任颖超
+1 位作者
张玉凤
单虎
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2016年第2期12-14,I0001,共4页
本研究采用RT-PCR方法从临床病料中扩增得到了5株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）山东流行株新结构蛋白ORF5a基因序列,并与国内外其他22株PRRSV ORF5a基因序列进行了比较和分析。结果表明,5株PRRSV山东株ORF5a基因CDS为141 bp,编码46...
本研究采用RT-PCR方法从临床病料中扩增得到了5株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）山东流行株新结构蛋白ORF5a基因序列,并与国内外其他22株PRRSV ORF5a基因序列进行了比较和分析。结果表明,5株PRRSV山东株ORF5a基因CDS为141 bp,编码46个氨基酸,序列同源性为93.6%~100%（nt）和89.4%~100%（aa）;5株山东株与其他Ⅱ型PRRSV同源性为83.0%-99.3%（nt）和72.3%~100%（aa）。在ORF5a蛋白上高度保守的R/Q基序区,LX13（3）株有3个氨基酸的变异,CY13株有1个氨基酸的变异。与2006年以前的毒株相比,我国2006年以后分离的毒株第8、12、28位和42位的氨基酸发生了变异。进化树分析表明,5株PRRSV山东株与高致病性PRRSV代表株JXA1株在同一个亚群。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
结构蛋白
ORF5a基因
序列分析
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职称材料
PRRSV变异株ORF5全基因的可溶性表达与重组蛋白的纯化
3
作者
任颖超
黄娟
单虎
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2016年第4期30-32,共3页
为了获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株可溶性糖基化囊膜蛋白(GP5),从p MD18-T-ORF5(V)重组质粒中PCR扩增得到PRRSV变异株LX13(1)结构蛋白ORF5全基因编码区,并克隆至原核表达载体p Cold TF DNA上,得到重组表达质粒p Cold-TF-GP5(...
为了获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株可溶性糖基化囊膜蛋白(GP5),从p MD18-T-ORF5(V)重组质粒中PCR扩增得到PRRSV变异株LX13(1)结构蛋白ORF5全基因编码区,并克隆至原核表达载体p Cold TF DNA上,得到重组表达质粒p Cold-TF-GP5(V),转化大肠埃希菌BL21中诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western Blot鉴定分析。结果表明,目的基因插入位置和阅读框正确,成功表达的融合蛋白分子量约为75.2 ku,并以可溶性蛋白的形式存在,表达量约占菌体总蛋白含量的22.26%。该融合蛋白能与鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性反应,说明重组蛋白具有反应原性。该可溶性重组蛋白的获得为研究PRRSV变异株GP5蛋白的抗原性奠定了基础。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
变异株
ORF5基因
可溶性原核表达
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职称材料
题名
水貂犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子的细胞定位及组织分布
被引量：
6
1
作者
黄娟
王聪
张洪亮
单虎
机构
青岛农业大学山东省高校预防兽医学重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期289-294,共6页
基金
山东省自然科学基金(ZR2010CL023)
国家科技基础性工作专项(2012FY111000)
文摘
为探讨犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子(SLAM)的细胞定位、在水貂组织中的分布及病毒感染对受体表达水平的影响,本研究采用间接免疫荧光法(IFA)进行了SLAM细胞定位。以IFA检测感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织的犬瘟热病毒抗原,以半定量PCR和间接免疫组化法(IHA)检测健康水貂及感染水貂SLAM在以上组织中的分布。结果表明,在Vero-SLAM细胞膜及细胞质内可见SLAM特异性荧光;感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织均可见大量犬瘟热病毒抗原阳性细胞,健康水貂及感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织SLAM PCR阳性,IHA检出数量不一的SLAM阳性着色细胞,且感染水貂相应组织的SLAM阳性着色细胞显著多于健康水貂(P<0.05);感染水貂的肾、脾、肺组织中犬瘟热病毒阳性细胞显著多于SLAM阳性着色细胞。说明SLAM受体表达于细胞膜和细胞质,在肝、脾、肺、肾、脑组织中均有分布;犬瘟热病毒感染引起SLAM受体表达的上调;在水貂体内除了SLAM受体,还有其它犬瘟热病毒受体存在。
