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肿瘤相关成纤维细胞促胃癌类器官增殖与耐药的初步研究
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作者 张媛媛 段振铨 +6 位作者 李雨贤 黄梦秋 朱宝行 邱远 邹全明 彭六生 马代远 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第5期453-461,共9页
目的体外构建胃癌类器官与肿瘤相关成纤维细胞的共培养模型,利用该模型探究肿瘤相关成纤维细胞对胃癌类器官增殖与化疗耐药的影响。方法收集于2023年2月至2024年3月在陆军军医大学第二附属医院普外科接受手术切除的12例胃癌患者的肿瘤... 目的体外构建胃癌类器官与肿瘤相关成纤维细胞的共培养模型,利用该模型探究肿瘤相关成纤维细胞对胃癌类器官增殖与化疗耐药的影响。方法收集于2023年2月至2024年3月在陆军军医大学第二附属医院普外科接受手术切除的12例胃癌患者的肿瘤组织。采用体外三维构建胃癌类器官;通过HE染色进行形态学分析,采用免疫组织化学染色检测细胞角蛋白CK7、癌胚抗原CEA和增殖相关因子Ki-67的表达。培养同一患者来源的肿瘤相关成纤维细胞,通过光镜观察分析其形态;采用流式细胞染色检测其表型。将胃癌类器官与肿瘤相关成纤维细胞按1∶1比例共培养,相差显微镜下观察胃癌类器官的生长情况并分析其数量、平均直径与总面积。将单独培养的类器官设置为对照组,在对照组和共培养组中加入化疗药物5-氟尿嘧啶和奥沙利铂处理48 h,利用CellTiter-Glo^(R)3D试剂盒和CellEvent^(TM)Caspase 3/7分别检测类器官的细胞活力与凋亡情况。结果成功构建出10例患者来源的胃癌类器官与肿瘤相关成纤维细胞,胃癌类器官表现出与原发肿瘤一致的形态学特征并在CK7、CEA与Ki-67的表达上具有相似性。肿瘤相关成纤维细胞呈现出典型的梭状及CD326^(-)、CD45^(-)、CD31^(-)、α-SMA^(+)、CD73^(+)、CD90^(+)、CD105^(+)表型特征。与单独培养的类器官对照组比较,与肿瘤相关成纤维细胞共培养组的类器官形成数量更多、平均直径更长且总面积更大(P<0.05)。在化疗药物5-氟尿嘧啶和奥沙利铂处理下,对照组的半数抑制浓度分别为10.66和3.26μmol/L,而共培养组则分别为46.23和91.11μmol/L;与类器官单独培养的对照组比较,共培养组中类器官的CellEvent?Caspase 3/7阳性凋亡细胞明显减少。结论与单独培养的类器官比较,肿瘤相关成纤维细胞共培养模型能更好地模拟体内肿瘤微环境的促瘤增殖与耐药效应。 展开更多
关键词 胃癌 类器官 成纤维细胞 共培养模型 药物敏感检测
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胃癌患者肿瘤组织中B细胞的浸润及其免疫抑制功能的研究 被引量:1
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作者 李雨贤 段振铨 +7 位作者 王莹 谭雪玲 余小红 张媛媛 朱宝行 邱远 彭六生 邹全明 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1034-1040,共7页
目的 检测B细胞在胃癌患者肿瘤组织和正常胃组织中的分布,分析其表型特征并探究肿瘤组织来源的B细胞对T细胞增殖的影响。方法 采用免疫组织化学染色对33例胃癌患者的肿瘤组织和正常胃组织切片进行B细胞表面标志CD19染色并分析其浸润数目... 目的 检测B细胞在胃癌患者肿瘤组织和正常胃组织中的分布,分析其表型特征并探究肿瘤组织来源的B细胞对T细胞增殖的影响。方法 采用免疫组织化学染色对33例胃癌患者的肿瘤组织和正常胃组织切片进行B细胞表面标志CD19染色并分析其浸润数目,同时采用流式细胞术检测肿瘤组织和正常胃组织中B细胞的趋化因子受体和免疫球蛋白分子表达水平,并通过趋化实验研究CXCL12-CXCR4轴对B细胞的趋化作用,最后分离纯化出肿瘤组织和正常胃组织中的B细胞与自体的外周T细胞共培养,探讨B细胞对T细胞增殖的影响。结果 胃癌患者肿瘤组织中B细胞的浸润数目显著高于正常胃组织(P<0.01);且与正常胃组织来源的B细胞相比,肿瘤组织来源的B细胞高表达趋化因子受体CXCR4(P<0.05);TCGA数据库表明胃癌患者肿瘤组织中CXCL12的表达水平与CD19的表达水平呈正相关(r=0.15,P<0.01),胃癌患者临床样本的肿瘤组织中CXCL12的表达水平与B细胞浸润数目亦呈正相关(r=0.93,P<0.05),趋化实验证实CXCL12-CXCR4轴参与促进B细胞的趋化(P<0.05);尽管B细胞在肿瘤组织和正常胃组织中表达的IgM、IgG和IgA相当,但是体外共培养研究显示,与正常胃组织来源的B细胞相比,肿瘤组织来源的B细胞可显著抑制T细胞的增殖(P<0.01)。结论 B细胞在胃癌组织中的浸润增加,其可能通过CXCL12-CXCR4轴被募集至肿瘤组织,进而抑制T细胞的增殖以参与促进胃癌的进展。 展开更多
