CYP3A酶突变类型与舒芬太尼代谢的性别差异研究 被引量：1

1

作者 蒋颖 秦志刚 +7 位作者 冯力元 刘冠磊 黎洁钰 刘先哲 李勇帅 陈妍 李鹏 顾健腾 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第6期581-590,共10页

目的 基于细胞色素P450 3A(cytochrome P450 3A,CYP3A)酶突变类型,探究舒芬太尼在中国患者体内药物代谢的性别差异。方法 将中国人群细胞色素P450 3A4基因*1G位点(cytochrome P450 3A4 gene*1G locus,CYP3A4*1G)和细胞色素P450 3A5基因*... 目的 基于细胞色素P450 3A(cytochrome P450 3A,CYP3A)酶突变类型,探究舒芬太尼在中国患者体内药物代谢的性别差异。方法 将中国人群细胞色素P450 3A4基因*1G位点(cytochrome P450 3A4 gene*1G locus,CYP3A4*1G)和细胞色素P450 3A5基因*3位点(cytochrome P4503A5 gene*3 locus,CYP3A5*3)突变组合可能导致的影响程度赋予不同权重,依据CYP3A酶突变程度将患者分为3类:Ⅰ类人群,CYP3A4*1G/*1G基因型或CYP3A4*1/*1G+CYP3A5*3/*3基因型;Ⅱ类人群,CYP3A4*1/*1G+CYP3A5*1/*3基因型;Ⅲ类人群,CYP3A4*1/*1基因型或CYP3A4*1/*1G+CYP3A5*1/*1基因型。研究采用单剂量、双盲、分层随机抽样设计,共纳入陆军军医大学第一附属医院255名腔镜手术患者,独立的统计学家根据术前基因检测结果将患者分类,采用分层随机抽样的方式从每类各抽取30人构成研究队列(每组男女比例1:1),并随机命名各组为A、B或C组。临床研究人员和受试者对分组结果、基因检测结果双盲。90名患者入室后接受单剂量舒芬太尼诱导,于给药前2 min和给药后2~120 min内共10个时间点采集血样。术后测定血浆药物浓度,计算药代动力学参数,比较同一群体内不同性别患者的药物代谢差异并揭盲。结果 队列符合二房室药代动力学模型,揭盲A、B、C组分别对应Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类人群。在不同CYP3A酶突变程度的患者群体内,女性各时间点的血药浓度-时间曲线均低于男性,女性的总清除率更高(P≤0.01),0~∞时的药时曲线下面积更小(P<0.05)。此外,Ⅰ类人群中女性的中央室消除速率和药物自中央室的分布速率较男性更大(P<0.05),男性的药物分布半衰期(P<0.05)和消除半衰期(P<0.01)更长。Ⅱ、Ⅲ类人群中男性的药时曲线下总面积均大于女性(P<0.05)。结论 舒芬太尼在中国患者体内的药物代谢具有性别差异,女性体内舒芬太尼分布与消除均快于男性,男性患者体内的药物暴露程度更高。术前CYP3A酶基因分型及术中个体化用药对于保障临床用药安全具有重要意义。 展开更多

关键词 性别差异 CYP3A 舒芬太尼 药物代谢 基因突变

在线阅读 下载PDF 职称材料

Siglec-E影响小白菊内酯靶向MAPK/NF-κB通路抑制小胶质细胞M1极化 被引量：2

2

作者 付文莹 王鹏博 +3 位作者 唐翔宇 冯力元 黄钰婷 李鹏 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期651-660,共10页

