2006-2015年陕西省其他感染性腹泻流行病学特征分析 被引量：35

1

作者 史伟 徐艺 +5 位作者 刘杨 关路媛 许晶 张蕾 李慎 余鹏博 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期544-548,共5页

目的分析2006-2015年陕西省10年间其他感染性腹泻报告病例的流行病学特征,为其防控提供科学依据和本底数据。方法通过国家"疾病监测信息报告管理系统",对陕西省2006-2015年上报的其他感染性腹泻病例进行特征描述。结果 2006-2... 目的分析2006-2015年陕西省10年间其他感染性腹泻报告病例的流行病学特征,为其防控提供科学依据和本底数据。方法通过国家"疾病监测信息报告管理系统",对陕西省2006-2015年上报的其他感染性腹泻病例进行特征描述。结果 2006-2015年陕西省共报告其他感染性腹泻207 437例,10年平均年发病率约为52.43/10万,其中男性126 673例,女性80 764例,男女性别比为1.57∶1;0岁~和1~4岁年龄组报告病例最多,共计占总报告病例数的72.48%;病例构成比前3位的职业分别是散居儿童(74.88%)、农民(10.75%)和学生(5.75%);全省发病率最高的市依次是宝鸡、延安和安康;发病时间分布呈夏、冬季两个高峰,夏季高峰出现在7~8月,冬季高峰出现在11~12月;病原检测率为4.60%。病原检测结果显示轮状病毒是陕西省其他感染性腹泻的主要病原。结论陕西省其他感染性腹泻的高危人群为5岁以下儿童,特别是秋、冬季的轮状病毒感染;全省的实验室病原检测率较低,传染病监测质量也急需提高。 展开更多

关键词 其他感染性腹泻 流行病学 疫情监测 轮状病毒 诺如病毒

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新生儿溶血病红细胞血型免疫性抗体的特异性分析 被引量：26

2

作者 杨世明 张勇萍 +3 位作者 安宁 王文婷 田榆 徐宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1130-1131,共2页

目的:观察母婴血型不合新生儿溶血病(HDN)红细胞血型免疫性抗体的检出率及其特异性。方法:采用试管法和微柱凝胶法对母婴血标本进行ABO、Rh血型鉴定及不规则抗体筛查,对有黄疸症状的新生儿血标本进行直接抗人球蛋白试验、抗体游离试验... 目的:观察母婴血型不合新生儿溶血病(HDN)红细胞血型免疫性抗体的检出率及其特异性。方法:采用试管法和微柱凝胶法对母婴血标本进行ABO、Rh血型鉴定及不规则抗体筛查,对有黄疸症状的新生儿血标本进行直接抗人球蛋白试验、抗体游离试验、抗体放散试验、抗体特异性鉴定及其效价测定。结果:在298例由红细胞血型免疫性抗体引起的HDN患儿中,检出抗A62例(20.8%),抗B65例(21.8%),抗A+抗AB87例(29.2%),抗B+抗AB6例(2.0%);抗M4例(1.3%),抗N1例(0.3%);抗D4例(1.3%),抗E7例(2.3%),抗cE3例(1.0%)。由ABO及MN血型免疫性抗体引起HDN者,直接抗人球蛋白试验多为弱阳性,由Rh血型免疫性抗体引起HDN者,直接抗人球蛋白试验多为强阳性;微柱凝胶法的凝集强度高于试管法;HDN患儿出生后24h内阳性检出率为91.5%。结论:HDN血型免疫性抗体的特异性主要为ABO系统的抗A、抗B、抗AB,其次为Rh系统的抗E、抗D、抗cE及MN系统的抗M、抗N。 展开更多

关键词 母婴血型不合 新生儿溶血病 免疫性抗体检测 抗体特异性鉴定

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羟基红花黄色素A通过抑制动脉内皮细胞中TNFR1/NF-κB信号通路而发挥抗炎作用 被引量：22

3

作者 刘金连 王海芳 +5 位作者 马淑惠 霍雪萍 梁导艳 曹情雯 胡军 刘勤社 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期945-948,共4页

