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脂氧素A4对Ⅱ型肺泡上皮细胞-间质转化的抑制作用及其机制 被引量:1
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作者 王贵佐 杨淑梅 刘璐 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第2期157-163,共7页
目的 探讨脂氧素A4(lipoxin A4, LXA4)对Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial typeⅡcell, ATⅡ)间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响及可能机制。方法 将A549细胞分为对照组、转化生长因子β1(transforming grow... 目的 探讨脂氧素A4(lipoxin A4, LXA4)对Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial typeⅡcell, ATⅡ)间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响及可能机制。方法 将A549细胞分为对照组、转化生长因子β1(transforming growth factor, TGF-β1)组、空质粒+TGF-β1组、pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组及LXA4+TGF-β1组。TGF-β1组以5 ng/mL TGF-β1干预A549细胞48 h;空质粒+TGF-β1组和pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组A549细胞先分别转染空质粒或Nrf2过表达质粒,再以5 ng/mL TGF-β1干预48 h;LXA4+TGF-β1组A549细胞先用100 nmol/L LXA4预处理6 h再给予5 ng/mL TGF-β1干预48 h。光镜观察细胞形态变化,免疫印迹及免疫荧光法检测上皮标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)、间质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)表达;免疫印迹法检测核因子红细胞2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)蛋白水平。结果 与对照组相比,TGF-β1组光镜下可见部分A549细胞形态从鹅卵石状变成细长不规则状,呈间质性改变,E-cadherin表达减少(P<0.05)、α-SMA表达增多(P<0.01),Nrf2蛋白水平下调(P<0.05)。与TGF-β1组相比,pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组A549细胞E-cadherin表达增多(P<0.05)、α-SMA表达减少(P<0.01);LXA4+TGF-β1组A549细胞E-cadherin上调、α-SMA下调以及Nrf2蛋白水平增多(P<0.05)。结论 LXA4可抑制A549细胞发生EMT,其机制与上调Nrf2表达相关。 展开更多
关键词 肺纤维化 Ⅱ型肺泡上皮细胞 上皮细胞-间质转化 脂氧素A4 NRF2
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鞘氨醇-1-磷酸对肺成纤维细胞活性的作用及其机制
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作者 王贵佐 徐海娟 +1 位作者 杨淑梅 刘璐 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第9期1170-1176,共7页
目的 探讨鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate, S1P)对肺成纤维细胞活性的影响及其可能机制。方法 以0,0.01,0.03,0.1,0.3,1,3μmol/L S1P干预肺成纤维细胞24 h,筛选最佳干预浓度;随后以确定的S1P干预浓度刺激细胞0,24,48,72 h,CCK-... 目的 探讨鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate, S1P)对肺成纤维细胞活性的影响及其可能机制。方法 以0,0.01,0.03,0.1,0.3,1,3μmol/L S1P干预肺成纤维细胞24 h,筛选最佳干预浓度;随后以确定的S1P干预浓度刺激细胞0,24,48,72 h,CCK-8法检测细胞增殖。将肺成纤维细胞分为对照组、S1P组、JTE013+S1P组、CAY10444+S1P组、control siRNA+S1P组和YAP siRNA+S1P组。S1P组以1μmol/L S1P干预肺成纤维细胞24 h;JTE013+S1P组和CAY10444+S1P组细胞先分别用10μmol/L选择性S1P受体2(sphingosine-1-phosphate receptor 2, S1PR2)拮抗剂JTE013或10μmol/L选择性S1PR3拮抗剂CAY10444预处理1 h后再给予1μmol/L S1P干预24 h;control siRNA+S1P组和YAP siRNA+S1P组细胞先分别转染control siRNA或YAP siRNA,再给予1μmol/L S1P干预24 h。CCK-8法检测细胞增殖;免疫印迹法检测t-Yes相关蛋白(Yes-associated protein, YAP)、p-YAP、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、纤维粘连蛋白(Fibronectin)水平。结果 S1P干预后,肺成纤维细胞增殖随浓度和时间依赖性增加(P<0.05),筛选最佳干预浓度为1μmol/L。与对照组相比,S1P组细胞p-YAP水平减少(P<0.001),α-SMA、CollagenⅠ和Fibronectin蛋白水平增多(P<0.05)。与S1P组相比,JTE013+S1P组和CAY10444+S1P组细胞p-YAP水平均增多(P<0.05),α-SMA、CollagenⅠ和Fibronectin蛋白水平均减少(P<0.05),细胞增殖均受到抑制(P<0.05);细胞增殖均受到抑制(P<0.05);且JTE013的作用效果较CAY10444显著(P<0.05);YAP siRNA+S1P组细胞α-SMA、CollagenⅠ和Fibronectin蛋白水平,以及细胞增殖均降低(P<0.05)。结论 S1P通过与S1PR2/3结合激活YAP,诱导肺成纤维细胞活化。 展开更多
关键词 S1P S1PR2/3 肺纤维化 肺成纤维细胞 YAP
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细胞黏附分子2对非小细胞肺癌增殖、侵袭和凋亡的影响
