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试论中医“益气生血,化瘀解毒”学说与现代肿瘤免疫的关系 被引量：11
1
作者 张宏方 白志超 +1 位作者 李文侠 刘洋 《辽宁中医杂志》 CAS 2020年第8期57-59,共3页
以中医的"气血关系"为理论基础,从"益气-生血""活血-助气"到"正气-免疫系统"的同一性为出发点,探讨了中医"益气生血,化瘀解毒"学说中的肿瘤免疫学思想。认为在中医的"益气生血... 以中医的"气血关系"为理论基础,从"益气-生血""活血-助气"到"正气-免疫系统"的同一性为出发点,探讨了中医"益气生血,化瘀解毒"学说中的肿瘤免疫学思想。认为在中医的"益气生血,化瘀解毒"学说中,贯穿着免疫防御、免疫稳定和免疫监视等免疫学功能的思想,也包括了免疫系统的理论体系,如人体中枢外周免疫器官、各种免疫细胞与免疫分子的思想内涵。文章从"虚瘀着久易成瘤"及肿瘤患者多发生免疫功能低下为切入点,通过对"益气生血,化瘀解毒"方药的研究资料分析,发现这类方药对肿瘤免疫功能具有调节或增强作用,更加说明了"益气生血,化瘀解毒"思想与现代肿瘤免疫关系密切。为丰富和发扬中医"益气-生血""益气-强卫"和"扶正-解癌毒"等理论,提供方法学借鉴和科学依据。 展开更多
关键词 中医药 “益气生血 化瘀解毒”学说 肿瘤免疫 中医药与免疫
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鲍曼不动杆菌通过活化血小板激活因子受体引起感染人支气管上皮细胞的氧化应激和细胞凋亡 被引量：7
2
作者 张怡敏 张宏方 +6 位作者 周雪宁 徐洋洋 王媛媛 叶峥嵘 史琳娜 环诚 寇静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期421-426,共6页
目的探讨血小板激活因子受体(PAFR)在鲍曼不动杆菌(A.baumannii)感染人支气管上皮(HBE)细胞过程中的作用。方法 HBE细胞分为对照组、银杏内酯B(GB)处理组、A.baumannii感染组、A.baumannii感染联合GB处理组。使用临床分离的A.baumannii... 目的探讨血小板激活因子受体(PAFR)在鲍曼不动杆菌(A.baumannii)感染人支气管上皮(HBE)细胞过程中的作用。方法 HBE细胞分为对照组、银杏内酯B(GB)处理组、A.baumannii感染组、A.baumannii感染联合GB处理组。使用临床分离的A.baumannii感染HBE细胞,GB处理组分别用1×10~3CFU/m L、1×10~5CFU/m L和1×10~7CFU/m L的A.baumannii感染HBE细胞,A.baumannii感染联合GB处理组则先用10μmol/L GB阻断PAFR活性而后进行1×10~3CFU/m L A.baumannii感染。采用Western blot法检测HBE细胞PAFR、磷酸化的Janus激酶1(p-JAK1)、磷酸化的信号转导子与转录激活子1(p-STAT1)的蛋白水平,使用CCK-8法检测细胞增殖能力,使用超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒检测各组细胞氧化应激水平;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)染色结合流式细胞术检测细胞凋亡。结果与对照组相比,A.baumannii感染的HBE细胞中PAFR蛋白水平显著升高,细胞活力显著下降,细胞内MDA水平和细胞凋亡明显增加,p-JAK1和p-STAT1蛋白水平增加。结论 A.baumannii感染的HBE细胞PAFR活化,激活JAK1/STAT1信号通路促进HBE细胞的氧化应激和细胞凋亡。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 血小板激活因子受体(PAFR) HBE细胞 银杏内酯B(ginkgolide B)
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抑制Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)通路加重鲍曼不动杆菌感染大鼠的炎症 被引量：7
3
作者 张怡敏 叶峥嵘 +6 位作者 周雪宁 张宏方 王媛媛 徐洋洋 史琳娜 环诚 寇静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期395-400,共6页
