目的研究固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP1c)对肠道糖异生的调控作用。方法饥饿处理C57BL/6小鼠、SREBP1c纯合敲除型(SREBP1c-KO)和同窝野生型(SREBP1c-WT)小鼠,通过qPCR、Western blot检...目的研究固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP1c)对肠道糖异生的调控作用。方法饥饿处理C57BL/6小鼠、SREBP1c纯合敲除型(SREBP1c-KO)和同窝野生型(SREBP1c-WT)小鼠,通过qPCR、Western blot检测糖异生途径限速酶葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase catalytic,G6PC)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1,PCK1)在肝脏、空肠和回肠组织中的表达水平;在肠上皮细胞CaCo-2中过表达或敲低SREBP1c,检测细胞内G6PC和PCK1表达水平。结果饥饿处理后,C57BL/6小鼠空肠、回肠组织中G6PC、PCK1和SREBP1c表达水平均显著增加(P<0.05)。SREBP1c基因敲除后,小鼠空肠、回肠组织中由饥饿诱导的糖异生限速酶G6PC和PCK1的表达明显下调(P<0.05)。在肠上皮细胞CaCo-2中过表达SREBP1c,可显著上调糖异生途径关键酶G6PC和PCK1的表达,促进细胞内葡萄糖的产生(P<0.05);反之,敲低SREBP1c的表达,可明显下调G6PC和PCK1,抑制细胞内葡萄糖的产生(P<0.05)。结论饥饿状态下,SREBP1c可调控肠上皮细胞中糖异生限速酶G6PC和PCK1的表达,进而影响葡萄糖的生成,表明SREBP1c可能参与肠道糖异生的调控,机制有待进一步探索。展开更多
目的研究固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP1c)缺失对小鼠肠道菌群结构的影响。方法以SREBP1c基因敲除鼠为研究对象,收集纯合敲除型(SREBP1c-KO)和同窝野生型(SREBP1c-WT)的小鼠粪便,采用16S ...目的研究固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP1c)缺失对小鼠肠道菌群结构的影响。方法以SREBP1c基因敲除鼠为研究对象,收集纯合敲除型(SREBP1c-KO)和同窝野生型(SREBP1c-WT)的小鼠粪便,采用16S rDNA测序粪便基因组DNA,采用物种分类学分析、多样性指数分析、聚类分析、主成分分析(principal component analysis,PCA)等,比较敲除型和野生型两组小鼠肠道菌群结构的组成差异。检测两组小鼠肝脏脂合成代谢以及肠道屏障的差异。结果常规饲养下,SREBP1c基因敲除对小鼠的体重及肝脏总胆固醇含量(total cholesterol,TC)没有显著影响,明显减少肝脏内甘油三酯(triglyceride,TG)含量。α多样性指数(Sobs指数)分析发现,SREBP1c-KO小鼠的肠道菌群多样性显著低于野生型小鼠(P<0.01);PCA分析显示,两组小鼠肠道菌群组成有一定程度的差异。在门水平,厚壁菌门与拟杆菌门比值在SREBP1c-KO小鼠肠道中有上升趋势,但没有统计学差异;在属水平,相较于野生型小鼠,SREBP1c-KO小鼠肠道的理研菌属(Rikenella)相对丰度显著减少(P<0.05),同时肠道抗菌肽Reg3γ和紧密连接蛋白Occludin表达显著下调。结论脂代谢关键调控基因SREBP1c缺失降低小鼠肠道菌群多样性,减少理研菌属相对丰度水平,可能与肠道屏障减弱有关。展开更多
