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水貂犬瘟热病毒受体SLAM的原核表达被引量：6: 1; 作者王聪张洪亮 +3 位作者黄娟靳继惠王怡男单虎《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第2期68-71,共4页; 为了获得犬瘟热病毒受体信号淋巴激活分子(SLAM)蛋白,本试验以pMD18-T-SLAM为模板,应用PCR方法扩增得到水貂SLAM基因,将SLAM基因连接到经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切处理后的pGEX-6p-1原核表达载体中,获得重组质粒pGEX-6p-1-SLAM,转化至大肠埃... 展开更多; 关键词犬瘟热病毒受体信号淋巴激活分子原核表达水貂; 在线阅读下载PDF 职称材料

水貂犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子的细胞定位及组织分布被引量：6: 2; 作者黄娟王聪 +1 位作者张洪亮单虎《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期289-294,共6页; 为探讨犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子(SLAM)的细胞定位、在水貂组织中的分布及病毒感染对受体表达水平的影响,本研究采用间接免疫荧光法(IFA)进行了SLAM细胞定位。以IFA检测感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织的犬瘟热病毒抗原,... 展开更多; 关键词犬瘟热病毒受体信号淋巴细胞激活因子(SLAM) 细胞定位组织分布; 在线阅读下载PDF 职称材料

水貂犬瘟热流行病学调查被引量：5: 3; 作者王聪邴啟政 +2 位作者张荧黄娟单虎《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第4期198-201,共4页; 为了调查山东省水貂犬瘟热的流行病学情况,对2010年8月-2012年8月期间由诸城、文登等地养貂场送诊的996份水貂病例进行了临床诊断和病原学检查。结果显示,共检出犬瘟热病毒阳性病料223份,阳性率为22.39%。其中,犬瘟热病毒与其他病原混... 展开更多; 关键词水貂犬瘟热流行病学调查; 在线阅读下载PDF 职称材料

HeLa细胞Ⅰ型干扰素效应因子实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3: 4; 作者刘纪玉杜以军 +9 位作者刘星吴家强李俊丛晓燕赵新华徐绍建孙文博时建立单虎王金宝《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期1-7,共7页; 本试验旨在建立一种用SYBR GreenⅠ荧光染料检测HeLa细胞Ⅰ型干扰素效应因子ISG15、ISG56、Mx1、OAS和PKR mRNA表达水平的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并在口蹄疫病毒(FMDV)L蛋白抑制Ⅰ型IFN发挥效应的信号通路中进行初步应用。利用TRI... 展开更多; 关键词实时荧光定量RT-PCR SYBR GreenⅠ 口蹄疫病毒 L蛋白干扰素; 在线阅读下载PDF 职称材料

一例典型水貂犬瘟热病例诊断及H基因序列分析被引量：1: 5; 作者王聪张倩 +2 位作者张洪亮王怡男黄娟《中国动物检疫》 CAS 2013年第2期49-52,共4页; 为了对感染犬瘟热水貂的临床症状、病理特征及H基因突变情况进行全面了解，本试验对一水貂养殖场疑似犬瘟热发病水貂进行了全面诊断和基因序列分析。临床观察水貂眼角出现黏性分泌物，脚垫红肿发胀，精神状态萎靡。剖检病理变化为肺脏... 展开更多; 关键词水貂犬瘟热病例诊断 H基因序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡源巴氏杆菌的分离鉴定及致病性研究被引量：4: 6; 作者秦晓冰《安徽农业科学》 CAS 2019年第18期88-89,共2页; 从青岛农业大学动物医院的蛋鸡送检病料中,无菌采集病死鸡肺脏、肝脏组织进行细菌的分离培养和鉴定,并对鉴定的分离菌进行药敏试验和致病性试验。结果表明,分离菌在血琼培养基上呈圆隆、露滴状、表面光滑带荧光的白色菌落,染色镜检为革... 展开更多; 关键词鸡源多杀性巴氏杆菌分离鉴定致病性; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法的建立被引量：2: 7; 作者胡继明杨培培 +7 位作者王颖孙海芳黄娟陈俏俏杨瑞梅张传美秦晓冰单虎《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期943-949,共7页; 本研究旨在建立猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法。