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DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及机制研究
1
作者
耿建慧
陈建
+6 位作者
张二龙
阳一栋
陈德伟
吴刚
王羽
赵文琦
高钰琪
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第8期731-739,共9页
目的 探讨DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary artery smooth muscle cells, RPASMCs)增殖中的作用及机制。方法 培养原代RPASMCs,采用3%O;缺氧处理细胞构建缺氧诱导细胞增殖模型。采用小干扰RNA(small interfering...
目的 探讨DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary artery smooth muscle cells, RPASMCs)增殖中的作用及机制。方法 培养原代RPASMCs,采用3%O;缺氧处理细胞构建缺氧诱导细胞增殖模型。采用小干扰RNA(small interfering RNA sequence, siRNA)敲低Dnase2a的表达,采用质粒过表达上调细胞中Dnase2a和Hif1a的表达。采用外源性加入线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)诱导细胞增殖,使用脯氨酸羟化酶抑制剂ROXA作为HIF-1α激动剂上调细胞中HIF-1α的表达。采用MTS法检测各组细胞增殖能力,实时荧光定量PCR法检测Dnase2a的mRNA表达,Western blot法检测DNase 2α、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和细胞周期蛋白(cell cycle protein D1,Cyclin D1)的表达。结果 缺氧可诱导RPASMCs增殖,并上调DNase 2α的表达(P<0.05)。siRNA可显著降低RPASMCs中Dnase2a的表达(P<0.05),并显著增强缺氧诱导的RPASMCs增殖(P<0.05),同时显著上调PCNA和Cyclin D1的蛋白表达(P<0.05)。过表达Dnase2a可显著上调RPASMCs中DNase 2α的表达(P<0.05),并显著抑制缺氧诱导RPASMCs增殖(P<0.05)。外源性加入mtDNA可诱导RPASMCs增殖,而过表达Dnase2a可显著抑制mtDNA诱导的RPASMCs增殖(P<0.05)。过表达Hif1a或使用脯氨酸羟化酶抑制剂ROXA可显著上调HIF-1α表达,并显著上调DNase 2α的蛋白表达(P<0.05)。结论 DNase 2α可抑制缺氧或线粒体DNA诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,缺氧诱导的DNase 2α表达上调与HIF-1α有关。
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关键词
DNase
2α
线粒体DNA
大鼠肺动脉平滑肌细胞
缺氧
增殖
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题名
DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及机制研究
1
作者
耿建慧
陈建
张二龙
阳一栋
陈德伟
吴刚
王羽
赵文琦
高钰琪
机构
陆军
军医大学
(
第三军医大学
)
高原
军事医学
系
:
高原
特需药品与器材研究室
陆军
军医大学
(
第三军医大学
)
高原
军事医学
系
:极端环境
医学
教育部重点实验室
陆军
军医大学
(
第三军医大学
)
高原
军事医学
系
:
高原
生理学
教研室
陆军
军医大学
(
第三军医大学
)
高原
军事医学
系
:病理
生理学
教研室
出处
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第8期731-739,共9页
基金
国家自然科学基金重点项目(81830062)。
文摘
目的 探讨DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary artery smooth muscle cells, RPASMCs)增殖中的作用及机制。方法 培养原代RPASMCs,采用3%O;缺氧处理细胞构建缺氧诱导细胞增殖模型。采用小干扰RNA(small interfering RNA sequence, siRNA)敲低Dnase2a的表达,采用质粒过表达上调细胞中Dnase2a和Hif1a的表达。采用外源性加入线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)诱导细胞增殖,使用脯氨酸羟化酶抑制剂ROXA作为HIF-1α激动剂上调细胞中HIF-1α的表达。采用MTS法检测各组细胞增殖能力,实时荧光定量PCR法检测Dnase2a的mRNA表达,Western blot法检测DNase 2α、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和细胞周期蛋白(cell cycle protein D1,Cyclin D1)的表达。结果 缺氧可诱导RPASMCs增殖,并上调DNase 2α的表达(P<0.05)。siRNA可显著降低RPASMCs中Dnase2a的表达(P<0.05),并显著增强缺氧诱导的RPASMCs增殖(P<0.05),同时显著上调PCNA和Cyclin D1的蛋白表达(P<0.05)。过表达Dnase2a可显著上调RPASMCs中DNase 2α的表达(P<0.05),并显著抑制缺氧诱导RPASMCs增殖(P<0.05)。外源性加入mtDNA可诱导RPASMCs增殖,而过表达Dnase2a可显著抑制mtDNA诱导的RPASMCs增殖(P<0.05)。过表达Hif1a或使用脯氨酸羟化酶抑制剂ROXA可显著上调HIF-1α表达,并显著上调DNase 2α的蛋白表达(P<0.05)。结论 DNase 2α可抑制缺氧或线粒体DNA诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,缺氧诱导的DNase 2α表达上调与HIF-1α有关。
关键词
DNase
2α
线粒体DNA
大鼠肺动脉平滑肌细胞
缺氧
增殖
Keywords
DNase 2α
mitochondrial DNA
rat pulmonary artery smooth muscle cells
hypoxia
proliferation
分类号
R322.121 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R345 [医药卫生—基础医学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
DNase 2α在缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及机制研究
耿建慧
陈建
张二龙
阳一栋
陈德伟
吴刚
王羽
赵文琦
高钰琪
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
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