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对小鼠动脉血管内皮细胞肿瘤坏死因子α受体1/核因子κB(TNFR1/NF-κB)信号通路的作用。方法以(1.2、12、120)μmol/L HSYA预处理体外培养的小鼠动脉血管内皮细胞,之后以肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导细胞,... 目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对小鼠动脉血管内皮细胞肿瘤坏死因子α受体1/核因子κB(TNFR1/NF-κB)信号通路的作用。方法以(1.2、12、120)μmol/L HSYA预处理体外培养的小鼠动脉血管内皮细胞,之后以肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导细胞,采用Western blot法检测HSYA对TNFR1介导NF-κB信号通路相关蛋白核因子κB抑制蛋白α(IκBα)表达的影响;采用实时定量PCR检测HSYA对TNF-α诱导的NF-κB下游分子细胞间黏附分子1(ICAM-1)和E选择素(E-selectin)mRNA表达的抑制作用;采用流式细胞术检测细胞膜TNFR1表达量的变化;利用TNF-α转化酶(TACE)抑制剂TAPI-0检测TACE是否参与HSYA对TNFR1介导信号的抑制作用。结果 HSYA可呈剂量依赖性抑制TNFR1介导的NF-κB上游分子IκBα蛋白降解;HSYA可显著抑制NF-κB下游分子ICAM-1和E-selectin的mRNA表达;HSYA可显著减少细胞膜TNFR1蛋白含量;TAPI-0可抑制HSYA对TNFR1信号的调控作用。结论 HSYA可抑制血管内皮细胞中TNFR1/NF-κB信号通路而发挥抗炎作用,TACE参与介导HSYA的抗炎作用。 展开更多

关键词 羟基红花黄色素A 动脉血管内皮细胞 肿瘤坏死因子α受体1 抗炎作用 肿瘤坏死因子α转化酶

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His标签单克隆抗体的制备及交叉抗原的表位分析 被引量：9

4

作者 赵向绒 张海祥 +5 位作者 刘杨 王鑫 王光华 齐宗利 李元 胡军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期683-687,692,共6页

目的研究His标签对重组蛋白在疫苗、免疫和致病等方面的影响。方法制备His标签的单克隆抗体(m Ab),通过ELISA、Western blot法及免疫组织化学染色方法研究其生物学特性、免疫反应特性以及与人体组织的反应性。结果 His标签m Ab和抗原的... 目的研究His标签对重组蛋白在疫苗、免疫和致病等方面的影响。方法制备His标签的单克隆抗体(m Ab),通过ELISA、Western blot法及免疫组织化学染色方法研究其生物学特性、免疫反应特性以及与人体组织的反应性。结果 His标签m Ab和抗原的结合与空间构型有关,多数抗His标签m Ab可以与血红蛋白结合,亦可与人体多种正常组织反应。结论带His标签的重组蛋白进行体内实验时可刺激机体产生抗His标签的抗体,该抗体可与血红蛋白及人体正常组织结合而影响重组蛋白的后期研究。 展开更多

关键词 His标签 重组蛋白 单克隆抗体 空间构型

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疫苗严重不良反应及其发生机制研究进展 被引量：8

5

作者 王娅宁 张海祥 +1 位作者 侯延丽 李淑娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期283-286,共4页

随着我国公共卫生事业的发展,接种疫苗已成为预防控制相应传染病最经济、最科学、最有效的手段,通过预防接种部分传染病被有效控制甚至消灭,极大地保护了人民的身体健康.但是由于生物制品本身的特性、接种过程、个体差异等因素的影响,... 随着我国公共卫生事业的发展,接种疫苗已成为预防控制相应传染病最经济、最科学、最有效的手段,通过预防接种部分传染病被有效控制甚至消灭,极大地保护了人民的身体健康.但是由于生物制品本身的特性、接种过程、个体差异等因素的影响,一些接种对象在获得免疫保护的同时,也会发生一些免疫反应以外的不利于机体的反应. 展开更多

关键词 严重不良反应 接种疫苗 发生机制 相应传染病 公共卫生事业 免疫保护 预防控制 预防接种

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脐血树突状细胞与细胞因子诱导的杀伤细胞协同抗急性白血病细胞效应及生物学活性研究 被引量：6

6

作者 翟欣辉 魏绪仓 +2 位作者 韩秀蕊 杨娣娣 王岐山 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期102-106,共5页

