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PCSK9在萝卜硫素改善棕榈酸诱导的肝细胞自噬流中的作用研究
1
作者
郭欣欣
杨济宁
+3 位作者
荆金金
李天佑
陈卡
糜漫天
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期1142-1151,共10页
目的探究萝卜硫素(sulforaphane,SFN)对肝细胞损伤及自噬的影响及机制。方法用200μmol/L棕榈酸(palmitic acid,PA)处理人正常肝细胞株(HHL5)24 h建立肝细胞损伤模型组(PA组),用5μmol/L的SFN与200μmol/L PA共同处理细胞24 h为实验组(P...
目的探究萝卜硫素(sulforaphane,SFN)对肝细胞损伤及自噬的影响及机制。方法用200μmol/L棕榈酸(palmitic acid,PA)处理人正常肝细胞株(HHL5)24 h建立肝细胞损伤模型组(PA组),用5μmol/L的SFN与200μmol/L PA共同处理细胞24 h为实验组(PA+SFN组),溶剂处理为对照组。CCK-8检测细胞增殖活力;CELLROXTM DEEP RED探针装载细胞后,流式细胞仪检测活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平;试剂盒检测细胞内丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平;qPCR检测炎症标志物IL-1β、TNF-α转录水平;蛋白免疫印迹检测自噬相关蛋白SQSTM1及LC3Ⅱ蛋白表达水平;提取细胞总RNA进行全基因转录组测序,分析数据筛选差异基因,并对差异基因进行KEGG通路富集分析;用PCSK9 siRNA转染HHL5细胞,qPCR检测PCSK9转录水平,流式细胞仪检测ROS水平,蛋白免疫印迹检测SQSTM1及LC3Ⅱ蛋白表达水平。结果相对于PA组,SFN干预后HHL5细胞增殖活力升高,MDA含量以及ROS水平降低;PA组SQSTM1、LC3Ⅱ蛋白表达升高,SFN干预后SQSTM1表达降低,LC3Ⅱ表达进一步升高;转录组数据分析发现差异基因主要富集于自噬通路,并筛选出目标基因PCSK9;相对于对照组,PA组的PCSK9转录水平升高,SFN干预后PCSK9转录水平降低;PA组在PCSK9敲降后,与未敲降的PA组比,细胞内ROS水平有所降低,和SFN降低ROS趋势一致,PCSK9敲降后自噬蛋白SQSTM1表达降低,LC3Ⅱ表达水平升高,和SFN恢复自噬流的趋势一致。结论SFN可以改善PA引起的肝细胞损伤,其机制可能与其抑制PCSK9转录从而调控自噬流有关。
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关键词
非酒精性脂肪肝
萝卜硫素
自噬
氧化应激
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职称材料
二氢杨梅素改善糖尿病心肌病小鼠心肌糖吸收与糖酵解作用
被引量：
3
2
作者
董妞
候鹏飞
+5 位作者
岳静
武璐婷
蒋玲
汪小兰
易龙
糜漫天
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第7期626-638,共13页
目的观察二氢杨梅素(dihydromyricetin,DHM)对糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)的改善效应,并探索其对心肌组织糖代谢的影响及作用机制。方法利用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导C57BL/6J小鼠建立DCM模型,实验分为...
目的观察二氢杨梅素(dihydromyricetin,DHM)对糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)的改善效应,并探索其对心肌组织糖代谢的影响及作用机制。方法利用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导C57BL/6J小鼠建立DCM模型,实验分为对照组(CON)、糖尿病心肌病组(DCM)、糖尿病心肌病加DHM干预组(DCM+DHM),每组15只,干预时间13周。小鼠处死前,检测超声心动图和葡萄糖耐量。处死后,检测心肌组织学(HE、透射电镜、Masson、Sirius Red染色)及血清生化指标,免疫荧光染色和qRT-PCR法检测心肌组织糖吸收和糖酵解相关基因和蛋白的表达水平,RNA-Seq技术检测分析心肌组织差异表达基因及其功能注释。结果与对照组比较,DCM组小鼠心脏收缩和舒张功能显著降低,心肌组织有炎性细胞浸润,心肌损伤血清学标志物CK、CK-MB、LDH显著升高(P<0.01),心肌纤维化明显,同时伴有纤维化相关分子TGF-β1、α-SMA、Timp mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01),糖脂代谢指标包括糖耐量、血糖、TC、TG、LDL-C、HDL-C异常(P<0.05,P<0.01)。DCM组小鼠心肌组织中葡萄糖吸收相关基因GLUT1、GLUT4及糖酵解相关基因HK1、HK2、PFK、LDH、PKM mRNA表达均较对照组显著降低(P<0.05)。DHM干预后,可以显著改善DCM小鼠心功能、心肌纤维化、心肌损伤及糖脂代谢异常,并促进心肌组织葡萄糖吸收与糖酵解相关基因mRNA和蛋白的表达。RNA-seq结果显示,DHM干预后多个代谢调节相关基因表达明显改变,其中差异表达基因NR4A1可能是DHM作用的潜在靶点。结论DHM改善DCM小鼠的心功能可能与改善心肌糖吸收和糖酵解密切相关。
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关键词
糖尿病心肌病
二氢杨梅素
糖代谢
糖吸收
糖酵解
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职称材料
题名
PCSK9在萝卜硫素改善棕榈酸诱导的肝细胞自噬流中的作用研究
1
作者
郭欣欣
杨济宁
荆金金
李天佑
陈卡
糜漫天
机构
陆军
军医大学
(
第三军医大学
)
营养
与食品安全
研究
中心
出处
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期1142-1151,共10页