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作者 苗毅 段进进 +3 位作者 尚立群 王莉 吴桦 董玉 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第2期121-126,共6页
目的探究细胞黏附分子2(CADM2)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)生物学过程的潜在作用和机制。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫蛋白印迹法(Western blot)测定CADM2在人正常肺细胞系Gekko lung-1和肺癌细胞系A... 目的探究细胞黏附分子2(CADM2)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)生物学过程的潜在作用和机制。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫蛋白印迹法(Western blot)测定CADM2在人正常肺细胞系Gekko lung-1和肺癌细胞系A549和H460中的表达情况。利用过表达技术处理A549和H460细胞,并分为过表达组(pcDNA3.1-CADM2组)、载体对照组(pcDNA3.1-NC组)及未处理组(control组)。转染后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell实验检测CADM2对A549和H460细胞增殖及侵袭能力的影响。进一步通过流式细胞术评估CADM2对凋亡率的影响。此外,通过RT-qPCR和Western blot检测CADM2过表达后AKT/mTOR通路蛋白表达的变化情况。结果与正常肺细胞系Gekko lung-1相比,CADM2在肺癌细胞系A549和H460中呈低表达(P<0.05)。与载体对照组及未处理组相比,CADM2过表达组A549和H460细胞增殖和侵袭能力显著降低,细胞凋亡率提高,并且p-AKT和p-mTOR的表达水平明显提升(均P<0.05)。结论CADM2通过调节AKT/mTOR信号通路抑制非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭,并且诱导细胞凋亡,提示CADM2是治疗非小细胞肺癌的新型靶点。 展开更多
关键词 CADM2 非小细胞肺癌 增殖 侵袭 凋亡 AKT/MTOR
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和厚朴酚对慢性哮喘模型大鼠气道炎症及气道重塑的抑制作用及其机制 被引量:3
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作者 南李刚 王贵佐 +1 位作者 杨淑梅 刘璐 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第9期1231-1236,共6页
目的探讨和厚朴酚对慢性哮喘模型大鼠气道炎症和气道重塑的影响及其可能机制。方法24只雄性SD大鼠随机分为4组(每组各6只):对照组、卵清蛋白(ovalbumin,OVA)模型组、和厚朴酚组以及地塞米松组。OVA模型组第1,7,14天腹腔注射新鲜配制OVA... 目的探讨和厚朴酚对慢性哮喘模型大鼠气道炎症和气道重塑的影响及其可能机制。方法24只雄性SD大鼠随机分为4组(每组各6只):对照组、卵清蛋白(ovalbumin,OVA)模型组、和厚朴酚组以及地塞米松组。OVA模型组第1,7,14天腹腔注射新鲜配制OVA混悬液致敏,第21天起接受1%OVA溶液雾化吸入30 min/次,隔日1次,共雾化8周。对照组PBS代替OVA腹腔注射及雾化吸入;和厚朴酚组和地塞米松组每次OVA雾化前1 h分别腹腔注射和厚朴酚溶液(5 mg/kg)和地塞米松(0.5 mg/kg)。末次激发后24 h处死大鼠,观察各组大鼠肺组织病理变化;收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)进行炎性细胞计数及分类;ELISA法检测血清及BALF中IL-4、IL-6、IL-17含量;免疫印迹法检测肺组织Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)水平变化。结果与对照组相比,OVA模型组支气管管壁、平滑肌层增厚,气道及血管周围大量炎性细胞浸润;BALF炎性细胞总数、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞数显著增加(P<0.01),BALF中IL-4、IL-6、IL-17水平显著增高(P<0.01),大鼠肺组织内YAP表达增多(P<0.01)。与OVA模型组相比,和厚朴酚组及地塞米松组大鼠肺组织病理改变明显减轻,BAFL中炎性细胞总数、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞数显著减少(P<0.01),IL-4、IL-6、IL-17水平降低(P<0.01),而和厚朴酚组与地塞米松组间上述改变相似;与OVA模型组相比,和厚朴酚组大鼠肺组织内YAP表达减少(P<0.01)。结论和厚朴酚可以抑制慢性哮喘模型大鼠气道炎症和气道重塑,推测其作用机制可能与和厚朴酚下调YAP表达有关。 展开更多
关键词 和厚朴酚 哮喘 气道炎症 气道重塑 YAP
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AECOPD患者出院后维持治疗方案与短期死亡的相关性
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作者 吴军芳 魏益群 +3 位作者 陈瑞琳 武润苗 赵亚利 苗毅 《安徽医学》 2023年第2期136-141,共6页
目的评估慢性阻塞性肺病急性加重(AECOPD)患者出院后维持治疗方案对出院后90天死亡率的影响。方法回顾性分析2018年2月至2021年6月陕西省人民医院收治的443例AECOPD患者的临床资料,统计随访患者出院后90天生存结局,使用多因素logistic... 目的评估慢性阻塞性肺病急性加重(AECOPD)患者出院后维持治疗方案对出院后90天死亡率的影响。方法回顾性分析2018年2月至2021年6月陕西省人民医院收治的443例AECOPD患者的临床资料,统计随访患者出院后90天生存结局,使用多因素logistic回归分析出院后维持治疗方案对患者出院后90天内死亡的影响。结果443例出院患者中,55.8%的患者在出院后接受3联药物治疗,22.1%的患者接受2联药物治疗,18.5%的患者接受单一药物治疗,3.6%的患者接受其他治疗或不接受治疗。443例患者中,33例(7.4%)患者出院后90天内死亡。多因素logistic回归分析显示,在调整了协变量后,出院后维持治疗方案为单一药物[OR(95%CI):7.233(2.443-21.376)]是患者出院90天内死亡的独立危险因素。结论AECOPD患者出院后维持治疗方案具有多样性特点,出院后单一药物治疗方案较3种药物联合治疗方案具有更高的死亡率。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病急性加重 维持治疗方案 死亡率 治疗方案
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