目的研究脐血树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤(DC-CIK)细胞的体外增殖、免疫表型、分泌细胞因子水平及其对急性白血病细胞细胞毒作用的影响。方法采集脐血单个核细胞诱导DC和CIK细胞。将DC和CIK细胞按1∶5的比例混合培养,以脐血CIK细胞... 目的研究脐血树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤(DC-CIK)细胞的体外增殖、免疫表型、分泌细胞因子水平及其对急性白血病细胞细胞毒作用的影响。方法采集脐血单个核细胞诱导DC和CIK细胞。将DC和CIK细胞按1∶5的比例混合培养,以脐血CIK细胞或外周血DC-CIK细胞为对照。用流式细胞术分析细胞表型,台盼蓝活细胞计数计算细胞扩增倍数,MTT法检测效应细胞杀伤白血病细胞的活性,ELISA法测定分泌干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-12(IL-12)的水平。结果脐血DC-CIK细胞的增殖能力显著高于脐血CIK细胞和外周血DC-CIK细胞(P均<0.05);脐血DC、CIK细胞共培养后,CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例较同条件下CIK细胞明显增多(P<0.05);混合培养3 d,脐血DC-CIK细胞上清液中IL-12、IFN-γ、TNF-α含量均比CIK细胞单纯培养的分泌量高(P<0.01或P<0.05);在2.5∶1～20∶1的效靶范围内,脐血DC-CIK细胞对各亚型急性白血病细胞的杀伤率明显高于CIK细胞(P<0.05),且对各亚型白血病细胞杀伤活性无统计学意义,与外周血DC-CIK细胞对白血病杀伤效应相类同。结论脐血DC可增强同源CIK细胞的增殖活性和抗白血病效应。脐血DC-CIK细胞增殖能力比外周血DC-CIK细胞强,但两者在细胞毒方面无显著性差异。脐血来源丰富,且输注不易引起严重的移植物排斥反应,其DC-CIK细胞在免疫治疗方面应有更广泛的临床应用前景。 展开更多

关键词 脐血 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 共培养 白血病 细胞毒

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抗人球蛋白试验阳性及其临床意义的探讨 被引量：11

7

作者 张勇萍 杨世明 +2 位作者 曹丽妍 苏小花 安宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1245-1246,共2页

目的:观察抗人球蛋白试验(AGT)的临床应用及对自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的诊断价值。方法:采用微柱凝胶法和传统试管法,对368例临床表现疑似为AIHA、风湿免疫性疾病及新生儿溶血病患者的血标本进行AGT。结果:在368例患者血标本中AGT阳... 目的:观察抗人球蛋白试验(AGT)的临床应用及对自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的诊断价值。方法:采用微柱凝胶法和传统试管法,对368例临床表现疑似为AIHA、风湿免疫性疾病及新生儿溶血病患者的血标本进行AGT。结果:在368例患者血标本中AGT阳性209例(56.8%),其中直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性187例(89.5%),间接抗人球蛋白试验(IAT)阳性12例(6.4%,DAT和IAT均阳性10例(5.3%)。AGT阳性的类型分布为IgG+C3型118例(63.1%),IgG型45例(24.1%),C3型24例(12.8%)。12例IAT阳性经抗体特异性鉴定为抗D 2例(16.7%),抗E 5例(41.7%),抗C 1例(8.3%),抗Ec 2例(16.7%),抗e 3例(25.0%)。10例DAT和IAT均阳性者为新生儿溶血病引起的免疫性抗体。结论:AGT能较敏感地检出吸附在红细胞膜上的IgG和补体C3等免疫性抗体,对AIHA的诊断有重要临床意义。但AGT存在一定的假阳性和假阴性,应同时做阴阳性对照才能确保试验结果的准确性。 展开更多

关键词 自身免疫性溶血性贫血 抗人球蛋白试验 抗体鉴定

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运用单克隆抗体分析流感病毒H1亚型HA蛋白的抗原表位 被引量：6

8

作者 李慧瑾 郭春艳 +5 位作者 赵彭花 李研 高锦伟 胡巧侠 李元 胡军 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期291-294,共4页