基金
国家自然科学基金(82103820)。
文摘
目的探究萝卜硫素(sulforaphane,SFN)对肝细胞损伤及自噬的影响及机制。方法用200μmol/L棕榈酸(palmitic acid,PA)处理人正常肝细胞株(HHL5)24 h建立肝细胞损伤模型组(PA组),用5μmol/L的SFN与200μmol/L PA共同处理细胞24 h为实验组(PA+SFN组),溶剂处理为对照组。CCK-8检测细胞增殖活力;CELLROXTM DEEP RED探针装载细胞后,流式细胞仪检测活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平;试剂盒检测细胞内丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平;qPCR检测炎症标志物IL-1β、TNF-α转录水平;蛋白免疫印迹检测自噬相关蛋白SQSTM1及LC3Ⅱ蛋白表达水平;提取细胞总RNA进行全基因转录组测序,分析数据筛选差异基因,并对差异基因进行KEGG通路富集分析;用PCSK9 siRNA转染HHL5细胞,qPCR检测PCSK9转录水平,流式细胞仪检测ROS水平,蛋白免疫印迹检测SQSTM1及LC3Ⅱ蛋白表达水平。结果相对于PA组,SFN干预后HHL5细胞增殖活力升高,MDA含量以及ROS水平降低;PA组SQSTM1、LC3Ⅱ蛋白表达升高,SFN干预后SQSTM1表达降低,LC3Ⅱ表达进一步升高;转录组数据分析发现差异基因主要富集于自噬通路,并筛选出目标基因PCSK9;相对于对照组,PA组的PCSK9转录水平升高,SFN干预后PCSK9转录水平降低;PA组在PCSK9敲降后,与未敲降的PA组比,细胞内ROS水平有所降低,和SFN降低ROS趋势一致,PCSK9敲降后自噬蛋白SQSTM1表达降低,LC3Ⅱ表达水平升高,和SFN恢复自噬流的趋势一致。结论SFN可以改善PA引起的肝细胞损伤,其机制可能与其抑制PCSK9转录从而调控自噬流有关。
关键词
非酒精性脂肪肝
萝卜硫素
自噬
氧化应激
Keywords
nonalcoholic fatty liver disease
sulforaphane
autophagy
oxidative stress
分类号
R151.43 [医药卫生—营养与食品卫生学]
R322.47 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R394.2 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
二氢杨梅素改善糖尿病心肌病小鼠心肌糖吸收与糖酵解作用
被引量：
3
2
作者
董妞
候鹏飞
岳静
武璐婷
蒋玲
汪小兰
易龙
糜漫天
机构
陆军
军医大学
(
第三军医大学
)
营养
与食品安全
研究
中心
出处
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第7期626-638,共13页
基金
重庆市基础研究与前沿探索专项(cstc2020jcyj-msxmX0502)。
文摘
目的观察二氢杨梅素(dihydromyricetin,DHM)对糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)的改善效应,并探索其对心肌组织糖代谢的影响及作用机制。方法利用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导C57BL/6J小鼠建立DCM模型,实验分为对照组(CON)、糖尿病心肌病组(DCM)、糖尿病心肌病加DHM干预组(DCM+DHM),每组15只,干预时间13周。小鼠处死前,检测超声心动图和葡萄糖耐量。处死后,检测心肌组织学(HE、透射电镜、Masson、Sirius Red染色)及血清生化指标,免疫荧光染色和qRT-PCR法检测心肌组织糖吸收和糖酵解相关基因和蛋白的表达水平,RNA-Seq技术检测分析心肌组织差异表达基因及其功能注释。结果与对照组比较,DCM组小鼠心脏收缩和舒张功能显著降低,心肌组织有炎性细胞浸润,心肌损伤血清学标志物CK、CK-MB、LDH显著升高(P<0.01),心肌纤维化明显,同时伴有纤维化相关分子TGF-β1、α-SMA、Timp mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01),糖脂代谢指标包括糖耐量、血糖、TC、TG、LDL-C、HDL-C异常(P<0.05,P<0.01)。DCM组小鼠心肌组织中葡萄糖吸收相关基因GLUT1、GLUT4及糖酵解相关基因HK1、HK2、PFK、LDH、PKM mRNA表达均较对照组显著降低(P<0.05)。DHM干预后,可以显著改善DCM小鼠心功能、心肌纤维化、心肌损伤及糖脂代谢异常,并促进心肌组织葡萄糖吸收与糖酵解相关基因mRNA和蛋白的表达。RNA-seq结果显示,DHM干预后多个代谢调节相关基因表达明显改变,其中差异表达基因NR4A1可能是DHM作用的潜在靶点。结论DHM改善DCM小鼠的心功能可能与改善心肌糖吸收和糖酵解密切相关。
关键词
糖尿病心肌病
二氢杨梅素
糖代谢
糖吸收
糖酵解
Keywords
diabetic cardiomyopathy
dihydromyricetin
glucose metabolism
glucose absorption
glycolysis
分类号
R151.1 [医药卫生—营养与食品卫生学]
R542.21 [医药卫生—心血管疾病]
R587.2 [医药卫生—内分泌]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PCSK9在萝卜硫素改善棕榈酸诱导的肝细胞自噬流中的作用研究
郭欣欣
杨济宁
荆金金
李天佑
陈卡
糜漫天
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
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职称材料
2
二氢杨梅素改善糖尿病心肌病小鼠心肌糖吸收与糖酵解作用
董妞
候鹏飞
岳静
武璐婷
蒋玲
汪小兰
易龙
糜漫天
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
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