根据Shimen株设计1对特异性引物,建立猪瘟病毒RT-PCR-RFLP检测方法;对20份疑似猪瘟临床样品进行检测,并对检出的山东8株流行野毒株和2株疫苗株PCR产物进行克隆... 展开更多; 关键词猪瘟病毒野毒株兔化弱毒疫苗株 RT-PCR-RFLP; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水貂犬瘟热病毒受体SLAM的原核表达被引量：6: 1; 作者王聪张洪亮黄娟靳继惠王怡男单虎; 机构青岛农业大学山东省预防兽医学重点实验室; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第2期68-71,共4页; 基金山东省自然科学基金项目(ZR2010CL023); 文摘为了获得犬瘟热病毒受体信号淋巴激活分子(SLAM)蛋白,本试验以pMD18-T-SLAM为模板,应用PCR方法扩增得到水貂SLAM基因,将SLAM基因连接到经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切处理后的pGEX-6p-1原核表达载体中,获得重组质粒pGEX-6p-1-SLAM,转化至大肠埃希菌BL21中进行诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果表明,目的基因插入位置和阅读框正确,经诱导成功表达出分子质量约为63.2ku的SLAM-GST融合蛋白,该融合蛋白能与鼠抗GST标签单克隆抗体发生特异性反应,具有良好的抗原性。; 关键词犬瘟热病毒受体信号淋巴激活分子原核表达水貂; Keywords Canine distemper virus receptor signal lymphocyte activation molecule prokaryotic expression mink; 分类号 S852 [农业科学—基础兽医学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水貂犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子的细胞定位及组织分布被引量：6: 2; 作者黄娟王聪张洪亮单虎; 机构青岛农业大学山东省高校预防兽医学重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期289-294,共6页; 基金山东省自然科学基金(ZR2010CL023) 国家科技基础性工作专项(2012FY111000); 文摘为探讨犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子(SLAM)的细胞定位、在水貂组织中的分布及病毒感染对受体表达水平的影响,本研究采用间接免疫荧光法(IFA)进行了SLAM细胞定位。以IFA检测感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织的犬瘟热病毒抗原,以半定量PCR和间接免疫组化法(IHA)检测健康水貂及感染水貂SLAM在以上组织中的分布。结果表明,在Vero-SLAM细胞膜及细胞质内可见SLAM特异性荧光;感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织均可见大量犬瘟热病毒抗原阳性细胞,健康水貂及感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织SLAM PCR阳性,IHA检出数量不一的SLAM阳性着色细胞,且感染水貂相应组织的SLAM阳性着色细胞显著多于健康水貂(P<0.05);感染水貂的肾、脾、肺组织中犬瘟热病毒阳性细胞显著多于SLAM阳性着色细胞。说明SLAM受体表达于细胞膜和细胞质,在肝、脾、肺、肾、脑组织中均有分布;犬瘟热病毒感染引起SLAM受体表达的上调;在水貂体内除了SLAM受体,还有其它犬瘟热病毒受体存在。; 关键词犬瘟热病毒受体信号淋巴细胞激活因子(SLAM) 细胞定位组织分布; Keywords Canine distemper virus receptor SLAM cellular localization tissue profile; 分类号 S858.92 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水貂犬瘟热流行病学调查被引量：5: 3; 作者王聪邴啟政张荧黄娟单虎; 机构青岛农业大学; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第4期198-201,共4页; 基金山东省自然科学基金(ZR2010CL023); 文摘为了调查山东省水貂犬瘟热的流行病学情况,对2010年8月-2012年8月期间由诸城、文登等地养貂场送诊的996份水貂病例进行了临床诊断和病原学检查。结果显示,共检出犬瘟热病毒阳性病料223份,阳性率为22.39%。