目的探讨唾液酸结合样凝集素E(sialic acid binding lectin E,Siglec-E)对小白菊内酯(parthenolide,PTL)抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠小胶质细胞(BV2)M1极化作用的影响。方法①从基因表达综合数据库(Gene Expression O... 目的探讨唾液酸结合样凝集素E(sialic acid binding lectin E,Siglec-E)对小白菊内酯(parthenolide,PTL)抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠小胶质细胞(BV2)M1极化作用的影响。方法①从基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)获取Siglece相关小鼠脑组织单细胞测序数据,分为野生型组(WT,n=3)和敲除型组(Siglece^(-/-),n=4)。从中筛选出小胶质细胞并分析相关差异基因及通路富集。通过shRNA干扰技术构建BV2细胞株模型,得到NC-shRNA BV2和Siglece-shRNA BV2细胞并检测Siglec-E(Siglece)表达水平。②将NC-shRNA和Siglece-shRNA细胞分别分为Control组、LPS组、PTL组和PTL+LPS组(n=3),采用RT-qPCR检测小胶质细胞M1极化标志物iNOS、IL-1β和IL-6的mRNA水平。将Siglece^(fl/fl)和Cx3cr1^(cre)小鼠交配,获得小胶质细胞特异性Siglec-E缺失(Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre))小鼠,并建立LPS诱导的神经炎症模型。③将出生4 d的各9只WT和Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre)雄鼠分成Control组、LPS组和PTL+LPS组(n=3)。采用RT-qPCR、免疫荧光技术和Western blot验证敲除效果以及极化相关通路,研究Siglec-E影响PTL抑制小胶质细胞M1极化的机制。结果与NC-shRNA组比较,Siglece-shRNA组中Siglec-E表达显著降低(P<0.01),说明SiglecE敲除细胞模型建立成功。在LPS刺激的条件下,与Control组比较,NC-shRNA细胞和Siglece-shRNA细胞的iNOS、IL-1β和IL-6的mRNA水平均显著上调(P<0.01)。PTL与LPS共同作用下,NC-shRNA细胞中上述M1极化的标志物均明显下降(P<0.05)。而对于Siglece-shRNA细胞,上述M1极化的标志物无显著下调。PTL对BV2细胞JNK、IκB蛋白的磷酸化具有抑制作用(P<0.01),也可抑制NF-κB核转位,而下调Siglec-E则会减弱该作用。与WT组小鼠比较,Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre)小鼠小胶质细胞Siglec-E表达显著降低(P<0.01),PTL对Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre)小鼠小胶质细胞NF-κB磷酸化水平的抑制作用也降低。结论小胶质细胞Siglec-E缺失会减弱PTL靶向MAPK/NF-κB通路对其M1极化的抑制作用。 展开更多

关键词 唾液酸结合样凝集素E 小胶质细胞 小白菊内酯 M1极化

在线阅读 下载PDF 职称材料

右美托咪定对急性肾损伤继发肺损伤的修复功用

3

作者 黎洁钰 秦志刚 +4 位作者 薛正威 刘祥凤 江玲 李鹏 顾健腾 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期66-72,共7页

目的探讨右美托咪定(Dexmedetomidine,Dex)对急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)继发肺损伤的修复功用。方法将75只6~8周龄健康SPF级雄性C57BL/6J小鼠(体质量20~22 g)随机分为:假手术(Sham)组,常规行开腹关腹手术;肾缺血再灌注(RIR)组... 目的探讨右美托咪定(Dexmedetomidine,Dex)对急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)继发肺损伤的修复功用。方法将75只6~8周龄健康SPF级雄性C57BL/6J小鼠(体质量20~22 g)随机分为:假手术(Sham)组,常规行开腹关腹手术;肾缺血再灌注(RIR)组,双侧肾蒂夹闭50 min后再灌注;Dex预处理(Dex+RIR)组,双侧肾蒂夹闭前15 min经腹腔注射Dex(25μg/kg)。各组于造模后24、48、72、96、120 h(n=5),收集肺组织、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)、颈动脉血。观察并比较各组不同时间点肺组织损伤程度及修复情况、动脉血氧分压(PaO_(2))、肺泡灌洗液转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)含量。反转录实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time RT-PCR,RT-qPCR)检测肺组织白细胞介素-6(IL-6)、肺表面活性蛋白C(surfactant protein C,SP-C)转录水平。结果与Sham组比较,AKI后48 h内,RIR组和Dex+RIR组肺损伤评分升高、PaO_(2)降低,但Dex+RIR组肺损伤评分及PaO_(2)水平均优于RIR组;AKI后96 h内RIR组肺损伤评分维持高水平,PaO_(2)维持低水平,而Dex+RIR组肺损伤评分和PaO_(2)于48 h后出现持续好转。AKI后RIR组肺泡灌洗液TGF-β1和CTGF以及肺组织IL-6转录水平呈现出由高水平向低水平变化的趋势,但均显著高于Sham组(P<0.05),Dex干预使24~120 h时间点TGF-β1显著降低(P<0.01),24~72 h IL-6转录水平显著降低(P<0.05),而CTGF呈上升趋势并于48~96 h维持较高水平;AKI后RIR组SP-C转录水平在24 h显著上调(与Sham组比较,P<0.001),48~120 h大幅下降至低水平(与RIR组24 h比较,P<0.05),而Dex可改善此种AKI所致的SP-C转录抑制现象。结论Dex可改善急性肾损伤继发肺损伤后肺换气功能,并将肺损伤修复时间窗从96~120 h提前至48~72 h。 展开更多