目的对甲型流感病毒H1亚型血凝素蛋白的抗原表位进行分析。方法以前期获得的97株抗H1亚型HA抗原的单克隆抗体为研究工具,用间接ELISA方法对不同亚型的血凝素抗原进行反应,将H1亚型HA蛋白的抗原表位进行粗分类,用ELISA阻断试验对抗原表... 目的对甲型流感病毒H1亚型血凝素蛋白的抗原表位进行分析。方法以前期获得的97株抗H1亚型HA抗原的单克隆抗体为研究工具,用间接ELISA方法对不同亚型的血凝素抗原进行反应,将H1亚型HA蛋白的抗原表位进行粗分类,用ELISA阻断试验对抗原表位进行细分类。选取两类抗原表位的抗体,通过计算机模拟分析抗体与抗原结合的结构域,推测抗体结合的具体氨基酸位点。结果根据抗体的交叉反应性不同,将流感病毒H1亚型的HA的抗原表位分为8类;根据ELISA阻断试验的初步结果,H1亚型HA抗原的抗原表位又被细分为15类,通过计算机模拟分析预测的抗体与流感病毒HA抗原结合的氨基酸位点结果与ELISA阻断试验结果相吻合。结论证明流感病毒H1N1亚型HA抗原上至少含有15个抗原表位,且通过ELISA阻断试验和计算机模拟分析得到了相互印证,为流感病毒血凝素HA抗原表位预测方法的完善及通用疫苗的研制提供了实验数据。 展开更多

关键词 流感病毒 H1亚型 HA抗原 抗原表位 单克隆抗体

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细胞因子风暴在流行性感冒病毒感染中的作用及防治研究 被引量：12

9

作者 张海祥 谢鑫 +1 位作者 张科进 胡军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期556-559,共4页

流行性感冒病毒(流感病毒)感染具有较高的致病率和死亡率,其感染的严重程度和病毒引起的以过度炎症反应为特征的细胞因子风暴密切相关。本文综述了细胞因子风暴在流感病毒感染中的病理表现、作用机制及其研究进展,并对细胞因子风暴相关... 流行性感冒病毒(流感病毒)感染具有较高的致病率和死亡率,其感染的严重程度和病毒引起的以过度炎症反应为特征的细胞因子风暴密切相关。本文综述了细胞因子风暴在流感病毒感染中的病理表现、作用机制及其研究进展,并对细胞因子风暴相关的流感病毒感染的防治进行了探讨。 展开更多

关键词 细胞因子 细胞因子风暴 流感病毒

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流式微球载体技术在检测肾综合征出血热患者血清特异性抗体和细胞因子中的应用 被引量：6

10

作者 张洁 林远 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期245-247,250,共4页

目的:建立流式微球载体技术(FMA)检测肾综合征出血热(HFRS)患者血清抗HFRS病毒特异性抗体IgM和IgG及细胞因子含量的新方法。方法:选择28例临床确诊的HFRS患者及20例健康人血清标本,FMA定量检测抗HFRS病毒IgM和IgG;定量检测细胞因子IL-6... 目的:建立流式微球载体技术(FMA)检测肾综合征出血热(HFRS)患者血清抗HFRS病毒特异性抗体IgM和IgG及细胞因子含量的新方法。方法:选择28例临床确诊的HFRS患者及20例健康人血清标本,FMA定量检测抗HFRS病毒IgM和IgG;定量检测细胞因子IL-6和TNF-α。检测结果与ELISA法进行比较。结果:FMA检测HFRS患者抗HFRS病毒IgM和IgG的阳性率分别为92.85%和71.43%,健康对照组的抗体阳性率(假阳性率)为0;HFRS患者血清IL-6和TNF-α的含量分别为(532.62±397.19)ng/L和(392.68±177.68)ng/L,明显高于健康对照组(38.77±20.32)ng/L(P<0.01)和(15.91±6.91)ng/L(P<0.01)。ELISA法检测HFRS患者抗HFRS病毒IgM和IgG的阳性率分别为71.43%和50.00%,健康对照组的抗体阳性率(假阳性率)为0;HFRS患者血清IL-6和TNF-α的含量分别为(256.46±102.51)ng/L和(45.63±5.32)ng/L,高于健康对照组(53.8±19.21)ng/L(P<0.01)和(5.81±3.58)ng/L(P<0.01)。结论:建立了FMA法对HFRS患者的特异性抗体和IL-6和TNF-α的检测,其灵敏度明显优于ELISA法,为HFRS的临床诊断和病理机制研究提供了新的方法。 展开更多

