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缝隙连接蛋白α7促进骨髓间充质干细胞转化为心脏起搏样细胞的实验研究
1
作者
林毅漳
张晨亮
+2 位作者
肖华
林树
宋治远
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第10期875-881,共7页
目的探讨缝隙连接蛋白α7(GJA7)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs),经与乳鼠心肌细胞(neonatal rat ventricular myocytes,NRVMs)共培养,诱导心脏起搏样细胞相关基因表达的变化。方法构建携带GJA7基因的...
目的探讨缝隙连接蛋白α7(GJA7)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs),经与乳鼠心肌细胞(neonatal rat ventricular myocytes,NRVMs)共培养,诱导心脏起搏样细胞相关基因表达的变化。方法构建携带GJA7基因的慢病毒载体,转染rMSCs,经嘌呤霉素加压筛选纯化后,与NRVMs共培养。分为RFP(red fluorescent protein,红色荧光蛋白)-rMSCs组(A组)、GJA7-RFP-rMSCs组(B组)、RFP-rMSCs+NRVMs组(C组)、GJA7-RFP-rMSCs+NRVMs组(D组)4组。荧光定量PCR法检测心脏起搏细胞相关基因(HCN4、GJA7、Tbx3、Tbx18)及工作心肌细胞相关基因(Cx43、Nkx2.5)的表达。全细胞膜片钳检测各组细胞起搏电流(I_f)。结果携带GJA7基因的慢病毒载体成功转染rMSCs,经嘌呤霉素加压筛选,转染效率高达95%以上。RT-qPCR结果显示,D组HCN4、GJA7、Tbx3、Tbx18表达较其他各组明显增高(P<0.05);C组Nkx2.5、Cx43则较其他组表达明显升高(P<0.05)。全细胞膜片钳检测结果显示,仅D组记录到超极化激活的内向电流,该电流具有明显时间电压依赖性,且可被Cscl(4 mmol/L)阻断,符合I_f电流特性。结论经GJA7基因修饰并通过与心肌细胞共培养,使rMSCs在体外诱导出具有I_f电流的心脏起搏样细胞。
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关键词
缝隙连接蛋白α7
缝隙连接蛋白
骨髓间充质干细胞
共培养
生物起搏
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职称材料
高盐对小鼠白色脂肪棕色化的影响及其中枢调控机制研究
2
作者
张晨亮
林毅漳
+3 位作者
周鑫
陈霞
林树
宋治远
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第10期868-874,共7页
目的研究高盐摄入对小鼠白色脂肪组织(white adipose tissue,WAT)棕色化的影响,探讨其可能的中枢调控机制。方法采用随机数字表法将20只8周龄的C57BL/6J小鼠分为4组(n=5):短期高盐组与短期对照组(饲养24 h后处死,免疫组化法检测小鼠大脑...
目的研究高盐摄入对小鼠白色脂肪组织(white adipose tissue,WAT)棕色化的影响,探讨其可能的中枢调控机制。方法采用随机数字表法将20只8周龄的C57BL/6J小鼠分为4组(n=5):短期高盐组与短期对照组(饲养24 h后处死,免疫组化法检测小鼠大脑c-Fos表达情况),长期高盐组与长期对照组(连续饲养8周,每周对体质量、体温、饮水、进食进行监测)。对照组正常饮水,高盐组给予含2%氯化钠的盐水。长期组实验结束后收集血清检测血脂水平。收集性腺脂肪和脑标本,用荧光定量PCR法检测性腺脂肪组织中解耦联蛋白-1(uncoupling protein-1,UCP-1)等棕色化相关调控基因的改变以及下丘脑室旁核脑源性生长因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的mRNA表达。结果短期高盐刺激后,小鼠下丘脑室旁核c-Fos表达高盐组(112.67±11.24)较对照组(30.67±5.51)明显增加(P<0.01)。给予小鼠8周的高盐刺激后,小鼠血中甘油三酯[(0.75±0.19)mmol/L vs(1.07±0.08)mmol/L,P<0.05]和游离脂肪酸含量下降[(0.64±0.14)mmol/L vs(0.92±0.15)mmol/L,P<0.05],单侧性腺脂肪质量明显减轻[(0.11±0.01)g vs(0.15±0.01)g,P<0.01]。荧光定量PCR法检测发现高盐组WAT棕色化标志基因UCP-1含量(4.62±0.94)较对照组(1.00±0.16)明显增加(P<0.01);下丘脑室旁核BDNF高盐组mRNA表达(3.14±0.31)较对照组(1.00±0.12)明显增加(P<0.01)。结论长期高盐可诱导小鼠WAT棕色化,而下丘脑室旁核BDNF参与了其中的中枢调控过程。
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关键词
白色脂肪
棕色化
交感神经系统
高盐
解耦连蛋白1
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职称材料
题名
缝隙连接蛋白α7促进骨髓间充质干细胞转化为心脏起搏样细胞的实验研究
1
作者
林毅漳
张晨亮
肖华
林树
宋治远
机构
陆军
军医大学
(
第三军医大学
)
第一
附属
医院
心血管
内科
、重庆市
介入
心脏病学
研究所