其中,犬瘟热病毒与其他病原混合感染136例,占阳性病例的60.99%;阳性样本中未免疫病例116个;诸城检出阳性病例数最多,为147例;3月龄水貂发病率最高,占阳性病例的43.0%;水貂感染犬瘟热病毒主要症状为眼、鼻黏液性分泌物增多、脚垫增厚、呼吸困难;主要病理变化为肠、脑部出血。结果表明,犬瘟热依然是危害水貂养殖的重要疫病,且犬瘟热病毒易与其他病原混合感染;免疫接种能有效预防水貂犬瘟热,且宜在3月龄以前进行。; 关键词水貂犬瘟热流行病学调查; Keywords mink canine distemper epidemiology survey; 分类号 S852.655 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HeLa细胞Ⅰ型干扰素效应因子实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3: 4; 作者刘纪玉杜以军刘星吴家强李俊丛晓燕赵新华徐绍建孙文博时建立单虎王金宝; 机构青岛农业大学山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东省农业科学院畜牧兽医研究所; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期1-7,共7页; 基金国家自然科学基金(31100119、31170146) 青岛市科技基金(11-2-3-24-nsh) +2 种基金山东省生猪产业创新团队建设山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(BS2012NY012); 文摘本试验旨在建立一种用SYBR GreenⅠ荧光染料检测HeLa细胞Ⅰ型干扰素效应因子ISG15、ISG56、Mx1、OAS和PKR mRNA表达水平的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并在口蹄疫病毒(FMDV)L蛋白抑制Ⅰ型IFN发挥效应的信号通路中进行初步应用。利用TRIzol法提取总RNA,经Oligo d(T)15进行反转录,利用PCR扩增各段目的基因,并克隆至pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,经鉴定为阳性的重组质粒作为标准品模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR标准曲线和熔解曲线,并进行灵敏性、特异性和重复性试验。根据建立的实时荧光定量RT-PCR方法,检测FMDV L蛋白对Ⅰ型IFN效应因子的抑制效果。HeLa细胞在转染FMDV L蛋白真核表达质粒,并受到Ⅰ型IFN刺激后ISG15、ISG56、Mx1、OAS和PKR的相对表达量较转染空载体或表达GST的真核表达质粒明显降低。本试验建立了HeLa细胞Ⅰ型IFN效应因子的实时荧光定量RT-PCR检测方法,为在mRNA水平上对HeLa细胞Ⅰ型IFN效应因子的定量分析奠定了基础,并成功地初步应用于FMDV L蛋白抑制Ⅰ型IFN发挥效应的信号通路的研究中。; 关键词实时荧光定量RT-PCR SYBR GreenⅠ 口蹄疫病毒 L蛋白干扰素; Keywords Real-time fluorescent quantitative RT-PCR SYBR GreenⅠ foot and mouth disease virus L protein interferon; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一例典型水貂犬瘟热病例诊断及H基因序列分析被引量：1: 5; 作者王聪张倩张洪亮王怡男黄娟; 机构青岛农业大学山东省预防兽医学重点实验室黄岛出入境检验检疫局; 出处《中国动物检疫》 CAS 2013年第2期49-52,共4页; 基金山东省自然科学基金ZR2010CL023; 文摘为了对感染犬瘟热水貂的临床症状、病理特征及H基因突变情况进行全面了解，本试验对一水貂养殖场疑似犬瘟热发病水貂进行了全面诊断和基因序列分析。临床观察水貂眼角出现黏性分泌物，脚垫红肿发胀，精神状态萎靡。剖检病理变化为肺脏严重出血，出现大面积肉样出血变性，胆囊肿大，胆汁呈浓稠深绿色，肾脏肿大，膀胱出现积尿现象，肠系膜出血、脱落。经HE染色发现，组织有明显增多的炎性细胞，局部有出血淤血现象。经胶体金、鲁戈氏碘凝集法和革兰氏染色镜检检测为单纯犬瘟热感染，RT-PCR检测CDV阳性。利用RT-PCR方法对CDVH基因进行扩增并进行测序，结果显示该株犬瘟热病毒为亚洲I型，与野毒株2544、48／05、98002、SD（07）1的同源性在92．6％～95．7%，与疫苗株CDV3、Convac、Lederle、Onderstepoort的同源性在90．9％～91．6％。