关键词 肾综合征出血热 IL-6 TNF-α 流式细胞术 免疫酶技术

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甲型流感病毒纯化及病毒生物学特征分析 被引量：4

11

作者 刘杨 赵向绒 +2 位作者 郭春艳 胡军 余鹏博 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期897-900,共4页

目的评价蔗糖密度梯度离心纯化甲型流感病毒的方法,并对纯化的病毒颗粒特征和免疫原性进行分析。方法接种鸡胚培养病毒,收获尿囊液,超速离心浓缩,蔗糖密度梯度离心纯化病毒,用血凝试验、蛋白定量、透射电镜和SDS-PAGE鉴定病毒颗粒。取... 目的评价蔗糖密度梯度离心纯化甲型流感病毒的方法,并对纯化的病毒颗粒特征和免疫原性进行分析。方法接种鸡胚培养病毒,收获尿囊液,超速离心浓缩,蔗糖密度梯度离心纯化病毒,用血凝试验、蛋白定量、透射电镜和SDS-PAGE鉴定病毒颗粒。取病毒纯化产物以0.03mg/只和0.005mg/只分组免疫小鼠,采集小鼠血清,利用血凝抑制试验测定血清血凝抑制滴度。结果成功利用蔗糖密度梯度离心法纯化出流感病毒,病毒原液经纯化后被分离成L、M、H三个病毒带,其中M病毒带的吸光度、蛋白浓度及血凝滴度最高,蛋白浓度可达1.2mg/mL,血凝滴度高达1×49。电镜观察显示,L区带为具有血凝活性的质膜和结构疏松的病毒组成,M区带病毒颗粒呈球形、丝状或棒状。同时,有大量空心病毒颗粒存在。H区带与M区带类似,但未发现空心病毒颗粒。纯化的病毒免疫小鼠后可产生具有较高血凝抑制活性的抗体。结论蔗糖密度梯度离心技术可用于流感病毒抗原的制备,且不影响病毒的免疫原性。因此,密度梯度离心法可为流感病毒的基础研究及疫苗开发提供技术支持。 展开更多

关键词 甲型流感病毒 蔗糖密度梯度超速离心 免疫原性

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禽流感病毒感染人类及其致病机制研究 被引量：7

12

作者 李静丽 张海祥 +1 位作者 刘杨 胡军 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第1期94-97,共4页

禽流感病毒感染禽类可引发呼吸系统到全身不同程度的病变,严重的可导致败血症、休克、多脏器功能衰竭,甚至死亡。上世纪末,禽流感病毒开始跨种向人类传播,其感染引起急性肺损伤、多器官衰竭等,具有较高的致病率和致死率,危害极大,引起... 禽流感病毒感染禽类可引发呼吸系统到全身不同程度的病变,严重的可导致败血症、休克、多脏器功能衰竭,甚至死亡。上世纪末,禽流感病毒开始跨种向人类传播,其感染引起急性肺损伤、多器官衰竭等,具有较高的致病率和致死率,危害极大,引起了研究者的广泛关注。目前禽流感病毒感染人类及其致病机制尚不明确,本文就此做一综述,为其防治提供参考。 展开更多

关键词 禽流感病毒 感染 致病机制

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甲型流感病毒H1N1单克隆抗体特性鉴定和应用 被引量：2

13

作者 刘杨 赵向绒 +2 位作者 郭春艳 李研 胡军(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1094-1099,共6页