关键词
犬瘟热病毒
受体
信号淋巴细胞激活因子(SLAM)
细胞定位
组织分布
Keywords
Canine distemper virus
receptor
SLAM
cellular localization
tissue profile
分类号
S858.92 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
猪繁殖与呼吸综合征病毒新结构蛋白基因ORF5a分子特征
被引量：
3
2
作者
黄娟
任颖超
张玉凤
单虎
机构
青岛农业大学山东省高校预防兽医学重点实验室
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2016年第2期12-14,I0001,共4页
基金
国家科技基础性工作专项(2012FY111000)
山东省现代农业产业技术体系生猪产业创新团队建设
+1 种基金
青岛农业大学高层次人才科研基金(6630719)
青岛农业大学应用型人才培养特色名校工程大学生科研创新立项
文摘
本研究采用RT-PCR方法从临床病料中扩增得到了5株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）山东流行株新结构蛋白ORF5a基因序列,并与国内外其他22株PRRSV ORF5a基因序列进行了比较和分析。结果表明,5株PRRSV山东株ORF5a基因CDS为141 bp,编码46个氨基酸,序列同源性为93.6%~100%（nt）和89.4%~100%（aa）;5株山东株与其他Ⅱ型PRRSV同源性为83.0%-99.3%（nt）和72.3%~100%（aa）。在ORF5a蛋白上高度保守的R/Q基序区,LX13（3）株有3个氨基酸的变异,CY13株有1个氨基酸的变异。与2006年以前的毒株相比,我国2006年以后分离的毒株第8、12、28位和42位的氨基酸发生了变异。进化树分析表明,5株PRRSV山东株与高致病性PRRSV代表株JXA1株在同一个亚群。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
结构蛋白
ORF5a基因
序列分析
Keywords
Porcine reproductive and respiratory syndrome virus
structural protein
ORF5a gene
sequence analysis
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
PRRSV变异株ORF5全基因的可溶性表达与重组蛋白的纯化
3
作者
任颖超
黄娟
单虎
机构
青岛农业大学山东省高校预防兽医学重点实验室
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2016年第4期30-32,共3页
基金
国家科技基础性工作专项(2012FY111000)
山东省现代农业产业技术体系生猪产业创新团队建设
青岛农业大学高层次人才科研基金(6630719)
文摘
为了获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株可溶性糖基化囊膜蛋白(GP5),从p MD18-T-ORF5(V)重组质粒中PCR扩增得到PRRSV变异株LX13(1)结构蛋白ORF5全基因编码区,并克隆至原核表达载体p Cold TF DNA上,得到重组表达质粒p Cold-TF-GP5(V),转化大肠埃希菌BL21中诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western Blot鉴定分析。结果表明,目的基因插入位置和阅读框正确,成功表达的融合蛋白分子量约为75.2 ku,并以可溶性蛋白的形式存在,表达量约占菌体总蛋白含量的22.26%。该融合蛋白能与鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性反应,说明重组蛋白具有反应原性。该可溶性重组蛋白的获得为研究PRRSV变异株GP5蛋白的抗原性奠定了基础。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
变异株
ORF5基因
可溶性原核表达
Keywords
Porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV）
Variant
ORF5 gene
Soluble prokaryotic expression
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水貂犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子的细胞定位及组织分布
黄娟
王聪
张洪亮
单虎
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
猪繁殖与呼吸综合征病毒新结构蛋白基因ORF5a分子特征
黄娟
任颖超
张玉凤
单虎
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2016
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
PRRSV变异株ORF5全基因的可溶性表达与重组蛋白的纯化
任颖超
黄娟
单虎
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2016
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