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细胞外钾对HERG基因无义突变L539fs/47表达的调控 被引量:1
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作者 吕颖 张军波 +6 位作者 刘仲伟 张爱峰 潘军强 王军奎 潘硕 韩稳琦 孙超峰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期228-233,共6页
目的:研究持续细胞外钾对野生型HERG与其突变体L539fs/47蛋白表达的影响。方法:用脂质体转染法将野生型HERG(WT)及其突变体HERG-L539fs/47(MT)分别转染HEK293细胞36 h后,0.8、4.3及10mmol/L的钾干预6 h,流式细胞术检测HERG蛋白表达量;干... 目的:研究持续细胞外钾对野生型HERG与其突变体L539fs/47蛋白表达的影响。方法:用脂质体转染法将野生型HERG(WT)及其突变体HERG-L539fs/47(MT)分别转染HEK293细胞36 h后,0.8、4.3及10mmol/L的钾干预6 h,流式细胞术检测HERG蛋白表达量;干预12 h用激光共聚焦成像和免疫印迹法进行HERG蛋白定位及表达量检测。结果:用激光共聚焦成像检测发现野生型HERG蛋白主要分布在细胞膜上;而HERG突变体L539fs/47蛋白大部分滞留胞浆;并且HERG蛋白的表达均随细胞外钾浓度升高而增多。流式细胞术结果显示细胞外高钾组荧光增多(P<0.01),WT组荧光阳性细胞百分比和荧光强度均高于MT组(P<0.05)。免疫印迹显示,不同于野生型HERG 135 kD及155 kD 2个条带,突变体仅60 kD 1个条带,3个条带均受细胞外钾影响(P<0.05)。结论:细胞外高钾增强细胞膜上野生型和突变型HERG通道蛋白的稳定性,持续低钾干预时间依赖性地减少HERG通道蛋白的表达。 展开更多
关键词 HERG基因 无义突变 细胞外钾 HEK293细胞
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HEK293细胞中杂合状态下无义突变体L539fs/47对野生型HERG电流的作用
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作者 吕颖 张军波 +6 位作者 张爱峰 刘仲伟 王军奎 韩稳琦 潘军强 李国良 孙超峰 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期353-357,371,共6页
目的研究单独表达无功能的无义突变体L539fs/47在HEK293细胞中杂合状态下对野生型HERG电流的作用。方法用脂质体转染法将野生型HERG及突变体HERG-L539fs/47分别转染HEK293细胞36h后,RT-PCR检测HERG mRNA表达,免疫荧光及免疫印迹检测HER... 目的研究单独表达无功能的无义突变体L539fs/47在HEK293细胞中杂合状态下对野生型HERG电流的作用。方法用脂质体转染法将野生型HERG及突变体HERG-L539fs/47分别转染HEK293细胞36h后,RT-PCR检测HERG mRNA表达,免疫荧光及免疫印迹检测HERG蛋白定位及表达量,全细胞膜片钳检测IHERG电流密度。结果野生组HERG的mRNA表达量高于L539fs/47突变组(1.066±0.612 vs.0.254±0.397,P<0.01)。免疫荧光检测发现野生型HERG蛋白多于突变体,野生型HERG蛋白主要分布在细胞膜上;而HERG突变体蛋白大部分滞留胞质。免疫印迹显示:不同于野生型HERG135ku及155ku 2个条带,突变体仅60ku 1个条带。全细胞膜片钳检测WT+MT组IHERG较WT组下降55.23%(22.03±2.62 vs.49.20±2.31pApF,P<0.01)。结论 HEK293细胞中杂合状态下截断突变体L539fs/47对野生型HERG电流的不完全负显性抑制作用。 展开更多
关键词 HERG 无义突变 不完全负显性抑制作用 HEK293细胞
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血凝状态对急诊冠状动脉介入治疗后发生无复流的评价
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作者 夏国志 吕颖 +3 位作者 官功昌 姚晓伟 刘新宏 王军奎 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第22期3756-3759,共4页
目的:探讨血凝状态对急诊冠状动脉介入治疗(AMI-PCI)发生无复流的评价。方法:连续入选首诊AMI,12 h内行急诊PCI的患者187例,观察术后无复流发生;检测血浆血管性假血友病因子(v WF)、P-选择素(Ps)、组织因子(TF)。结果 :AMI急... 目的:探讨血凝状态对急诊冠状动脉介入治疗(AMI-PCI)发生无复流的评价。方法:连续入选首诊AMI,12 h内行急诊PCI的患者187例,观察术后无复流发生;检测血浆血管性假血友病因子(v WF)、P-选择素(Ps)、组织因子(TF)。结果 :AMI急诊PCI无复流发生率为23.5%。AMI无复流组高凝状态高于正常血流组(P=0.003)。Logistic分析显示高凝状态为无复流的独立预测因子(OR=2.361,95%CI 1.083~5.148,P=0.031)。结论 :血浆v WF、Ps、TF水平升高提示存在高凝状态,对无复流发生具有一定预测价值。 展开更多
关键词 心肌梗死 无复流 血凝 血管成形术 经皮冠状动脉
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