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青蒿琥酯对多囊卵巢综合征模型小鼠的治疗作用及机制研究
1
作者
王雪玲
钟佩伶
+12 位作者
赵志鹏
陈飞
刘鑫
刘思佳
袁烈
方路
姚千弋
杨雄
刘超
成嘉坤
蔡永青
李小丽
李维宏
《陆军军医大学学报》
北大核心
2025年第3期193-204,共12页
目的观察青蒿琥酯(artesunate,AS)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)模型小鼠的治疗作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法25只雌性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为(n=5):对照组(Control组)、模型组(PCOS组)、青蒿...
目的观察青蒿琥酯(artesunate,AS)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)模型小鼠的治疗作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法25只雌性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为(n=5):对照组(Control组)、模型组(PCOS组)、青蒿琥酯低剂量组(AS15组)、青蒿琥酯高剂量组(AS30组)和二甲双胍组(metformin,Met组)。除Control组外,其余各组小鼠皮下注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA,60 mg/kg)并给予高脂饲料21 d以构建PCOS模型,AS组腹腔分别注射15和30 mg/kg剂量的青蒿琥酯,Met组灌胃给予200 mg/kg剂量的二甲双胍,每日1次,持续6周。采用ELISA法检测小鼠血清睾酮(testosterone,T)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激水平(follicle-stimulating hormone,FSH),并计算LH/FSH比值;采用全自动生化仪检测小鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、甘油三酯(triglyceride,TG)和总胆固醇(total cholesterol,TC)水平,并计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR);采用HE染色观察小鼠动情周期,以及卵巢、子宫组织病理形态改变;采用免疫荧光染色观察小鼠卵巢组织中p-eIF2α、ATF4、CHOP蛋白表达情况。体外,使用100μmol/L DHEA诱导人颗粒细胞瘤样细胞系KGN细胞模拟PCOS的高雄激素环境,以5和10μg/mL浓度的AS分别处理24 h后,Western blot检测内质网应激信号通路蛋白表达情况。结果与Control组相比,PCOS组小鼠动情周期紊乱,卵巢出现多囊样改变,血清T、LH/FSH比值显著升高(P<0.05);代谢方面,PCOS小鼠HOMA-IR、TC、TG水平明显升高(P<0.01);PCOS小鼠卵巢颗粒细胞和KGN细胞中p-eIF2α、ATF4、CHOP表达增加(P<0.05)。而与PCOS组相比,AS各剂量组小鼠卵巢和子宫病理形态改变显著改善,血清T、LH/FSH比值也明显降低(P<0.05);代谢方面,AS各剂量组小鼠HOMA-IR、TC、TG水平明显降低(P<0.05);AS各剂量组小鼠卵巢颗粒细胞和KGN细胞中p-eIF2α、ATF4、CHOP表达降低(P<0.05)。结论AS可显著改善PCOS小鼠的糖脂代谢异常和生殖功能,其作用机制可能是通过抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路缓解内质网应激。
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关键词
青蒿琥酯
多囊卵巢综合征
生殖功能
糖脂代谢
内质网应激
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职称材料
转录因子EB增强巨噬细胞自噬功能及逆转内毒素耐受的作用
2
作者
杨婷
刘鑫
+5 位作者
蒋青松
王宇洁
时新惠
杨雄
刘思佳
李小丽
《陆军军医大学学报》
北大核心
2025年第8期794-806,共13页
目的 研究转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)在内毒素耐受巨噬细胞中的作用。方法 采用脂多糖(LPS)诱导建立内毒素耐受细胞模型,将RAW264.7细胞分为空白组(Medium组)、5ng/mLLPS组(LPS5组)、100ng/mLLPS组(LPS100组)、5ng/mLLPS...