目的:制备抗甲型流感病毒单克隆抗体(mAbs)并分析抗体反应特性,评价mAbs在免疫荧光(IFA)和细胞免疫化学染色中的应用,初步建立H1N1流感病毒抗原检测的双抗体夹心ELISA方法。方法:取A/PR/8/34(H1N1)毒种接种于鸡胚尿囊腔,培养72 h后收获... 目的:制备抗甲型流感病毒单克隆抗体(mAbs)并分析抗体反应特性,评价mAbs在免疫荧光(IFA)和细胞免疫化学染色中的应用,初步建立H1N1流感病毒抗原检测的双抗体夹心ELISA方法。方法:取A/PR/8/34(H1N1)毒种接种于鸡胚尿囊腔,培养72 h后收获尿囊液,甲醛灭活,蔗糖密度梯度超离心法纯化,用于mAbs免疫原开发。病毒颗粒免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0进行融合,ELISA和IFA筛选稳定分泌抗甲型流感病毒mAbs的杂交瘤细胞株。ELISA、IFA、血凝抑制试验(HI)和中和试验(MN)分析抗体反应特性。依据mAbs特性建立细胞IFA试验、HI试验和双抗体夹心ELISA方法。结果:共制备13株mAbs,其中6株(PR8-10、PR8-19、PR8-20、PR8-26、PR8-28、PR8-30)具有较高血凝抑制活性,血凝抑制滴度≤3μg/ml。PR8-13和PR8-15无中和活性,其他11株均具有中和活性。部分mAbs可用于IFA试验和细胞免疫化学染色。依据PR8-24和PR8-25抗体反应特性初步建立H1N1流感病毒抗原检测的双抗体夹心ELISA法。结论:制备出可用于IFA试验和细胞免疫化学染色的A/PR/8/34(H1N1)mAbs,初步建立了快速H1N1检测的ELISA方法,为H1N1流感病毒或病毒血凝素蛋白快速定量方法建立提供依据。 展开更多

关键词 甲型流感病毒 单克隆抗体 细胞免疫化学染色 双抗体夹心ELISA

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白癜风患者血清前黑素小体蛋白17自身抗体的检测 被引量：3

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作者 呼蕾 孙丽君 +6 位作者 李元 李慧瑾 梁导艳 孙晶莹 王鑫 胡军 谢鑫 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期411-413,417,共4页

目的获取重组前黑素小体蛋白17(Pmel 17)并用于检测白癜风患者血清中Pmel 17自身抗体的分布。方法通过RT-PCR从原代黑素细胞中获得人的Pmel 17基因,先后插入克隆载体pMD19-T和表达载体pGEX-4T-1,以构建重组质粒。IPTG诱导Pmel 17蛋白表... 目的获取重组前黑素小体蛋白17(Pmel 17)并用于检测白癜风患者血清中Pmel 17自身抗体的分布。方法通过RT-PCR从原代黑素细胞中获得人的Pmel 17基因,先后插入克隆载体pMD19-T和表达载体pGEX-4T-1,以构建重组质粒。IPTG诱导Pmel 17蛋白表达后以亲和层析法进行纯化。间接ELISA检测白癜风患者血清中抗Pmel 17自身抗体的阳性率。结果重组质粒经测序,与预期设计完全一致,同时Pmel 17蛋白成功表达和纯化。ELISA检测进展期白癜风患者血清中抗Pmel 17自身抗体阳性率为22%,稳定期白癜风患者阳性率仅为2%,健康对照组未检测到抗Pmel 17自身抗体,进展期和稳定期阳性率差异具有统计学意义。结论成功表达了Pmel 17重组蛋白,证明Pmel 17自身抗体与白癜风的疾病严重程度有一定关系。 展开更多

关键词 前黑素小体蛋白17 原核表达 白癜风

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Semaphorin 3A过表达对H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响 被引量：2

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作者 王海芳 赵向绒 +5 位作者 霍雪萍 孙晶莹 武翔龙 牛银波 胡军 刘勤社 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1080-1085,共6页

目的:探讨semaphorin 3A(Sema 3A)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响。方法:构建Sema 3A过表达载体,以脂质体转染法转染HUVECs,过表达效果以qPCR和Western blot法验证;待测细胞以200μmol/L H_2O_2处理4 h;q... 目的:探讨semaphorin 3A(Sema 3A)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响。方法:构建Sema 3A过表达载体,以脂质体转染法转染HUVECs,过表达效果以qPCR和Western blot法验证;待测细胞以200μmol/L H_2O_2处理4 h;qPCR法检测炎性细胞因子水平;乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平以相应比色法检测;细胞活力以MTT法检测;流式细胞术检测细胞凋亡,凋亡相关蛋白cleaved caspase-3及Bcl-2水平以Western blot法检测。结果:Sema 3A过表达能显著增加H_2O_2诱导的HUVECs凋亡、炎性细胞因子分泌以及LDH和MDA含量,同时显著抑制SOD活性和细胞活力;Sema 3A对未经H_2O_2处理的HUVECs没有损伤效应,即其对HUVECs的损伤具有H_2O_2依赖性。结论:Sema 3A能显著加重H_2O_2诱导的HUVECs损伤,在氧化应激所致的内皮细胞损伤过程中发挥促进作用。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 SEMAPHORIN 3A 过氧化氢 人脐静脉内皮细胞

