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基于Antares2的金黄色葡萄球菌生物发光示踪系统的构建被引量：1: 1; 作者胡珍尚伟龙饶贤才《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期393-399,共7页; 目的构建融合型荧光素酶标记的金黄色葡萄球菌示踪菌株,建立金葡菌示踪系统。方法采用同源重组技术将融合型荧光素酶Antares2编码基因敲入到金葡菌USA300基因组中,与金葡菌烯醇酶编码基因eno融合,构建稳定表达的示踪菌株。将示踪菌株与... 展开更多; 关键词金黄色葡萄球菌生物发光示踪系统荧光素酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

脂蛋白SA2275抗体治疗金黄色葡萄球菌脑脓肿的实验初探: 2; 作者郑颖杨裔 +7 位作者彭华刚饶一凡胡珍胡启文钟莲梅饶贤才尚伟龙周人杰《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期1655-1662,共8页; 目的探讨脂蛋白特异性抗体通过血脑屏障及其在抑制金黄色葡萄球菌脑脓肿形成中的作用。方法利用大肠埃希菌表达并纯化重组金葡菌脂蛋白SA2275,制备特异性小鼠多克隆抗体(anti-SA2275)。制作金葡菌感染脑脓肿模型,利用ELISA法检测经腹腔... 展开更多; 关键词金黄色葡萄球菌脑脓肿抗体血脑屏障; 在线阅读下载PDF 职称材料

WalK(S221P)突变影响万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌毒力的作用被引量：7: 3; 作者饶一凡毛旭虎 +2 位作者彭华刚尚伟龙饶贤才《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期219-228,共10页; 目的探讨WalK(S221P)突变对万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus, VISA)毒力的影响及其机制。方法采用转录组测序比较VISA菌株XN108及其WalK(S221P)回复菌株K65的毒力基因表达差异,利用RT-q... 展开更多; 关键词万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌二元调控系统 WalKR WalK(S221P)突变毒力; 在线阅读下载PDF 职称材料