文摘目的根据初次确诊垂体神经内分泌肿瘤(pituitary neuroendocrine tumors,PitNETs)患者ki-67指数升高的危险因素的验证结果,构建术前预测瘤体组织ki-67指数的预测模型。方法采用病例-对照研究设计方案,收集2015年1月至2019年12月在陆军军医大学第二附属医院初次确诊的449名PitNETs患者术前的临床资料及瘤体组织标本病理结果。以7∶3的比例随机分为训练集(n=314)和验证集(n=135)。以ki-67表达水平≥3%为标准分为低水平组和高水平组,分析比较两组患者的临床资料。在训练集中进行多因素LASSO回归和二元Logistic回归识别ki-67指数的独立危险因素并构建列线图,应用受试者操作曲线下面积(area under the subject curve,AUC)、校准曲线(采用1000次的Bootstrap法获得)和决策曲线(decision curve analysis,DCA)来评估该模型的预测效能;在验证集中进行外部验证。结果经LASSO回归和二元Logistic回归筛选后结果显示:年龄(OR=0.97,95%CI:0.95~0.99)、肿瘤最大直径(OR=1.56,95%CI:1.21~2.03)及游离甲状腺素(free thyroxine,FT4;OR=0.93,95%CI:0.87~0.99)为ki-67指数升高的独立危险因素,并根据上述3个变量构建列线图模型;该模型在训练集和验证集中的AUC分别为0.692(95%CI:0.6294~0.7551)和0.691(95%CI:0.5913~0.7901),校准曲线均显示预测值与实测值拟合性良好,临床决策曲线表明在0.1~0.35阈值范围内有净收益率提示该模型有一定临床意义。结论初诊PitNETs患者的年龄、肿瘤最大直径及FT4为ki-67指数升高的独立危险因素;构建列线图模型在术前预测出ki-67指数表达水平的区分度和校准度较高,对手术方案选择和术后管理有一定帮助。
文摘目的研究固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP1c)对肠道糖异生的调控作用。方法饥饿处理C57BL/6小鼠、SREBP1c纯合敲除型(SREBP1c-KO)和同窝野生型(SREBP1c-WT)小鼠,通过qPCR、Western blot检测糖异生途径限速酶葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase catalytic,G6PC)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1,PCK1)在肝脏、空肠和回肠组织中的表达水平;在肠上皮细胞CaCo-2中过表达或敲低SREBP1c,检测细胞内G6PC和PCK1表达水平。结果饥饿处理后,C57BL/6小鼠空肠、回肠组织中G6PC、PCK1和SREBP1c表达水平均显著增加(P<0.05)。SREBP1c基因敲除后,小鼠空肠、回肠组织中由饥饿诱导的糖异生限速酶G6PC和PCK1的表达明显下调(P<0.05)。在肠上皮细胞CaCo-2中过表达SREBP1c,可显著上调糖异生途径关键酶G6PC和PCK1的表达,促进细胞内葡萄糖的产生(P<0.05);反之,敲低SREBP1c的表达,可明显下调G6PC和PCK1,抑制细胞内葡萄糖的产生(P<0.05)。结论饥饿状态下,SREBP1c可调控肠上皮细胞中糖异生限速酶G6PC和PCK1的表达,进而影响葡萄糖的生成,表明SREBP1c可能参与肠道糖异生的调控,机制有待进一步探索。
文摘目的研究固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP1c)缺失对小鼠肠道菌群结构的影响。方法以SREBP1c基因敲除鼠为研究对象,收集纯合敲除型(SREBP1c-KO)和同窝野生型(SREBP1c-WT)的小鼠粪便,采用16S rDNA测序粪便基因组DNA,采用物种分类学分析、多样性指数分析、聚类分析、主成分分析(principal component analysis,PCA)等,比较敲除型和野生型两组小鼠肠道菌群结构的组成差异。检测两组小鼠肝脏脂合成代谢以及肠道屏障的差异。结果常规饲养下,SREBP1c基因敲除对小鼠的体重及肝脏总胆固醇含量(total cholesterol,TC)没有显著影响,明显减少肝脏内甘油三酯(triglyceride,TG)含量。α多样性指数(Sobs指数)分析发现,SREBP1c-KO小鼠的肠道菌群多样性显著低于野生型小鼠(P<0.01);PCA分析显示,两组小鼠肠道菌群组成有一定程度的差异。在门水平,厚壁菌门与拟杆菌门比值在SREBP1c-KO小鼠肠道中有上升趋势,但没有统计学差异;在属水平,相较于野生型小鼠,SREBP1c-KO小鼠肠道的理研菌属(Rikenella)相对丰度显著减少(P<0.05),同时肠道抗菌肽Reg3γ和紧密连接蛋白Occludin表达显著下调。结论脂代谢关键调控基因SREBP1c缺失降低小鼠肠道菌群多样性,减少理研菌属相对丰度水平,可能与肠道屏障减弱有关。