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禽流感病毒H5N1单克隆抗体的生物学特性鉴定 被引量：2

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作者 李静丽 张海祥 +3 位作者 冯杨萌 王光华 刘永年 胡军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期398-400,406,共4页

目的:探讨禽流感病毒单克隆抗体的生物学特性。方法:制备H5N1禽流感病毒的单克隆抗体,鉴定其亚型、效价、血凝抑制活性以及与其他亚型流感病毒的交叉反应性。免疫印迹方法验证单抗与H5N1抗原的结合,人体正常组织芯片的免疫组织化学染色... 目的:探讨禽流感病毒单克隆抗体的生物学特性。方法:制备H5N1禽流感病毒的单克隆抗体,鉴定其亚型、效价、血凝抑制活性以及与其他亚型流感病毒的交叉反应性。免疫印迹方法验证单抗与H5N1抗原的结合,人体正常组织芯片的免疫组织化学染色法观察单抗的组织学反应。结果:发现两株禽流感病毒H5N1的单抗(H5-32和H5-35)分别与人体的肾、胰腺组织存在阳性结合。结论:禽流感病毒H5N1与人体组织间可能存在某种关联,这或许可为禽流感病毒感染和致病研究提供参考。 展开更多

关键词 禽流感病毒 单克隆抗体 特性 鉴定

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Toll样受体4的活化抑制人表皮原代黑素细胞的黑素合成 被引量：2

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作者 孙丽君 孙晶莹 +4 位作者 霍雪萍 李亚萍 李元 谢鑫 胡军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1466-1470,共5页

目的探讨黑素细胞Toll样受体4(TLR4)的活化对黑素细胞黑素合成的影响。方法以原代培养的黑素细胞为研究对象,采用TLR4的激动剂脂多糖(LPS)刺激细胞,首先检测黑素含量的变化,其次用实时定量PCR和Western blot法检测前黑素体蛋白(Pmel17)... 目的探讨黑素细胞Toll样受体4(TLR4)的活化对黑素细胞黑素合成的影响。方法以原代培养的黑素细胞为研究对象,采用TLR4的激动剂脂多糖(LPS)刺激细胞,首先检测黑素含量的变化,其次用实时定量PCR和Western blot法检测前黑素体蛋白(Pmel17)、酪氨酸酶(TYR)、小眼畸形相关转录因子(MITF)的表达变化;最后用电镜观察黑素小体的变化。结果 LPS刺激细胞后,黑素含量明显减少,黑素合成相关蛋白Pmel17和TYR的表达降低,且这种变化依赖于MITF转录因子的调控,同时电镜结果显示黑素小体合成被抑制。结论 TLR4的活化降低黑素细胞的黑素合成,提示细菌的产物可以通过天然免疫影响黑素合成。 展开更多

关键词 TOLL样受体4 黑素细胞 黑素合成

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流式细胞术检测CD35表型对恶性肿瘤诊断的意义 被引量：2

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作者 张洁 张小艳 王歧山 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期506-507,共2页

目的:建立流式细胞术(FCM)检测恶性肿瘤患者血细胞上CD35分子表达的实验方法。方法:选择36例恶性肿瘤患者及25例健康人血标本,用流式细胞术(FCM)检测其红细胞、中性粒细胞及淋巴细胞上CD35的表达。结果:恶性肿瘤患者红细胞、中性粒细胞... 目的:建立流式细胞术(FCM)检测恶性肿瘤患者血细胞上CD35分子表达的实验方法。方法:选择36例恶性肿瘤患者及25例健康人血标本,用流式细胞术(FCM)检测其红细胞、中性粒细胞及淋巴细胞上CD35的表达。结果:恶性肿瘤患者红细胞、中性粒细胞、B淋巴细胞及CD4+T淋巴细胞上CD35的表达比健康人明显降低(P<0.01);而CD8+T淋巴细胞上CD35的表达比健康人明显升高(P<0.01)。结论:建立了FCM检测恶性肿瘤患者血细胞上CD35分子表达的实验方法。为恶性肿瘤的诊断、疗效观察及判断预后提供科学而先进的检测手段。 展开更多