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第10期875-881,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目(81570300)
文摘
目的探讨缝隙连接蛋白α7(GJA7)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs),经与乳鼠心肌细胞(neonatal rat ventricular myocytes,NRVMs)共培养,诱导心脏起搏样细胞相关基因表达的变化。方法构建携带GJA7基因的慢病毒载体,转染rMSCs,经嘌呤霉素加压筛选纯化后,与NRVMs共培养。分为RFP(red fluorescent protein,红色荧光蛋白)-rMSCs组(A组)、GJA7-RFP-rMSCs组(B组)、RFP-rMSCs+NRVMs组(C组)、GJA7-RFP-rMSCs+NRVMs组(D组)4组。荧光定量PCR法检测心脏起搏细胞相关基因(HCN4、GJA7、Tbx3、Tbx18)及工作心肌细胞相关基因(Cx43、Nkx2.5)的表达。全细胞膜片钳检测各组细胞起搏电流(I_f)。结果携带GJA7基因的慢病毒载体成功转染rMSCs,经嘌呤霉素加压筛选,转染效率高达95%以上。RT-qPCR结果显示,D组HCN4、GJA7、Tbx3、Tbx18表达较其他各组明显增高(P<0.05);C组Nkx2.5、Cx43则较其他组表达明显升高(P<0.05)。全细胞膜片钳检测结果显示,仅D组记录到超极化激活的内向电流,该电流具有明显时间电压依赖性,且可被Cscl(4 mmol/L)阻断,符合I_f电流特性。结论经GJA7基因修饰并通过与心肌细胞共培养,使rMSCs在体外诱导出具有I_f电流的心脏起搏样细胞。
关键词
缝隙连接蛋白α7
缝隙连接蛋白
骨髓间充质干细胞
共培养
生物起搏
Keywords
gap junction protein-alpha 7
connexin
bone marrow mesenchymal stem cells
co-culture
biological pacemaker
分类号
R322.11 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
高盐对小鼠白色脂肪棕色化的影响及其中枢调控机制研究
2
作者
张晨亮
林毅漳
周鑫
陈霞
林树
宋治远
机构
陆军
军医大学
(
第三军医大学
)
第一
附属
医院
心血管
内科
、重庆市
介入
心脏病学
研究所
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第10期868-874,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目(81570395)
重庆市西南医院院管课题(SWH2016HWHZ-04)
文摘
目的研究高盐摄入对小鼠白色脂肪组织(white adipose tissue,WAT)棕色化的影响,探讨其可能的中枢调控机制。方法采用随机数字表法将20只8周龄的C57BL/6J小鼠分为4组(n=5):短期高盐组与短期对照组(饲养24 h后处死,免疫组化法检测小鼠大脑c-Fos表达情况),长期高盐组与长期对照组(连续饲养8周,每周对体质量、体温、饮水、进食进行监测)。对照组正常饮水,高盐组给予含2%氯化钠的盐水。长期组实验结束后收集血清检测血脂水平。收集性腺脂肪和脑标本,用荧光定量PCR法检测性腺脂肪组织中解耦联蛋白-1(uncoupling protein-1,UCP-1)等棕色化相关调控基因的改变以及下丘脑室旁核脑源性生长因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的mRNA表达。结果短期高盐刺激后,小鼠下丘脑室旁核c-Fos表达高盐组(112.67±11.24)较对照组(30.67±5.51)明显增加(P<0.01)。给予小鼠8周的高盐刺激后,小鼠血中甘油三酯[(0.75±0.19)mmol/L vs(1.07±0.08)mmol/L,P<0.05]和游离脂肪酸含量下降[(0.64±0.14)mmol/L vs(0.92±0.15)mmol/L,P<0.05],单侧性腺脂肪质量明显减轻[(0.11±0.01)g vs(0.15±0.01)g,P<0.01]。荧光定量PCR法检测发现高盐组WAT棕色化标志基因UCP-1含量(4.62±0.94)较对照组(1.00±0.16)明显增加(P<0.01);下丘脑室旁核BDNF高盐组mRNA表达(3.14±0.31)较对照组(1.00±0.12)明显增加(P<0.01)。结论长期高盐可诱导小鼠WAT棕色化,而下丘脑室旁核BDNF参与了其中的中枢调控过程。
关键词
白色脂肪
棕色化
交感神经系统
高盐
解耦连蛋白1
Keywords
white adipose tissue
browning
sympathetic nervous system
high salt
uncoupling protein-1
分类号
R151.2 [医药卫生—营养与食品卫生学]
R349.15 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
缝隙连接蛋白α7促进骨髓间充质干细胞转化为心脏起搏样细胞的实验研究
林毅漳
张晨亮
肖华
林树
宋治远
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
高盐对小鼠白色脂肪棕色化的影响及其中枢调控机制研究
张晨亮
林毅漳
周鑫
陈霞
林树
宋治远
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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