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犬瘟热病毒受体SLAM TaqMan荧光定量PCR方法的建立
1
作者
王介淞
林佳旭
+1 位作者
王鑫磊
黄娟
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2020年第3期41-44,I0003,共5页
为了建立TaqMan荧光定量PCR方法来快速检测水貂淋巴细胞上的犬瘟热病毒受体信号淋巴细胞激活分子(SLAM),根据水貂SLAM基因的保守区域,设计1对特异引物和探针,通过优化反应条件,并进行敏感性试验、重复性试验和水貂外周血淋巴细胞检测试...
为了建立TaqMan荧光定量PCR方法来快速检测水貂淋巴细胞上的犬瘟热病毒受体信号淋巴细胞激活分子(SLAM),根据水貂SLAM基因的保守区域,设计1对特异引物和探针,通过优化反应条件,并进行敏感性试验、重复性试验和水貂外周血淋巴细胞检测试验。结果表明,建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法最低检出量可达4.9个拷贝;组内重复和组间重复Cq值变异系数均小于1%;应用该方法可成功检出犬瘟热病毒感染前后水貂外周血淋巴细胞中的SLAM基因的表达情况。表明建立的检测方法敏感性高,重复性好,可以用于犬瘟热病毒与SLAM受体互作以及致病机制的研究。
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关键词
犬瘟热病毒
SLAM受体
荧光定量RT-PCR
TAQMAN
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职称材料
犬瘟热病毒强毒株在Vero-SLAM细胞上传代后的基因突变分析
2
作者
吴佳琦
李贝影
+2 位作者
王介淞
黄娟
单虎
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2018年第3期7-10,共4页
为了了解犬瘟热病毒强毒株全基因组序列在Vero-SLAM细胞上传代培养后的突变情况,本试验利用犬瘟热病毒强毒分离株HeBei株第12代细胞毒,通过RT-PCR方法分段扩增犬瘟热病毒全基因,对扩增出的各个片段进行克隆和鉴定,并应用SeqMan程序将所...
为了了解犬瘟热病毒强毒株全基因组序列在Vero-SLAM细胞上传代培养后的突变情况,本试验利用犬瘟热病毒强毒分离株HeBei株第12代细胞毒,通过RT-PCR方法分段扩增犬瘟热病毒全基因,对扩增出的各个片段进行克隆和鉴定,并应用SeqMan程序将所测得的序列进行拼接成Hebei株全长cDNA序列。结果表明,全基因与原始序列相比有24处碱基突变,总突变率为0.15%,其中3处为非编号码区的突变,其余21处在编码区,碱基突变率最高的蛋白基因为F(0.36%),最低为N(无突变)。氨基酸突变率分别为N蛋白0.00%;P蛋白0.39%;M蛋白0.30%;F蛋白0.60%;H蛋白0.50%;L蛋白0.18%。表明犬瘟热病毒强毒株经Vero-SLAM细胞传代培养后基因突变主要发生在F蛋白基因上。
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关键词
犬瘟热病毒
Vero-SLAM细胞
基因突变
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职称材料
题名
犬瘟热病毒受体SLAM TaqMan荧光定量PCR方法的建立
1
作者
王介淞
林佳旭
王鑫磊
黄娟
机构
青岛农业大学动物医学院山东省兽药诊断试剂工程技术研究中心
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2020年第3期41-44,I0003,共5页
基金
国家自然科学基金(31472196)
山东省高等学校优势学科“兽医生物技术”人才团队培育计划。
文摘
为了建立TaqMan荧光定量PCR方法来快速检测水貂淋巴细胞上的犬瘟热病毒受体信号淋巴细胞激活分子(SLAM),根据水貂SLAM基因的保守区域,设计1对特异引物和探针,通过优化反应条件,并进行敏感性试验、重复性试验和水貂外周血淋巴细胞检测试验。结果表明,建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法最低检出量可达4.9个拷贝;组内重复和组间重复Cq值变异系数均小于1%;应用该方法可成功检出犬瘟热病毒感染前后水貂外周血淋巴细胞中的SLAM基因的表达情况。表明建立的检测方法敏感性高,重复性好,可以用于犬瘟热病毒与SLAM受体互作以及致病机制的研究。
关键词
犬瘟热病毒
SLAM受体
荧光定量RT-PCR
TAQMAN
Keywords
canine distemper virus
SLAM receptor
fluorescent quantitative RT-PCR
TaqMan
分类号
S858.292 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
犬瘟热病毒强毒株在Vero-SLAM细胞上传代后的基因突变分析
2
作者
吴佳琦
李贝影
王介淞
黄娟
单虎
机构
青岛农业大学动物医学院山东省兽药诊断试剂工程技术研究中心
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2018年第3期7-10,共4页
基金
国家自然科学基金(31472196)
山东省高等学校优势学科人才团队培育计划
文摘
为了了解犬瘟热病毒强毒株全基因组序列在Vero-SLAM细胞上传代培养后的突变情况,本试验利用犬瘟热病毒强毒分离株HeBei株第12代细胞毒,通过RT-PCR方法分段扩增犬瘟热病毒全基因,对扩增出的各个片段进行克隆和鉴定,并应用SeqMan程序将所测得的序列进行拼接成Hebei株全长cDNA序列。结果表明,全基因与原始序列相比有24处碱基突变,总突变率为0.15%,其中3处为非编号码区的突变,其余21处在编码区,碱基突变率最高的蛋白基因为F(0.36%),最低为N(无突变)。氨基酸突变率分别为N蛋白0.00%;P蛋白0.39%;M蛋白0.30%;F蛋白0.60%;H蛋白0.50%;L蛋白0.18%。表明犬瘟热病毒强毒株经Vero-SLAM细胞传代培养后基因突变主要发生在F蛋白基因上。
关键词
犬瘟热病毒
Vero-SLAM细胞
基因突变
Keywords
Canine distemper virus
Vero-SLAM cells
Genetic mutation
分类号
S852.655 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
犬瘟热病毒受体SLAM TaqMan荧光定量PCR方法的建立
王介淞
林佳旭
王鑫磊
黄娟
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2020
0
在线阅读
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职称材料
2
犬瘟热病毒强毒株在Vero-SLAM细胞上传代后的基因突变分析
吴佳琦
李贝影
王介淞
黄娟
单虎
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2018
0
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职称材料
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