关键词 流式细胞术 恶性肿瘤 CD35表型

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三聚氰胺偶联抗原制备及其免疫原性分析 被引量：1

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作者 赵彭花 张海祥 +9 位作者 李涛 王鑫 宋卫 刘海静 谢毅 霍雪萍 赵向绒 梁导艳 李元 胡军 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第13期329-333,共5页

探讨以2-氯-4,6-二胺-1,3,5-三嗪(CAAT)作为起始物,与6-氨基己酸(ACS)连接转化得到半抗原MelACS,再将其与牛血清白蛋白(BSA)偶联形成具有连接手臂的抗原BSA-ACS-Mel,用于单克隆抗体(m Ab)制备。经过液相色谱、Western blot及ELISA等抗... 探讨以2-氯-4,6-二胺-1,3,5-三嗪(CAAT)作为起始物,与6-氨基己酸(ACS)连接转化得到半抗原MelACS,再将其与牛血清白蛋白(BSA)偶联形成具有连接手臂的抗原BSA-ACS-Mel,用于单克隆抗体(m Ab)制备。经过液相色谱、Western blot及ELISA等抗原特性分析,证明半抗原Mel-ACS的转化效率达到了85.9%,且针对Mel特异性单抗获得率达到了42.9%,抗原BSA-ACS-Mel免疫原性较好,完全可以适用于三聚氰胺分子的特异性检测需要。这对其余小分子抗原的合成也起到一定的指导作用。 展开更多

关键词 三聚氰胺 抗原 单克隆抗体 免疫原性

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抗柯萨奇病毒A16型单克隆抗体的制备和应用 被引量：1

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作者 刘杨 赵向绒 +4 位作者 余鹏博 郭春艳 李研 赵彭花 胡军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期525-530,534,共7页

目的制备抗CA16病毒的特异性单克隆抗体,评价单克隆抗体在ELISA和细胞免疫化学染色中的作用,并利用单抗建立CA16快速检测胶体金免疫层析法并对其进行初步评价。方法 CA16病毒接种RD细胞大量培养,氯化铯密度梯度超速离心纯化病毒颗粒,透... 目的制备抗CA16病毒的特异性单克隆抗体,评价单克隆抗体在ELISA和细胞免疫化学染色中的作用,并利用单抗建立CA16快速检测胶体金免疫层析法并对其进行初步评价。方法 CA16病毒接种RD细胞大量培养,氯化铯密度梯度超速离心纯化病毒颗粒,透射电镜鉴定纯化产物。福尔马林灭活病毒颗粒后免疫Balb/c小鼠,利用细胞融合技术制备稳定分泌抗CA16单抗的杂交瘤细胞株。ELISA和免疫荧光试验分别对单抗特性进行分析。根据单抗反应特性,分析单抗在细胞ELISA、细胞免疫组化中的应用,并利用特异性抗CA16单抗建立CA16胶体金免疫层析快速检测法。结果氯化铯密度梯度离心纯化病毒颗粒电镜观察显示,病毒颗粒为二十面体立体对称球形结构,大小均匀。经免疫小鼠,获得1株稳定分泌抗CA16单克隆抗体的杂交瘤细胞株(mAb CA16-19),该单抗为IgG2a亚型,细胞免疫荧光表明,单抗与RD宿主细胞内的CA16病毒颗粒结合。细胞ELISA显示,随着病毒滴度增加吸光度也增加。细胞免疫化学染色分析表明,单抗可与CA16病毒感染的RD结合,而不与EV71感染RD细胞和正常RD细胞反应。因此,该单抗可用于细胞ELISA和细胞免疫化学染色。同时,依据前期制备的抗CA16单抗(mAb CA16-10),并结合此次制备的mAb CA16-19共同建立胶体金免疫层析试纸条,该试纸条不与EV71和柯萨奇病毒B型交叉反应,最低检测限为6.25×106.25TCID50/0.1 mL。结论利用氯化铯密度梯度离心纯化出CA16病毒颗粒,筛选出1株特异性抗CA16单抗,此株单抗可用于细胞免疫荧光试验、细胞ELISA和细胞免疫化学染色试验。并以单抗为原材料建立了CA16快速检测胶体金免疫层析法,为CA16病毒感染的快速诊断提供帮助。 展开更多

关键词 病毒纯化 单克隆抗体 胶体金免疫层析

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