关键词 右美托咪定 肾缺血再灌注 急性肺损伤 修复

在线阅读 下载PDF 职称材料

沙蟾毒精激活Rho A/ROCK1信号通路诱导急性白血病细胞凋亡的分子机制研究 被引量：3

4

作者 李志强 姜秀星 +3 位作者 胡金娇 丁鑫 雷令 高宁 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期700-710,共11页

目的研究沙蟾毒精(arenobufagin,ARE)对急性白血病细胞的凋亡诱导作用及可能的分子机制。方法急性白血病细胞Jurkat和MV-4-11经不同浓度(0、10、20、40、80 nmol/L)ARE作用24 h,80 nmol/L ARE作用不同时间(0、6、12、18、24 h)或ROCK1... 目的研究沙蟾毒精(arenobufagin,ARE)对急性白血病细胞的凋亡诱导作用及可能的分子机制。方法急性白血病细胞Jurkat和MV-4-11经不同浓度(0、10、20、40、80 nmol/L)ARE作用24 h,80 nmol/L ARE作用不同时间(0、6、12、18、24 h)或ROCK1抑制剂Y-27632(20μmon/L)预处理1 h后80 nmol/L ARE作用24 h,采用MTT检测ARE抑制急性白血病细胞增殖的能力;采用流式细胞术检测ARE诱导急性白血病细胞凋亡的能力;采用Western blot和CoIP实验检测急性白血病细胞经ARE作用后细胞中凋亡相关蛋白和Rho A/ROCK1信号通路相关蛋白的变化情况。结果ARE对Jurkat和MV-4-11细胞的抑制增殖作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.01),对Jurkat和MV-4-11细胞凋亡诱导作用亦呈剂量和时间依赖性(P<0.01);Western blot检测结果显示:ARE可激活ROCK1信号通路,促进BAX移位至线粒体,Cytochrome c(Cyto c)和AIF由线粒体释放入细胞质,增加Caspase 3和Caspase 7剪切激活,增加PARP1剪切,并减少XIAP表达,其上述作用具有剂量依赖性和时间依赖性(P<0.01);使用Y-27632抑制ROCK1信号通路可明显阻断ARE诱导的BAX移位至线粒体、Cyto c和AIF向细胞质的释放、Caspase 3和Caspase 7的剪切激活、PARP1的剪切、XIAP表达的下调以及细胞凋亡(P<0.01)。结论ARE通过激活Rho A/ROCK1信号通路有效诱导急性白血病细胞(Jurkat、MV-4-11)发生凋亡。 展开更多

关键词 沙蟾毒精 急性白血病 Rho因子相关激酶1 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

粉防己碱增敏长春新碱通过MAPK信号通路诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡的分子机制研究 被引量：3

5

作者 雷令 姜秀星 +3 位作者 王雁 丁鑫 李志强 高宁 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期691-699,共9页