目的利用Toll样受体4(TLR4)抑制剂TAK-242处理大鼠,检测鲍曼不动杆菌(A.baumannii)感染过程中TLR4的作用。方法将健康雄性SD大鼠分为正常对照组、TAK-242处理组、A.baumannii接种组以及TAK-242和A.baumannii联合处理组。TAK-242处理组... 目的利用Toll样受体4(TLR4)抑制剂TAK-242处理大鼠,检测鲍曼不动杆菌(A.baumannii)感染过程中TLR4的作用。方法将健康雄性SD大鼠分为正常对照组、TAK-242处理组、A.baumannii接种组以及TAK-242和A.baumannii联合处理组。TAK-242处理组大鼠通过尾静脉注射TAK-242(1 mg/kg),感染大鼠通过气道接种方法接种A.baumannii。于接种后72 h,取肺组织匀浆后接种至LB培养基,进行肺组织细菌计数;HE染色观察肺组织炎症变化。收集支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA检测BALF中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平。分离外周血单个核细胞(PBMC),Western blot法检测PBMC中磷酸化核因子κBp65(p-NF-κBp65)的蛋白水平。结果免疫功能正常的大鼠感染A.baumannii 72 h后,肺内细菌基本被清除,而TAK-242处理的大鼠接种A.baumannii后,肺中细菌计数显著增加;正常大鼠感染后,肺部有轻微炎症,TAK-242处理的大鼠接种A.baumannii后肺部炎症较为明显;TAK-242处理的大鼠接种A.baumannii后,TNF-α和IL-6增加幅度小于正常感染组大鼠;正常大鼠感染A.baumannii 72 h后,PBMC中p-NF-κBp65蛋白水平升高,而经过TAK-242处理的大鼠感染后,PBMC中p-NF-κBp65的水平升高不明显。结论抑制TLR4/NF-κB通路引起大鼠A.baumannii感染加重。 展开更多
关键词 Toll样受体4(TLR4) 鲍曼不动杆菌(A.baumannii) TAK-242 核因子κB(NF-κB)
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小鼠鲍曼不动杆菌肺感染模型的制备 被引量：5
4
作者 张怡敏 周雪宁 +2 位作者 张宏方 环诚 叶峥嵘 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1392-1397,共6页
目的构建小鼠鲍曼不动杆菌(A.baumannii)诱导的肺炎模型,研究A.baumannii致病的分子机制。方法实验分为正常对照组、环磷酰胺预处理组、正常小鼠接种组和免疫缺陷小鼠接种组。利用免疫抑制剂环磷酰胺预处理实验雄性C57BL/6小鼠制备免疫... 目的构建小鼠鲍曼不动杆菌(A.baumannii)诱导的肺炎模型,研究A.baumannii致病的分子机制。方法实验分为正常对照组、环磷酰胺预处理组、正常小鼠接种组和免疫缺陷小鼠接种组。利用免疫抑制剂环磷酰胺预处理实验雄性C57BL/6小鼠制备免疫缺陷小鼠模型,使用临床重症监护病房(ICU)分离的A.baumannii制备新鲜菌液(1×108集落形成单位/m L),通过气道接种方法接种至小鼠,分别于接种后6、24、72 h,进行小鼠肺及肺泡灌洗液白细胞和中性粒细胞计数,HE染色观察肺组织炎症变化,ELISA检测试剂盒检测血清粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果免疫功能正常的小鼠感染A.baumannii72 h后,肺内细菌基本被清除,而免疫抑制剂处理的小鼠接种A.baumannii后,肺及血液中细菌计数持续增加;正常小鼠感染6 h后,体内白细胞计数和中性粒细胞升高,至72 h下降,而经过免疫抑制剂处理的小鼠感染后,肺及血液中白细胞计数和中性粒细胞持续升高;感染72 h后,免疫功能正常小鼠肺部有轻微炎症,免疫缺陷小鼠肺部炎症较为明显;正常小鼠感染6 h后,血清中上述细胞因子含量均增加,至72 h下降,而经过免疫抑制剂处理的小鼠感染后,肺及血液中上述细胞因子水平均持续升高。结论成功制备了A.baumannii诱导的小鼠肺部感染模型。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 肺炎 免疫抑制 获得性感染
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调衡方多糖佐助的树突状细胞肿瘤疫苗增强S180荷瘤小鼠免疫功能并抑制肿瘤生长 被引量：5
5