目的 研究转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)在内毒素耐受巨噬细胞中的作用。方法 采用脂多糖(LPS)诱导建立内毒素耐受细胞模型,将RAW264.7细胞分为空白组(Medium组)、5ng/mLLPS组(LPS5组)、100ng/mLLPS组(LPS100组)、5ng/mLLPS+100ng/mLLPS组(Tolerance组)。采用ELISA法检测炎症因子TNF-α和IL-6的释放水平;Western blot和免疫荧光法检测自噬相关蛋白LC3和P62以及TFEB在细胞质和细胞核中的分布;通过慢病毒过表达TFEB或siRNA敲低TFEB后,观察耐受细胞的自噬水平和细菌清除能力的变化。结果 与LPS 100组相比,Tolerance组细胞炎症因子TNF-α和IL-6的释放水平以及细菌清除能力显著降低(P<0.01);LC3水平降低,P62水平升高,细胞质和细胞核中TFEB的水平均显著降低(P<0.01);过表达TFEB可显著上调Tolerance组细胞中LC3水平,降低P62水平,并增强细菌清除能力(P<0.01)。siRNA敲低TFEB对Tolerance组LC3和P62水平以及细菌清除能力无明显影响。结论 过表达TFEB能恢复内毒素耐受细胞的自噬功能,增强细菌清除能力,从而改善脓毒症的免疫抑制状态,有望成为脓毒症防治的潜在靶点。
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关键词
脓毒症
免疫抑制
内毒素耐受
转录因子EB
自噬
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职称材料
题名
青蒿琥酯对多囊卵巢综合征模型小鼠的治疗作用及机制研究
1
作者
王雪玲
钟佩伶
赵志鹏
陈飞
刘鑫
刘思佳
袁烈
方路
姚千弋
杨雄
刘超
成嘉坤
蔡永青
李小丽
李维宏
机构
重庆医科
大学
附属
第一
医院
生殖医学
中心
重庆医科
大学
重庆高校生物化学与分子药理学重点实验室
重庆医科
大学
药学院药理系
曲靖市
第一
人民
医院
病理科
达州市中西医结合
医院
药学科
陆军
军医大学
(
第三军医大学
)
第一
附属
医院
临床
研究
中心
陆军
特色医学
中心
(
第三军医大学
大坪
医院
)药剂科
出处
《陆军军医大学学报》
北大核心
2025年第3期193-204,共12页
基金
重庆市自然科学基金面上项目(CSTB2022NSCQ-MSX0086,CSTB2024NSCQ-MSX1180)
四川省中央引导地方科技发展专项项目(区域创新体系建设-成都-重庆双城经济圈,2023ZYD0283)
重庆医科大学药学院2024年“药创之星”本科生科研素养培育计划项目(YCZX20240705)。
文摘
目的观察青蒿琥酯(artesunate,AS)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)模型小鼠的治疗作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法25只雌性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为(n=5):对照组(Control组)、模型组(PCOS组)、青蒿琥酯低剂量组(AS15组)、青蒿琥酯高剂量组(AS30组)和二甲双胍组(metformin,Met组)。除Control组外,其余各组小鼠皮下注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA,60 mg/kg)并给予高脂饲料21 d以构建PCOS模型,AS组腹腔分别注射15和30 mg/kg剂量的青蒿琥酯,Met组灌胃给予200 mg/kg剂量的二甲双胍,每日1次,持续6周。采用ELISA法检测小鼠血清睾酮(testosterone,T)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激水平(follicle-stimulating hormone,FSH),并计算LH/FSH比值;采用全自动生化仪检测小鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、甘油三酯(triglyceride,TG)和总胆固醇(total cholesterol,TC)水平,并计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR);采用HE染色观察小鼠动情周期,以及卵巢、子宫组织病理形态改变;采用免疫荧光染色观察小鼠卵巢组织中p-eIF2α、ATF4、CHOP蛋白表达情况。