目的阐明粉防己碱(tetrandrine)增敏长春新碱(vincristine)诱导胃癌SGC-7901/VCR细胞凋亡的分子机制。方法用不同浓度(0、2、4、6、8μmol/L)粉防己碱及不同浓度(0、50、100、150、200 nmol/L)长春新碱单用或联用处理SGC-7901/VCR细胞48... 目的阐明粉防己碱(tetrandrine)增敏长春新碱(vincristine)诱导胃癌SGC-7901/VCR细胞凋亡的分子机制。方法用不同浓度(0、2、4、6、8μmol/L)粉防己碱及不同浓度(0、50、100、150、200 nmol/L)长春新碱单用或联用处理SGC-7901/VCR细胞48 h,MTT实验检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡。Western blot检测细胞凋亡相关蛋白PARP-1、cleaved-Caspase 9、cleaved-Caspase 3、Bcl-2及MAPK信号通路相关蛋白P38、p-P38、JNK、p-JNK、ERK、p-ERK的表达。应用p38-MAPK抑制剂SB203580、JNK-MAPK抑制剂SP600125或ERK-MAPK抑制剂PD98059预处理SGC-7901/VCR细胞2 h,再以粉防己碱联用长春新碱处理48 h,测定细胞凋亡及相关蛋白表达。粉防己碱及长春新碱单用或联用处理SGC-7901/VCR细胞24 h,流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测细胞周期相关蛋白CDC2、p-CDC2的表达。结果粉防己碱联用长春新碱导致SGC-7901/VCR细胞增殖活力以剂量依赖的方式下降,联合作用效果为协同。联合用药导致细胞凋亡显著增加(P<0.05),与PARP剪切激活及Caspase 9、Caspase 3裂解激活有关。联合用药增强细胞MAPK信号通路p-P38和p-JNK表达,减弱p-ERK表达,应用p38-MAPK或JNK-MAPK通路抑制剂预处理SGC-7901/VCR细胞后减弱联合用药诱导凋亡的作用(P<0.05),而应用ERK-MAPK通路抑制剂预处理后增强联合用药诱导凋亡的作用(P<0.05)。联合用药导致SGC-7901/VCR细胞S/G_(2)周期阻滞(P<0.05)。结论粉防己碱增敏长春新碱抑制细胞增殖并诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡,MAPK信号通路可能在诱导细胞凋亡中起关键作用。 展开更多

关键词 粉防己碱 长春新碱 SGC-7901/VCR细胞 细胞凋亡 MAPK

在线阅读 下载PDF 职称材料

奥普佐米协同三氧化二砷抑制急性早幼粒白血病细胞增殖的分子机制 被引量：2

6

作者 丁鑫 姜秀星 +2 位作者 李志强 雷令 高宁 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期329-336,355,共9页

目的探讨奥普佐米协同三氧化二砷抑制急性早幼粒白血病细胞增殖分子机制。方法 MTT法检测不同联合用药对急性早幼粒白血病NB4、HL-60细胞存活率的影响:(1)梯度浓度三氧化二砷(NB4细胞:0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μmol/L;HL-60细胞:0、... 目的探讨奥普佐米协同三氧化二砷抑制急性早幼粒白血病细胞增殖分子机制。方法 MTT法检测不同联合用药对急性早幼粒白血病NB4、HL-60细胞存活率的影响:(1)梯度浓度三氧化二砷(NB4细胞:0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μmol/L;HL-60细胞:0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0μmol/L)单用或与固定浓度奥普佐米(NB4细胞:40 nmol/L;HL-60细胞:160 nmol/L)联用;(2)梯度浓度奥普佐米(NB4细胞:0、5、10、20、40 nmol/L;HL-60细胞:0、40、80、120、160、200 nmol/L)单用或与固定浓度三氧化二砷(NB4细胞:0.4μmol/L;HL-60细胞:1.2μmol/L)联用;(3)单独或联合用药作用不同时间(12、24、48 h);(4)相同浓度的硼替佐米或奥普佐米分别与梯度浓度三氧化二砷联用。单独用药或联合用药或用NAC预处理后,流式细胞仪检测细胞凋亡及ROS生成量;Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved-Caspase 3、cleaved-Caspase 9、PARP-1及融合基因蛋白PML-RARA的表达。结果与单用组比较,奥普佐米与三氧化二砷联用后,NB4、HL-60细胞存活率显著降低(P<0.01),呈剂量和时间依赖性,并具有明显的协同作用,协同系数小于1。联合用药可使约80%的NB4细胞ROS水平明显升高,融合蛋白PML-RARA表达降低,细胞凋亡率增加约70%(P<0.01);与联合用药组比较,ROS抑制剂NAC预处理后,细胞凋亡减少约41%(P<0.01),PML-RARA的表达升高。结论奥普佐米协同三氧化二砷诱导急性早幼粒白血病细胞ROS生成,并导致PML-RARA蛋白表达降低,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 奥普佐米 急性早幼粒细胞白血病 PML-RARA ROS 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

千金藤素增敏多柔比星抑制三阴性乳腺癌细胞增殖活性的机制研究 被引量：10

7

作者 张岩昊 胡金娇 高宁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第22期2229-2237,共9页

