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农杆菌介导的Lyz-GFP基因对匍匐翦股颖Penn A-1转化和表达的研究
被引量：
7
1
作者
安惠惠
马晖玲
+2 位作者
李坚
白生军
马祥
《草业学报》
CSCD
北大核心
2012年第2期141-148,共8页
以匍匐翦股颖Penn A-1成熟胚为供试材料,建立了其植株高效再生体系。利用农杆菌介导法将溶菌酶与绿色荧光蛋白Lyz-GFP双元基因转入匍匐翦股颖Penn A-1胚性愈伤组织中,经培养获得抗病转基因植株。并对Lyz-GFP双元基因转化Penn A-1的适宜...
以匍匐翦股颖Penn A-1成熟胚为供试材料,建立了其植株高效再生体系。利用农杆菌介导法将溶菌酶与绿色荧光蛋白Lyz-GFP双元基因转入匍匐翦股颖Penn A-1胚性愈伤组织中,经培养获得抗病转基因植株。并对Lyz-GFP双元基因转化Penn A-1的适宜条件进行了研究。研究结果表明,在2.0mg/L 2,4-D+0.1mg/L 6-BA的MS培养基上Penn A-1愈伤组织诱导率最高,可达36%,且质量最好。愈伤组织在MSO+0.5mg/L NAA上分化率最高,达42.5%;浓度为300mg/L的头孢霉素(Cef)可抑制农杆菌LBA4404的生长;Penn A-1胚性愈伤组织经携有pBI121-Lyz-GFP的农杆菌LBA4404(OD600值0.3～0.5)侵染10～15min,共培养3d后,转化愈伤组织生长状况良好,转化率达12.5%,且在后期的生长和转化苗的再生中有良好的表现,转化苗再生率为27.5%;转化植株有较强的荧光表达量,并经PCR检测,获得的2株匍匐翦股颖Penn A-1转化植株中均扩增出750bp的目标基因片断。
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关键词
匍匐翦股颖
基因转化
溶菌酶Lyz基因
绿色荧光蛋白GFP基因
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职称材料
题名
农杆菌介导的Lyz-GFP基因对匍匐翦股颖Penn A-1转化和表达的研究
被引量：
7
1
作者
安惠惠
马晖玲
李坚
白生军
马祥
机构
草业生态系统教育部
重点
实验室
甘肃农业大学
甘肃省草业工程
实验室
中-美草地畜牧业可持续发展
研究
中心
陆地水循环及地表过程重点实验室、中国科学院地理科学与资源研究所
出处
《草业学报》
CSCD
北大核心
2012年第2期141-148,共8页
基金
草业生态系统教育部重点实验室(甘肃农业大学)开放课题(CYZS-2011-002)
甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室项目-匍匐翦股颖抗病转基因植株的选育(033160)资助
文摘
以匍匐翦股颖Penn A-1成熟胚为供试材料,建立了其植株高效再生体系。利用农杆菌介导法将溶菌酶与绿色荧光蛋白Lyz-GFP双元基因转入匍匐翦股颖Penn A-1胚性愈伤组织中,经培养获得抗病转基因植株。并对Lyz-GFP双元基因转化Penn A-1的适宜条件进行了研究。研究结果表明,在2.0mg/L 2,4-D+0.1mg/L 6-BA的MS培养基上Penn A-1愈伤组织诱导率最高,可达36%,且质量最好。愈伤组织在MSO+0.5mg/L NAA上分化率最高,达42.5%;浓度为300mg/L的头孢霉素(Cef)可抑制农杆菌LBA4404的生长;Penn A-1胚性愈伤组织经携有pBI121-Lyz-GFP的农杆菌LBA4404(OD600值0.3～0.5)侵染10～15min,共培养3d后,转化愈伤组织生长状况良好,转化率达12.5%,且在后期的生长和转化苗的再生中有良好的表现,转化苗再生率为27.5%;转化植株有较强的荧光表达量,并经PCR检测,获得的2株匍匐翦股颖Penn A-1转化植株中均扩增出750bp的目标基因片断。
关键词
匍匐翦股颖
基因转化
溶菌酶Lyz基因
绿色荧光蛋白GFP基因
Keywords
creeping bentgrass （Agrostis stolonifera）
gene transformation
lysozyme
green fluorescence pro-tein gene
分类号
S688.4 [农业科学—观赏园艺]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
农杆菌介导的Lyz-GFP基因对匍匐翦股颖Penn A-1转化和表达的研究
安惠惠
马晖玲
李坚
白生军
马祥
《草业学报》
CSCD
北大核心
2012
7
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