体外,使用100μmol/L DHEA诱导人颗粒细胞瘤样细胞系KGN细胞模拟PCOS的高雄激素环境,以5和10μg/mL浓度的AS分别处理24 h后,Western blot检测内质网应激信号通路蛋白表达情况。结果与Control组相比,PCOS组小鼠动情周期紊乱,卵巢出现多囊样改变,血清T、LH/FSH比值显著升高(P<0.05);代谢方面,PCOS小鼠HOMA-IR、TC、TG水平明显升高(P<0.01);PCOS小鼠卵巢颗粒细胞和KGN细胞中p-eIF2α、ATF4、CHOP表达增加(P<0.05)。而与PCOS组相比,AS各剂量组小鼠卵巢和子宫病理形态改变显著改善,血清T、LH/FSH比值也明显降低(P<0.05);代谢方面,AS各剂量组小鼠HOMA-IR、TC、TG水平明显降低(P<0.05);AS各剂量组小鼠卵巢颗粒细胞和KGN细胞中p-eIF2α、ATF4、CHOP表达降低(P<0.05)。结论AS可显著改善PCOS小鼠的糖脂代谢异常和生殖功能,其作用机制可能是通过抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路缓解内质网应激。
关键词
青蒿琥酯
多囊卵巢综合征
生殖功能
糖脂代谢
内质网应激
Keywords
artesunate
polycystic ovary syndrome
reproductive function
glycolipid metabolism
endoplasmic reticulum stress
分类号
R282.71 [医药卫生—中药学]
R285.6 [医药卫生—中药学]
R711.75 [医药卫生—妇产科学]
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职称材料
题名
转录因子EB增强巨噬细胞自噬功能及逆转内毒素耐受的作用
2
作者
杨婷
刘鑫
蒋青松
王宇洁
时新惠
杨雄
刘思佳
李小丽
机构
重庆医科
大学
药学院药理学系
陆军
军医大学
(
第三军医大学
)
第一
附属
医院
临床
研究
中心
不详
出处
《陆军军医大学学报》
北大核心
2025年第8期794-806,共13页
基金
国家自然科学基金面上项目(82172133)
重庆市自然科学基金面上项目(CSTB2022NSCQ-MSX0214)。
文摘
目的 研究转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)在内毒素耐受巨噬细胞中的作用。方法 采用脂多糖(LPS)诱导建立内毒素耐受细胞模型,将RAW264.7细胞分为空白组(Medium组)、5ng/mLLPS组(LPS5组)、100ng/mLLPS组(LPS100组)、5ng/mLLPS+100ng/mLLPS组(Tolerance组)。采用ELISA法检测炎症因子TNF-α和IL-6的释放水平;Western blot和免疫荧光法检测自噬相关蛋白LC3和P62以及TFEB在细胞质和细胞核中的分布;通过慢病毒过表达TFEB或siRNA敲低TFEB后,观察耐受细胞的自噬水平和细菌清除能力的变化。结果 与LPS 100组相比,Tolerance组细胞炎症因子TNF-α和IL-6的释放水平以及细菌清除能力显著降低(P<0.01);LC3水平降低,P62水平升高,细胞质和细胞核中TFEB的水平均显著降低(P<0.01);过表达TFEB可显著上调Tolerance组细胞中LC3水平,降低P62水平,并增强细菌清除能力(P<0.01)。siRNA敲低TFEB对Tolerance组LC3和P62水平以及细菌清除能力无明显影响。结论 过表达TFEB能恢复内毒素耐受细胞的自噬功能,增强细菌清除能力,从而改善脓毒症的免疫抑制状态,有望成为脓毒症防治的潜在靶点。
关键词
脓毒症
免疫抑制
内毒素耐受
转录因子EB
自噬
Keywords
sepsis
immunosuppression
endotoxin tolerance
transcription factor EB
autophagy
分类号
R392.3 [医药卫生—免疫学]
R3945.3 [医药卫生—医学遗传学]
R631.2 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
青蒿琥酯对多囊卵巢综合征模型小鼠的治疗作用及机制研究
王雪玲
钟佩伶
赵志鹏
陈飞
刘鑫
刘思佳
袁烈
方路
姚千弋
杨雄
刘超
成嘉坤
蔡永青
李小丽
李维宏
《陆军军医大学学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
转录因子EB增强巨噬细胞自噬功能及逆转内毒素耐受的作用
杨婷
刘鑫
蒋青松
王宇洁
时新惠
杨雄
刘思佳
李小丽
《陆军军医大学学报》
北大核心
2025
0
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