目的探讨千金藤素增敏多柔比星抑制三阴性乳腺癌细胞增殖活性的机制。方法 MTT比色法测定不同浓度单用千金藤素(2、4、6、8、10μmol/L)或多柔比星(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μmol/L)及两者联合用药(千金藤素固定4μmol/L,多柔比星固定0.... 目的探讨千金藤素增敏多柔比星抑制三阴性乳腺癌细胞增殖活性的机制。方法 MTT比色法测定不同浓度单用千金藤素(2、4、6、8、10μmol/L)或多柔比星(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μmol/L)及两者联合用药(千金藤素固定4μmol/L,多柔比星固定0.5μmol/L)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231和MDA-MB-468增殖的影响;流式细胞仪检测单用千金藤素或多柔比星及联合用药对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231和MDA-MB-468凋亡的影响,以及对MDA-MB-231细胞内活性氧产生的影响;Western blot检测联合用药对细胞凋亡关键蛋白表达的影响;JC-1探针检测药物对线粒体膜电位的影响,激光共聚焦显微镜和透射电镜观察联合用药对细胞内线粒体形态和线粒体自噬体的影响。结果与单用多柔比星或千金藤素相比,联用千金藤素和多柔比星可明显抑制MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞增殖(P<0.01),并且呈现协同效应(协同系数小于1);明显诱导MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞凋亡(P<0.01),PARP-1剪切激活,Caspase 3激活,细胞色素C释放到细胞质,并且导致线粒体膜电位下降和线粒体自噬体的大量堆积,以及细胞内活性氧的大量产生(P<0.01)。结论千金藤素与多柔比星联用可引起三阴性乳腺癌细胞内活性氧大量产生和线粒体自噬体的堆积,导致线粒体损伤,进而诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 千金藤素 多柔比星 三阴性乳腺癌 线粒体自噬 氧化应激 细胞增殖 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

内源性过表达Nestin对NIH3T3细胞增殖、迁移及MAPK信号传导通路的影响 被引量：5

8

作者 黄玉婷 董金玲 +1 位作者 冯力元 李鹏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期125-132,共8页

目的通过在成纤维细胞NIH3T3中内源性过表达巢蛋白(Nestin),研究其对细胞增殖、迁移及转化生长因子(TGF-β1)作用下细胞胶原蛋白表达与MAPK相关通路的影响。方法通过CRISPR/SAM技术构建内源性过表达Nestin的细胞株,用MTS实验、Western b... 目的通过在成纤维细胞NIH3T3中内源性过表达巢蛋白(Nestin),研究其对细胞增殖、迁移及转化生长因子(TGF-β1)作用下细胞胶原蛋白表达与MAPK相关通路的影响。方法通过CRISPR/SAM技术构建内源性过表达Nestin的细胞株,用MTS实验、Western blot检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,经qPCR、Western blot与免疫荧光染色明确TGF-β1对其胶原蛋白与MAPK通路的影响。结果 CRISPR/SAM技术能使内源性Nestin表达显著提高(P<0.05),而内源性过表达Nestin对NIH3T3细胞的生长、迁移有明显促进作用(P<0.05),对TGF-β1诱导的胶原蛋白表达及MAPK的激活也有明显的抑制效应(P<0.01)。结论用CRISPR/SAM技术内源性过表达Nestin可以明显促进NIH3T3细胞的生长和迁移,但却抑制TGF-β1诱导下胶原蛋白的表达及MAPK的激活。 展开更多

关键词 NESTIN NIH3T3 CRISPR/SAM 增殖 迁移 MAPK

在线阅读 下载PDF 职称材料

CYP3A4、CYP3A5基因多态性对患者腹腔镜术后舒芬太尼自控静脉镇痛的影响 被引量：3

9

作者 古丽 周莉 +6 位作者 李勇帅 冯力元 陈星同 刘祥凤 全俊先 李鹏 顾健腾 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期930-934,共5页