关键词 胃癌 B细胞 免疫抑制
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CD8^(+)CD103^(+)Trm细胞在胃癌中的分布、表型及其功能下降的机制研究 被引量:1
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作者 沈洋 彭六生 +2 位作者 邱远 邹全明 马代远 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1146-1152,共7页
目的探讨CD8^(+)CD103^(+)常驻记忆型T(Trm)细胞在胃癌患者组织中的分布情况,并研究其表型特征,分析胃癌组织中CD8^(+)CD103^(+) Trm细胞功能下降的机制。方法采用免疫组织化学染色检测胃癌患者组织中CD8^(+)CD103^(+) Trm细胞的数目并... 目的探讨CD8^(+)CD103^(+)常驻记忆型T(Trm)细胞在胃癌患者组织中的分布情况,并研究其表型特征,分析胃癌组织中CD8^(+)CD103^(+) Trm细胞功能下降的机制。方法采用免疫组织化学染色检测胃癌患者组织中CD8^(+)CD103^(+) Trm细胞的数目并分析其与胃癌患者临床分期的相关性;流式细胞术检测胃癌患者组织中CD8^(+)CD103^(+) Trm细胞的比例与数目、表型和功能;体外TGF-β1刺激培养CD8^(+) T细胞,分析其对CD8^(+)CD103^(+) Trm细胞功能的影响。结果与正常组织相比,胃癌患者肿瘤组织中CD8^(+)CD103^(+) Trm细胞的数目并未明显改变(P>0.05),但其频率显著下降(P<0.05);胃癌组织浸润的CD8^(+)CD103^(+) Trm细胞主要属于效应记忆型细胞(CD45RA-CCR7-),并高表达CD69和PD-1;然而,其表达的颗粒酶B和穿孔素水平显著下降(P<0.05);体外TGF-β1可诱导CD8^(+)CD103^(+) Trm细胞下调表达颗粒酶B和穿孔素(P<0.05)。此外,与早期胃癌患者相比,晚期胃癌患者肿瘤组织中浸润的CD8^(+)CD103^(+) Trm细胞数目显著下降(P<0.05)。结论胃癌组织中CD8^(+)CD103^(+) Trm细胞的浸润水平与疾病的进展成负相关,并呈现出抑制性的表型且抗肿瘤功能下降,从而有助于胃癌的免疫逃逸。 展开更多
关键词 胃癌 CD8^(+)CD103^(+)Trm细胞 TGF-Β1 疾病进展
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芳香烃受体活化对全肠外营养小鼠肠屏障损伤的保护作用研究
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作者 刘星宇 肖卫东 +3 位作者 陈弈辉 韩奔 王维 王建 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期400-406,共7页
目的探讨6-甲酰基吲哚并[3,2-B]咔唑(6-ForMylindolo[3,2-b]carbazole,FICZ)活化芳香烃受体(AhR)对全肠外营养(total parenteral nutrition,TPN)小鼠肠屏障损伤的保护作用及相关机制。方法将18只小鼠经颈外静脉置管输液后随机分为3组:... 目的探讨6-甲酰基吲哚并[3,2-B]咔唑(6-ForMylindolo[3,2-b]carbazole,FICZ)活化芳香烃受体(AhR)对全肠外营养(total parenteral nutrition,TPN)小鼠肠屏障损伤的保护作用及相关机制。方法将18只小鼠经颈外静脉置管输液后随机分为3组:对照组、TPN组、TPN+FICZ(1μg/d)组;TPN和TPN+FICZ组禁食输注等量营养液,对照组正常进食并输注等量生理盐水;7 d后比较置管前后小鼠体质量变化,取外周血检测肠屏障标志物,处死小鼠观察完整小肠长度和肠黏膜的形态学改变,取末端回肠组织检测肠屏障相关蛋白和mRNA表达。结果与对照组比较,TPN组小鼠体质量下降明显,小肠长度明显缩短(P<0.05),病理显示TPN组小鼠的小肠黏膜损伤明显,Chiu评分升高;血清肠屏障功能指标FITC、iFABP和肠组织炎症因子TNF-α、IL-1β水平高明显升高(P<0.05),肠道AhR活化指标CYP1A1,肠屏障紧密连接蛋白Zo-1、Occludin和肠组织抗炎因子IL-10水平明显降低(P<0.05)。与TPN组比较,FICZ干预后小鼠体质量下降和小肠缩短程度明显降低(P<0.05),小肠黏膜损伤改善,Chiu评分降低(P<0.05);血清FITC、iFABP和肠组织TNF-α、IL-1β水平明显降低(P<0.05),肠组织CYP1A1、Zo-1、Occludin和IL-10水平明显升高(P<0.05)。结论FICZ可通过AhR活化缓解肠黏膜炎症、调控紧密连接蛋白表达来减轻TPN引起的小鼠肠屏障损伤。 展开更多
关键词 全肠外营养 芳香烃受体 肠屏障
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