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甘薯叶绿体表达载体构建及其融合基因在叶绿体中的瞬间表达被引量：7: 1; 作者王玉华张秀海 +3 位作者吴忠义王永勤黄丛林贾敬芬《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1747-1755,共9页; 利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,根据烟草叶绿体基因组全序列设计引物,从甘薯(Ipomoeabatatas)叶绿体基因组中克隆了2个相邻的功能基因rbcL(GenBank登录号为AY942199)和accD(GenBank登录号为AY942200),并以此作为定点整合外源基... 展开更多; 关键词甘薯叶绿体同源片段叶绿体表达载体瞬间表达中长链聚羟基脂肪酸酯; 在线阅读下载PDF 职称材料

叶绿体转化及其应用于作物改良研究的最新进展被引量：7: 2; 作者巩智刚周海鹏 +2 位作者徐芳韩晓玲王玉华《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期288-294,共7页; 农杆菌介导的核基因转化技术已普遍应用于作物改良和分子育种方面,而其不可避免的转基因沉默现象和生物安全问题是科研工作者和广大民众关注的焦点,进而成为基因工程技术广泛应用的主要限制因素。叶绿体遗传转化技术因具有核转化不可比... 展开更多; 关键词叶绿体转化基因工程作物改良; 在线阅读下载PDF 职称材料

根癌农杆菌介导转褪黑素基因草莓的获得被引量：4: 3; 作者王玉华韩晓玲 +1 位作者郝建国贾敬芬《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期766-772,共7页; 为建立根癌农杆菌介导的草莓褪黑素基因高效遗传转化体系,以草莓品种"早红"叶片和叶柄为外植体,优化了影响根癌农杆菌遗传转化的因素,包括农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间和预培养时间等,建立了适宜草莓"早红"... 展开更多; 关键词农杆菌褪黑素草莓遗传转化; 在线阅读下载PDF 职称材料