目的探索不同CYP3A4和CYP3A5基因型患者腹腔镜术后舒芬太尼自控静脉镇痛(patient-control intravenous analgesia,PCIA)的差异。方法据CYP3A4、CYP3A5基因型将人群分为Ⅰ类(CYP3A4纯合突变,或CYP3A4杂合突变合并CYP3A5纯合突变)、Ⅱ类(C... 目的探索不同CYP3A4和CYP3A5基因型患者腹腔镜术后舒芬太尼自控静脉镇痛(patient-control intravenous analgesia,PCIA)的差异。方法据CYP3A4、CYP3A5基因型将人群分为Ⅰ类(CYP3A4纯合突变,或CYP3A4杂合突变合并CYP3A5纯合突变)、Ⅱ类(CYP3A4杂合突变合并CYP3A5杂合突变)、Ⅲ类(CYP3A4野生型,或CYP3A4杂合突变合并CYP3A5野生型)。纳入2020年11月至2021年9月我院普外科和泌尿外科腹腔镜手术患者行观察性研究,于麻醉术前评估时采集患者口腔拭子行CYP3A4和CYP3A5基因检测,据其基因型并按男女1∶1比例,采用随机信封法和盲法分为A、B、C 3组,每组纳入30例患者,每组基因型待数据收集完毕并统计分析后,进行两次揭盲公布。3组患者术后均接受舒芬太尼PCIA。收集患者术后12、24和48 h的视觉模拟镇痛评分、Ramsay镇静评分、舒芬太尼累积用量、镇痛泵按压次数、恶心呕吐发生率等情况并进行分析。结果共采集口腔拭子标本256份,纳入A、B、C组的病例分别有23、24和27例完成本研究。数据采集完毕并统计分析后,公开A、B、C 3组患者基因型类型分别对应Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类人群。与A组比较,术后12 h时C组患者Ramsay评分显著升高(P<0.05),术后24、48 h时Ramsay评分3组间差异均无统计学意义。3类人群术后12、24、48 h的VAS评分、舒芬太尼用量、镇痛泵按压次数、恶心呕吐发生率差异均无统计学意义。结论CYP3A4、CYP3A5基因多态性对腹腔镜手术后用舒芬太尼行术后PCIA无明显影响。 展开更多

关键词 CYP3A4 CYP3A5 基因多态性 舒芬太尼 自控镇痛

在线阅读 下载PDF 职称材料

双硫仑/铜复合物通过Drp1去磷酸化和线粒体转位抑制肝癌细胞增殖并诱导细胞凋亡 被引量：1

10

作者 黎婕 胡金娇 +1 位作者 姜秀星 高宁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第23期2302-2310,共9页

目的研究双硫仑/铜复合物二乙基二硫代氨基甲酸铜[copper(Ⅱ)diethyldithiocarbamate,CuET]对肝癌细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法用不同浓度(0、0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、2.00μmol/L)的CuET处理,CuET(2.00μmol/L... 目的研究双硫仑/铜复合物二乙基二硫代氨基甲酸铜[copper(Ⅱ)diethyldithiocarbamate,CuET]对肝癌细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法用不同浓度(0、0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、2.00μmol/L)的CuET处理,CuET(2.00μmol/L)作用不同时间(0、3、6、9、12、24 h)或Drp1线粒体转位的选择性抑制剂Mdivi-1(1.00μmol/L)预处理肝癌细胞HepG2、SMMC-7721后,MTT实验检测细胞存活率,软琼脂克隆形成实验确定集落形成,流式细胞术分析细胞凋亡,激光共聚焦检测Drp1线粒体转位,Western blot检测细胞凋亡的相关蛋白cleaved-Caspase 9、cleaved-Caspase 3、cleaved-PARP1、细胞色素C(cytochrome C,cyto C),以及线粒体分裂蛋白phospho-Drp1(S637)、phospho-Drp1(S616)和Drp1的表达。结果CuET对HepG2和SMMC-7721细胞增殖和集落形成的抑制作用呈剂量依赖性(P<0.01);对HepG2和SMMC-7721细胞凋亡诱导作用也有明显的剂量和时间依赖性(P<0.01);Western blot检测结果显示,CuET可导致Caspase 3和Caspase 9的裂解激活,PARP的降解激活以及cyto C从线粒体向细胞质的释放。CuET处理可导致Drp1(S637)去磷酸化和Drp1线粒体转位。细胞经Mdivi-1预处理后可明显阻断CuET诱导的Drp1线粒体转位、Caspase 3的裂解/激活、cyto C的释放以及细胞凋亡。结论双硫仑/铜复合物通过Drp1去磷酸化和线粒体转位抑制肝癌细胞增殖并诱导细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 双硫仑 二乙基二硫代氨基甲酸铜 肝癌 细胞凋亡 线粒体动力相关蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠急性肾损伤致远端肺凋亡和程序性坏死的时程变化 被引量：1

11

作者 杨子恒 秦志刚 +4 位作者 黎洁钰 刘祥凤 李翼容 李鹏 顾健腾 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第20期2098-2104,共7页