作者 张宏方 刘洋 +4 位作者 李文侠 谭芷芬 徐洋洋 王媛媛 张怡敏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期903-910,共8页
目的研究S180荷瘤小鼠经调衡方多糖(ThPP)佐助的树突状细胞(DC)疫苗的免疫治疗作用及其机制。方法获取小鼠骨髓源性细胞体外培养,经细胞因子与ThPP佐助为成熟的DC,观察ThPP对DC表面的CD80与CD86表达的影响。再以S180瘤细胞作为抗原刺激D... 目的研究S180荷瘤小鼠经调衡方多糖(ThPP)佐助的树突状细胞(DC)疫苗的免疫治疗作用及其机制。方法获取小鼠骨髓源性细胞体外培养,经细胞因子与ThPP佐助为成熟的DC,观察ThPP对DC表面的CD80与CD86表达的影响。再以S180瘤细胞作为抗原刺激DC使其成为DC肿瘤疫苗。将S180瘤细胞接种小鼠左前肢腋窝使成荷瘤模型,并按体质量将小鼠分为荷瘤空白组、环磷酰胺阳性对照组、ThPP与肿瘤坏死因子α(TNF-α)佐助的DC疫苗组,对荷瘤小鼠分别治疗于接种瘤细胞后第5天与第10天。于第12天处死荷瘤小鼠,称质量并观察抑瘤情况,分离培养腹腔巨噬细胞及免疫组织化学染色法测其CD11b、白细胞介素12(IL-12)的表达;用ELISA检测小鼠血清IL-12、TNF-α的水平;另外设置的4组荷瘤小鼠,按相同方法治疗后观察生存期。结果TNF-α组、ThPP组中的CD80、CD86表达量均高于空白对照组,ThPP组较明显。与荷瘤空白组比较,ThPP组、TNF-α组、阳性对照组的抑瘤率与生存期均显著延长。ThPP组小鼠血清IL-12、TNF-α水平高于环磷酰胺阳性对照组和荷瘤空白组,与TNF-α组类似。ThPP组巨噬细胞的CD11b表达量低于荷瘤空白组与环磷酰胺阳性对照组,而ThPP组巨噬细胞的IL-12表达量高于荷瘤空白组与环磷酰胺阳性对照组,与TNF-α组类似。结论ThPP佐助的DC肿瘤疫苗能抑制S180荷瘤小鼠的肿瘤生长,延长其生存期,与促进DC成熟增加IL-12、TNF-α分泌有关。 展开更多
关键词 调衡方多糖(ThPP) 树突状细胞(DC) 抑瘤率 细胞因子 巨噬细胞
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调衡方对Lewis肺癌荷瘤体巨噬细胞吞噬功能的影响 被引量：3
6
作者 张宏方 郑玉 +4 位作者 李文侠 刘洋 徐洋洋 王媛媛 张怡敏 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2020年第4期996-1003,共8页
目的研究调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠巨噬细胞形态、数量及活性的影响,探讨调衡方对荷瘤体巨噬细胞作用的免疫调节机制。方法将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于小鼠右腋皮下建转移肺癌模型;灌胃给药8 d后,从小鼠腹腔分离抽取巨噬细胞并培... 目的研究调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠巨噬细胞形态、数量及活性的影响,探讨调衡方对荷瘤体巨噬细胞作用的免疫调节机制。方法将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于小鼠右腋皮下建转移肺癌模型;灌胃给药8 d后,从小鼠腹腔分离抽取巨噬细胞并培养;调衡方各组巨噬细胞培养48 h后,在显微镜下观察活细胞的形态,墨汁吞噬试验以及金葡菌吞噬试验观察巨噬细胞的吞噬能力,细胞酶化学染色观察巨噬细胞胞内酸性磷酸酶的变化,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各培养组M?上清中IL-1、IL-6、TNF-α表达水平。结果调衡方小、中、大剂量各组巨噬细胞培养48 h后,与对照组比较,巨噬细胞体积显著增大,对墨汁和金葡菌的吞噬能力均显著提升,酸性磷酸酶的活性也明显增强,且能抑制炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α分泌,这均与给药浓度呈正相关。结论调衡方能增强巨噬细胞的吞噬功能,进而提高胞内酸性磷酸酶等的活性,通过抑制巨噬细胞分泌炎性因子(IL-1、IL-6、TNF-α)有控制巨噬细胞向M2型极化的可能,并减轻肿瘤浸润程度,降低肿瘤发展及转移,而发挥抗肿瘤免疫调节的作用。 展开更多
关键词 调衡方 LEWIS肺癌 荷瘤小鼠 巨噬细胞(Mφ) 免疫调节作用