; 关键词水貂犬瘟热病例诊断 H基因序列分析; Keywords Mink Canine distemper Case diagnosis H gene Sequence analysis; 分类号 S852.52 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡源巴氏杆菌的分离鉴定及致病性研究被引量：4: 6; 作者秦晓冰; 机构青岛农业大学; 出处《安徽农业科学》 CAS 2019年第18期88-89,共2页; 基金山东省兽药诊断试剂工程技术研究中心资助项目山东省高等学校优势学科人才团队培育计划项目; 文摘从青岛农业大学动物医院的蛋鸡送检病料中,无菌采集病死鸡肺脏、肝脏组织进行细菌的分离培养和鉴定,并对鉴定的分离菌进行药敏试验和致病性试验。结果表明,分离菌在血琼培养基上呈圆隆、露滴状、表面光滑带荧光的白色菌落,染色镜检为革兰氏阴性短杆菌,经PCR鉴定该菌为多杀性巴氏杆菌;该菌对氟苯尼考、阿米卡星高度敏感,对头孢曲松、头孢氨苄、阿莫西林等13种药物表现出不同程度耐药;该菌对小鼠呈高致死性,表明该菌具有很强的致病性。; 关键词鸡源多杀性巴氏杆菌分离鉴定致病性; Keywords P.multocida from chicken Isolation Identification Pathogenicity; 分类号 S831.7 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法的建立被引量：2: 7; 作者胡继明杨培培王颖孙海芳黄娟陈俏俏杨瑞梅张传美秦晓冰单虎; 机构青岛农业大学山东省预防兽医学重点实验室莱阳市畜牧局; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期943-949,共7页; 基金国家科技支撑计划(2011BAD34B00) 科技基础性工作专项(SQ2012FY3260033) +1 种基金山东省生猪产业创新团队建设青岛市公共领域科技支撑计划(11-2-3-24-nsh); 文摘本研究旨在建立猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法。根据Shimen株设计1对特异性引物,建立猪瘟病毒RT-PCR-RFLP检测方法;对20份疑似猪瘟临床样品进行检测,并对检出的山东8株流行野毒株和2株疫苗株PCR产物进行克隆与序列分析,验证上述方法。结果RT-PCR扩增片段为825bp,产物经RFLP分析,野毒株的PCR产物能被ApaⅠ酶切为322bp和503bp 2个片段,兔化弱毒疫苗株则不能被酶切,检测出RNA的最低浓度为0.028 6μg.mL-1;8株流行野毒株都含GGGCCC序列(ApaⅠ酶切位点),2株疫苗株相应序列为GAGCCC,不能被ApaⅠ酶切;8株流行野毒株属于基因2群,2株疫苗株与HCLV遗传关系近,为基因1群。建立了可鉴别猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP检测方法,为猪瘟的防控提供有效手段。; 关键词猪瘟病毒野毒株兔化弱毒疫苗株 RT-PCR-RFLP; Keywords classical swine fever virus wild-type vaccine viruses RT-PCR-RFLP; 分类号 S852.651 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	水貂犬瘟热病毒受体SLAM的原核表达	王聪张洪亮黄娟靳继惠王怡男单虎	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2013	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	水貂犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子的细胞定位及组织分布	黄娟王聪张洪亮单虎	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	水貂犬瘟热流行病学调查	王聪邴啟政张荧黄娟单虎	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2013	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	HeLa细胞Ⅰ型干扰素效应因子实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用	刘纪玉杜以军刘星吴家强李俊丛晓燕赵新华徐绍建孙文博时建立单虎王金宝	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	一例典型水貂犬瘟热病例诊断及H基因序列分析	王聪张倩张洪亮王怡男黄娟	《中国动物检疫》 CAS	2013	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	鸡源巴氏杆菌的分离鉴定及致病性研究	秦晓冰	《安徽农业科学》 CAS	2019	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法的建立	胡继明杨培培王颖孙海芳黄娟陈俏俏杨瑞梅张传美秦晓冰单虎	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料