目的探索小鼠急性肾损伤致远端肺损伤过程中,肺部细胞凋亡和程序性坏死随时间的变化规律。方法30只8周龄雄性C57BL/6J小鼠(体质量20~22 g)按照随机数字表法平均分为6组(n=5):假手术(Sham)组,行开腹关腹手术;肾缺血再灌注(RI/r)6、12、24... 目的探索小鼠急性肾损伤致远端肺损伤过程中,肺部细胞凋亡和程序性坏死随时间的变化规律。方法30只8周龄雄性C57BL/6J小鼠(体质量20~22 g)按照随机数字表法平均分为6组(n=5):假手术(Sham)组,行开腹关腹手术;肾缺血再灌注(RI/r)6、12、24、36、48 h组,双肾夹闭缺血50 min后,再分别灌注6、12、24、36、48 h。HE染色评估肺组织损伤;专用试剂盒测定血清中肌酐(creatinine,Cr)及尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)浓度;TUNEL检测肺细胞凋亡;免疫荧光染色检测磷酸化混合系列蛋白激酶样结构域蛋白(phosphorylation mixed lineage kinase domain like protein,p-MLKL);Western Blot检测磷酸化受体相互作用蛋白激酶1(phosphorylation receptor-interacting protein 1,p-RIP1)、p-MLKL和cleaved Caspase-3。结果肾缺血再灌注后24 h内,小鼠血清Cr、BUN水平与肺组织HE染色病理损伤评分随时间延长逐渐升高,肾功能损伤程度与肺损伤程度呈正相关;肺组织凋亡阳性细胞和cleaved Caspase-3表达水平随时间延长逐渐增多。与Sham组比较,RI/r12、24、36、48 h组小鼠肺组织凋亡细胞显著增多(P<0.05),RI/r24、36、48 h组cleaved Caspase-3表达水平显著增高(P<0.05);p-MLKL和p-RIP1表达随时间延长逐渐增多,再灌注36 h时p-MLKL达到峰值之后下降。结论肾缺血再灌注48 h内,肺损伤逐渐加重,肺细胞凋亡持续增加,程序性坏死于36 h达峰后减少。 展开更多

关键词 肾缺血再灌注 急性肺损伤 凋亡 程序性坏死

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同浓度右美托咪定对大鼠心脏死亡后供体肾脏的影响

12

作者 刘祥凤 薛正威 +5 位作者 秦志刚 黎洁钰 李翼容 陈林 李鹏 顾健腾 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第20期2179-2188,共10页

目的实验比较不同浓度右美托咪定(Dexmedetomidine,Dex)对大鼠心脏死亡后供体(donation after circulatory death,DCD)静态冷藏期肾脏的保护作用,从而探讨Dex适宜剂量。方法将40只雄性SD大鼠随机分为(n=5):对照组(NC组)、模型组(0 nmol/... 目的实验比较不同浓度右美托咪定(Dexmedetomidine,Dex)对大鼠心脏死亡后供体(donation after circulatory death,DCD)静态冷藏期肾脏的保护作用,从而探讨Dex适宜剂量。方法将40只雄性SD大鼠随机分为(n=5):对照组(NC组)、模型组(0 nmol/L Dex组)和6个不同浓度Dex组(0.1、1、10、100、1000、10000 nmol/L Dex组)。大鼠麻醉和肝素化后放血法处死。热缺血30 min时:NC组灌注等体积的生理盐水,摘取肾脏、固定、-80℃保存;其余按分组浓度灌注含Dex的威斯康星大学器官保存液(University of Wisconsin solution,UW液),摘取肾脏、并置于相应保存液4℃保存24 h模拟供肾静态冷藏。光镜观察肾组织形态学变化,免疫组化法测定Caspase-3和肾组织损伤因子1(kidney injury molecule-1,KIM-1)的表达水平,比色法测定NAG活力,羟胺法测定T-SOD活力、TBA法测定MDA含量,RT-qPCR检测炎症相关因子IL-6、TNF-α的mRNA扩增水平。结果(1)与NC组比较:0 nmol/L Dex组肾损伤评分、Caspase-3和KIM-1水平、NAG活力、MDA含量和IL-6 mRNA扩增水平增加,T-SOD活力降低(P<0.05)。(2)与0 nmol/L Dex组比较:100、1000 nmol/L Dex组肾损伤评分显著降低[(1.33±0.26)分、(1.30±0.16)分vs(2.14±0.34)分,P<0.05)];1、10、100、1000 nmol/L Dex组KIM-1的表达水平降低(P<0.05);100、1000 nmol/L Dex组NAG活力下降(P<0.05),Caspase-3表达水平降低(P<0.05);1、10、100、1000、10000 nmol/L Dex组MDA表达量降低(P<0.05);0.1、1、10、100、1000 nmol/L Dex组IL-6的mRNA水平降低(P<0.05);0.1、1、10、100、1000、10000 nmol/L Dex组TNF-α的mRNA水平降低(P<0.05)。(3)与0.1 nmol/L Dex组比较:100、1000 nmol/L Dex组KIM-1的表达水平显著降低[(0.19±0.01)、(0.18±0.02)vs(0.25±0.02),P<0.05)],MDA表达量显著降低(P<0.05);10、100、1000 nmol/L Dex组IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05)。(4)与1、10 nmol/L Dex组比较:100、1000 nmol/LDex组TNF-α水平降低(P<0.05)。(5)与0、0.1、10 nmol/L Dex组比较:1000 nmol/L Dex组SOD活力增加(P<0.05)。结论Dex对大鼠DCD供肾的保护效应随浓度增加而增强,100、1000 nmol/L Dex剂量保护效果最佳;其机制可能涉及减少细胞凋亡、抑制炎症反应和抗氧化应激。 展开更多