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红景天苷通过上调闭合蛋白occludin表达抑制脓毒症大鼠脑水肿 被引量：2
7
作者 张怡敏 朱慧渊 +2 位作者 张宏方 林娜娜 訾浩毅 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2021年第6期665-669,共5页
目的:研究红景天苷(Sal)对实验性脓毒症大鼠脑水肿的影响及分子机制.方法:经股静脉注射脂多糖(LPS)制备大鼠脓毒症模型,红景天苷治疗组大鼠通过腹腔注射不同剂量的红景天苷治疗,利用ELISA方法检测血清和脑脊液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)... 目的:研究红景天苷(Sal)对实验性脓毒症大鼠脑水肿的影响及分子机制.方法:经股静脉注射脂多糖(LPS)制备大鼠脓毒症模型,红景天苷治疗组大鼠通过腹腔注射不同剂量的红景天苷治疗,利用ELISA方法检测血清和脑脊液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平,利用湿干比方法评估脑含水量,利用伊文思兰(EB)染色检测血脑屏障(BBB)的完整性,利用real time RT-PCR检测脑组织中紧密连接分子occludin mRNA的表达.结果:与正常对照组大鼠相比,脓毒症模型大鼠血清和脑脊液中TNF-α和MCP-1水平显著增加,脑含水量增加,BBB通透性增加,occludin mRNA表达下降.红景天苷处理可显著降低大鼠血清和脑脊液中TNF-α和MCP-1水平,降低脑含水量和BBB的通透性,同时增加脑组织中occludin mRNA表达.结论:红景天苷能够抑制大鼠神经炎症,并通过增加occludin表达维持血脑屏障的完整性,对脓毒症诱发的脑水肿一定的治疗效果. 展开更多
关键词 红景天苷 脑水肿 OCCLUDIN 血脑屏障 脓毒症 大鼠
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胱天蛋白酶1(caspase-1)抑制剂AC-YVAD-CMK抑制鲍曼不动杆菌诱导骨髓来源巨噬细胞IL-1β的分泌
8
作者 张怡敏 周雪宁 +2 位作者 张宏方 环诚 叶峥嵘 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1594-1599,共6页
目的探讨胱天蛋白酶1(caspase-1)特异性抑制剂AC-YVAD-CMK对鲍曼不动杆菌(A.baumannii)刺激骨髓来源巨噬细胞(BMDM)分泌白细胞介素1β(IL-1β)的影响。方法从C57BL/6小鼠分离培养BMDM,使用(1×103、1×105、1×107)菌落形... 目的探讨胱天蛋白酶1(caspase-1)特异性抑制剂AC-YVAD-CMK对鲍曼不动杆菌(A.baumannii)刺激骨髓来源巨噬细胞(BMDM)分泌白细胞介素1β(IL-1β)的影响。方法从C57BL/6小鼠分离培养BMDM,使用(1×103、1×105、1×107)菌落形成单位(CFU)/mL的A.baumannii刺激BMDM,ELISA检测培养上清中IL-1β的水平;分别利用实时定量PCR检测IL-1β前体(pro-IL-1β)的mRNA水平,Western blot法检测pro-IL-1β蛋白水平;使用AC-YVAD-CMK阻断caspase-1活性并检测培养上清中IL-1β的水平;使用A.baumannii接种预先给予环磷酰胺处理的小鼠,制备A.baumannii感染模型,给予AC-YVADCMK处理,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-1β的水平;HE染色观察A.baumannii感染小鼠肺组织损伤情况。结果A.baumannii刺激BMDM后,培养上清中IL-1β的水平增加,pro-IL-1βmRNA和蛋白表达无明显变化;使用AC-YVAD-CMK阻断caspase-1活性后,BMDM分泌IL-1β减少,A.baumannii接种的小鼠腹腔给予AC-YVAD-CMK处理,BALF中IL-1β的水平下降,其肺组织损伤程度减轻。结论 AC-YVAD-CMK通过减少A.baumannii感染BMDM分泌IL-1β减轻肺的病理损伤。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 白细胞介素1β(IL-1β) 骨髓来源的巨噬细胞 胱天蛋白酶1(caspase-1)
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