phaG和phaC基因在烟草叶绿体中的转化及其遗传分析被引量：1: 4; 作者王玉华吴忠义 +3 位作者张秀海王永勤黄丛林贾敬芬《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1949-1957,共9页; 中长链羟基脂肪酸聚酯(medium-chain-length-PHAs,mcl-PHAs)属于微生物聚酯。羟酰-CoA-ACP-转移酶和II型PHA合酶是mcl-PHAs生物合成途径中的两个关键酶。将编码羟酰-CoA-ACP-转移酶的基因phaG与水稻叶绿体psbA基因的启动子和终止子连接... 展开更多; 关键词烟草叶绿体转化 phaG和phaC 遗传分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甘薯叶绿体表达载体构建及其融合基因在叶绿体中的瞬间表达被引量：7: 1; 作者王玉华张秀海吴忠义王永勤黄丛林贾敬芬; 机构西北大学生命科学学院/陕西省生物技术重点实验室/西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心; 出处《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1747-1755,共9页; 基金国家自然科学基金(30900914) 陕西省教育厅专项(09JK777) 西北大学重点实验室开放基金资助; 文摘利用叶绿体基因组进化中高度保守的特点,根据烟草叶绿体基因组全序列设计引物,从甘薯(Ipomoeabatatas)叶绿体基因组中克隆了2个相邻的功能基因rbcL(GenBank登录号为AY942199)和accD(GenBank登录号为AY942200),并以此作为定点整合外源基因的同源重组片段。以来自叶绿体基因组的强启动子Prrn和Rps-bA-pro分别驱动选择标记基因aadA及phaC-gfp融合基因,构建成表达盒prrn-aadA-TpsbA-ter与RpsbA-pro-phaC-gfp-RpsbA-ter,然后将这2个表达盒串联在一起克隆进甘薯叶绿体同源片段中,获得甘薯叶绿体定点整合表达载体pSC-GFP。酶切分析证明,所构建的载体符合预期设计;采用该载体对甘薯叶片进行基因枪转化,结果显示,phaC-gfp融合基因可在叶绿体特异启动子和终止子的调控下在甘薯幼嫩叶片中瞬间表达,证明构建的载体pSC-GFP可用于甘薯叶绿体转化。; 关键词甘薯叶绿体同源片段叶绿体表达载体瞬间表达中长链聚羟基脂肪酸酯; Keywords sweet potato chloroplast homologous fragments chloroplast expression vector transient expression medium-chain-length-polyhydroxybutyrates; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名叶绿体转化及其应用于作物改良研究的最新进展被引量：7: 2; 作者巩智刚周海鹏徐芳韩晓玲王玉华; 机构西北大学生命科学学院/陕西省生物技术重点实验室/西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室西安力邦制药有限公司医药科学研究所; 出处《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期288-294,共7页; 基金国家自然科学基金(30900914) 陕西省教育厅专项(09JK777) +1 种基金西北大学西部资源生物与现代生物技术重点实验室开放基金; 文摘农杆菌介导的核基因转化技术已普遍应用于作物改良和分子育种方面,而其不可避免的转基因沉默现象和生物安全问题是科研工作者和广大民众关注的焦点,进而成为基因工程技术广泛应用的主要限制因素。叶绿体遗传转化技术因具有核转化不可比拟的独特优势,成为植物基因工程发展的新方向和科研工作者研究的热点之一,通过该技术有望培育出真正生物安全的转基因作物新品种。本文围绕叶绿体转化的原理、方法、筛选标记及其应用等方面进行阐述,着重介绍其在作物改良方面研究的最新进展,并对存在问题及应用前景进行了展望。; 关键词叶绿体转化基因工程作物改良; Keywords chloroplast transformation crop improvement genetic engineering; 分类号 S336 [农业科学—作物遗传育种]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名根癌农杆菌介导转褪黑素基因草莓的获得被引量：4: 3; 作者王玉华韩晓玲郝建国贾敬芬; 机构陕西省生物技术重点实验室/西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室西安力邦制药有限公司医药科学研究所; 出处《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期766-772,共7页; 基金国家自然科学基金(30671082) 陕西省自然科学基金(2006C102) 西北大学西部资源生物与现代生物技术重点实验室开放基金; 文摘为建立根癌农杆菌介导的草莓褪黑素基因高效遗传转化体系,以草莓品种"早红"叶片和叶柄为外植体,优化了影响根癌农杆菌遗传转化的因素,包括农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间和预培养时间等,建立了适宜草莓"早红"的农杆菌遗传转化体系。结果表明,"早红"草莓适宜的转化条件是:外植体的最适预培养时间为2～3d,农杆菌侵染的最佳菌液浓度为OD6000.3～0.5,最适侵染时间为15min,最适共培养时间为3d。在此基础上,通过根癌农杆菌介导法将褪黑素合成关键酶N-乙酰转移酶(AANAT)和羟吲哚-O-甲基转移酶(HIOMT)基因AANAT和HIOMT转入草莓基因组,并对获得的抗性植株进行PCR和PCR-Southern blot检测分析,结果表明外源基因已经整合进草莓基因组中。RT-PCR分析证明外源基因已经在转录水平表达。; 关键词农杆菌褪黑素草莓遗传转化; Keywords Agrobacterium tumefaciens melatonin strawberry genetic transformation; 分类号 S668.4 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名phaG和phaC基因在烟草叶绿体中的转化及其遗传分析被引量：1: 4; 作者王玉华吴忠义张秀海王永勤黄丛林贾敬芬; 机构西北大学生命科学学院/陕西省生物技术重点实验室/西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心; 出处《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1949-1957,共9页; 基金国家高技术研究发展计划(863计划)(2002AA213051) 国家自然科学基金项目(30900914) +1 种基金陕西省教育厅自然科学专项(09JK777)资助; 文摘中长链羟基脂肪酸聚酯(medium-chain-length-PHAs,mcl-PHAs)属于微生物聚酯。羟酰-CoA-ACP-转移酶和II型PHA合酶是mcl-PHAs生物合成途径中的两个关键酶。将编码羟酰-CoA-ACP-转移酶的基因phaG与水稻叶绿体psbA基因的启动子和终止子连接构建表达盒RpsbA-pro-phaG-RpsbA-ter,将II型PHA合酶的基因phaC与水稻叶绿体16SrRNA基因的强启动子Prrn及rbcL基因的终止子连接构建表达盒prrn-phaC-RrbcL-ter,连同壮观霉素抗性基因aadA表达盒prrn-aadA-TpsbA-ter一起克隆进烟草叶绿体基因组同源片段rbcL和accD之间,得到烟草叶绿体表达载体pTGC。用包裹有质粒pTGC的金粉子弹轰击烟草无菌苗叶片,经壮观霉素筛选后获得6株叶绿体型转基因植株。对T0代和T1代转基因植株进行PCR检测和Southern blot分析表明,外源基因已整合进烟草叶绿体基因组中,且T1代转基因植株已同质化。RT-PCR分析结果证实外源基因已在转录水平上表达。转基因植株的自交及正反交结果表明,外源基因在转基因后代中能够稳定遗传,遗传方式遵循母性遗传规律,不存在转基因的花粉漂移现象。; 关键词烟草叶绿体转化 phaG和phaC 遗传分析; Keywords Tobacco Chloroplast genetic transformation phaG and phaC Maternally inheritance Genetic analysis; 分类号 S572 [农业科学—烟草工业]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	甘薯叶绿体表达载体构建及其融合基因在叶绿体中的瞬间表达	王玉华张秀海吴忠义王永勤黄丛林贾敬芬	《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	叶绿体转化及其应用于作物改良研究的最新进展	巩智刚周海鹏徐芳韩晓玲王玉华	《核农学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	根癌农杆菌介导转褪黑素基因草莓的获得	王玉华韩晓玲郝建国贾敬芬	《核农学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	phaG和phaC基因在烟草叶绿体中的转化及其遗传分析	王玉华吴忠义张秀海王永勤黄丛林贾敬芬	《作物学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料