关键词 心脏死亡后供体 右美托咪定 肾移植 器官保护

在线阅读 下载PDF 职称材料

右美托咪定与氙气改良的UW液对猪心脏死亡供肺的保护作用

13

作者 李翼容 刘祥凤 +5 位作者 陈倩 秦志刚 黎洁钰 薛正威 李鹏 顾健腾 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期794-800,共7页

目的探讨右美托咪定(Dexmedetomidine,DEX)与氙气(Xenon,Xe)添加改良的威斯康星大学保存液(university of Wisconsin solution,UW液)对猪心脏死亡器官捐献(donation after cardiac death,DCD)供肺的保护作用。方法4~6月龄雄性小香猪4只... 目的探讨右美托咪定(Dexmedetomidine,DEX)与氙气(Xenon,Xe)添加改良的威斯康星大学保存液(university of Wisconsin solution,UW液)对猪心脏死亡器官捐献(donation after cardiac death,DCD)供肺的保护作用。方法4~6月龄雄性小香猪4只,体质量为13~17 kg,采用静推顺式阿曲库铵及停止供氧建立猪心脏停跳模型,待热缺血(warm ischemia,WI)1 h后取肺并将其切成薄片。其中部分切片被命名为WI组,剩余切片则置于N_(2)/DEX/Xe添加的4种UW液中4℃冷缺血(cold ischemia,CI)24 h,并分别命名为WI+CI+N_(2)组、WI+CI+DEX组、WI+CI+DEX+30%Xe组、WI+CI+DEX+50%Xe组。5组肺组织切片行HE染色及组织损伤评分;TUNEL法检测细胞凋亡;Western blot检测cleaved Caspase-3、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)表达;免疫组化检测GPX4、高迁移率族蛋白1(high mobility group protein 1,HMGB1)表达。结果与WI组比较:HE染色显示各组肺泡结构均无明显破坏,肺水肿及炎症细胞浸润不明显,肺损伤评分无显著变化;WI+CI+N_(2)组TUNEL阳性细胞数、cleaved Caspase-3蛋白表达显著增加(P<0.05);各组肺组织GPX4蛋白表达无显著变化;WI+CI+N_(2)组HMGB1蛋白表达量显著增多(P<0.05)。与WI+CI+N_(2)组比较:WI+CI+DEX组、WI+CI+DEX+30%Xe组和WI+CI+DEX+50%Xe组的TUNEL阳性细胞数显著减少(P<0.001,P<0.05,P<0.05);WI+CI+DEX+30%Xe组HMGB1蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论DEX单独或联合Xe添加改良的UW液可通过抑制细胞凋亡、下调HMGB1表达及细胞质内弥散对猪DCD供肺发挥更好的细胞保护效果。 展开更多

关键词 心脏死亡器官捐献 右美托咪定 氙气

在线阅读 下载PDF 职称材料