WalK(S221P)突变促进金黄色葡萄球菌荚膜产生的作用研究: 4; 作者郭祖文饶一凡 +1 位作者彭华刚饶贤才《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第23期2460-2466,共7页; 目的探究WalK(S221P)突变促进金葡菌荚膜产生的作用及可能机制。方法采用转录组测序(RNA-seq)分析WalK(S221P)突变对金葡菌基因表达的影响,采用RT-qPCR检测荚膜合成基因的表达变化。利用荚膜染色和透射电镜观察确认WalK(S221P)突变促进... 展开更多; 关键词金黄色葡萄球菌荚膜二元调控系统WalKR WalK(S221P) MgrA; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于Antares2的金黄色葡萄球菌生物发光示踪系统的构建被引量：1: 1; 作者胡珍尚伟龙饶贤才; 机构陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院微生物学教研室; 出处《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期393-399,共7页; 基金国家自然科学基金面上项目(82272341)。; 文摘目的构建融合型荧光素酶标记的金黄色葡萄球菌示踪菌株,建立金葡菌示踪系统。方法采用同源重组技术将融合型荧光素酶Antares2编码基因敲入到金葡菌USA300基因组中,与金葡菌烯醇酶编码基因eno融合,构建稳定表达的示踪菌株。将示踪菌株与不同的底物混合,检测生物发光强度差异,筛选合适的菌株/底物示踪系统,并探究其在体外和体内的敏感性。结果通过构建基因敲入质粒pBT2-eno-antares2,转化金葡菌USA300菌株中进行基因敲入菌株筛选,经DNA测序和Western blot鉴定示踪菌株USA300/Eno-Antares2构建成功。细菌生长曲线和溶血实验表明所构建的示踪菌株与野生型USA300无明显差异。将示踪菌与DTZ、FUR和HFZ底物混合,肉眼均可观察到发光。不同浓度不同底物分析显示,USA300/Eno-Antares2/HFZ组成的系统发光性能最优,体外发光示踪的敏感性为50 CFU(菌落形成单位),小鼠体内示踪敏感性为100 CFU。结论金葡菌USA300/Eno-Antares2/HFZ示踪系统性能佳,可用于金葡菌感染、定植、播散等研究。; 关键词金黄色葡萄球菌生物发光示踪系统荧光素酶; Keywords Staphylococcus aureus bioluminescence tracing system luciferases; 分类号 R378.11 [医药卫生—病原生物学] R394-33 [医药卫生—医学遗传学] R446.5 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脂蛋白SA2275抗体治疗金黄色葡萄球菌脑脓肿的实验初探: 2; 作者郑颖杨裔彭华刚饶一凡胡珍胡启文钟莲梅饶贤才尚伟龙周人杰; 机构昆明医科大学第一附属医院神经内科陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院微生物学教研室西南大学生命科学学院陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院急诊部; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期1655-1662,共8页; 基金国家自然科学基金青年科学基金(81701967)。; 文摘目的探讨脂蛋白特异性抗体通过血脑屏障及其在抑制金黄色葡萄球菌脑脓肿形成中的作用。方法利用大肠埃希菌表达并纯化重组金葡菌脂蛋白SA2275,制备特异性小鼠多克隆抗体(anti-SA2275)。制作金葡菌感染脑脓肿模型,利用ELISA法检测经腹腔注射的anti-SA2275在小鼠脑组织中的滴度,评估抗体通过血脑屏障的能力;再利用梯度稀释细菌计数法检测脑脓肿中的细菌载量,对脑脓肿进行连续病理切片检测脑脓肿的大小,评价抗体anti-SA2275治疗金葡菌脑脓肿的效果。结果成功获得高纯度SA2275重组蛋白;免疫小鼠获得anti-SA2275,效价为1:51200;anti-SA2275注射金葡菌脑脓肿模型小鼠后,在动物脑组织中检测到抗体的存在;治疗组小鼠脑脓肿大小和菌载量显著低于阴性对照组。结论在金葡菌感染小鼠所致的脑脓肿形成过程中,脂蛋白SA2275特异性抗体可以通过血脑屏障分布至脑组织,显著抑制脑脓肿的形成及细菌的定植,具有治疗金葡菌脑脓肿的应用前景。; 关键词金黄色葡萄球菌脑脓肿抗体血脑屏障; Keywords Staphylococcus aureus antibodies brain abscess blood-brain barrier; 分类号 R378.11 [医药卫生—病原生物学] R742.7 [医药卫生—神经病学与精神病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名WalK(S221P)突变影响万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌毒力的作用被引量：7: 3; 作者饶一凡毛旭虎彭华刚尚伟龙饶贤才; 机构西南大学生命科学学院现代生物医药研究所陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院临床微生物学与免疫学教研室陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院微生物学教研室; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期219-228,共10页; 基金军队生物安全专项(17SAZ08) 国家自然科学基金面上项目(81672071)~~; 文摘目的探讨WalK(S221P)突变对万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌(vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus, VISA)毒力的影响及其机制。方法采用转录组测序比较VISA菌株XN108及其WalK(S221P)回复菌株K65的毒力基因表达差异,利用RT-qPCR检测菌株毒力基因的表达变化,溶血实验比较菌株的溶血能力。采用同源重组技术在金葡菌中引入WalK(S221P)突变,E-test检测菌株的耐药性。凝胶阻滞实验(EMSA)检测WalKR对靶基因调控区的结合能力。结果转录组测序结果显示,K65中多种重要毒力因子基因的表达上调(P<0.01),调控系统Agr的活性增强,溶血能力恢复。将WalK(S221P)突变引入USA300菌株后,其耐药性升高,毒力因子表达水平及溶血活性降低;EMSA证实WalKR对金葡菌Agr有直接调控作用;敲除agrA基因后,引入WalK(S221P)突变仍可使USA300agrA对万古霉素的耐药性升高,但毒力基因的表达水平及溶血活性改变不显著。结论 WalK(S221P)突变影响VISA毒力是通过Agr实现的,该突变导致WalKR的活性降低,激活Agr的能力下降,最终影响VISA菌株的毒力。; 关键词万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌二元调控系统 WalKR WalK(S221P)突变毒力; Keywords vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus two-component system WalKR WalK(S221P) mutation virulence; 分类号 R372 [医药卫生—病原生物学] R378.11 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名WalK(S221P)突变促进金黄色葡萄球菌荚膜产生的作用研究: 4; 作者郭祖文饶一凡彭华刚饶贤才; 机构陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院微生物学教研室重庆大学生物工程学院; 出处《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第23期2460-2466,共7页; 基金国家自然科学基金面上项目(82272341)。; 文摘目的探究WalK(S221P)突变促进金葡菌荚膜产生的作用及可能机制。方法采用转录组测序(RNA-seq)分析WalK(S221P)突变对金葡菌基因表达的影响,采用RT-qPCR检测荚膜合成基因的表达变化。利用荚膜染色和透射电镜观察确认WalK(S221P)突变促进金葡菌荚膜产生的作用,再用RT-qPCR筛选参与介导WalK(S221P)促进荚膜合成的调控分子,通过结合位点分析和凝胶迁移阻滞实验(EMSA)证实WalKR对目标分子的调控作用。结果RNA-seq分析显示WalK(S221P)突变对196个金葡菌基因的表达水平影响显著,其中16个荚膜合成操纵子基因在XN108中的表达均显著上调。RT-qPCR检测显示荚膜合成相关capA,capH和capK在含有WalK(S221P)突变的XN108及K-Newman菌株中分别较回复株XN108-R和野生型Newman菌株显著上调。荚膜染色和透射电镜观察显示XN108的荚膜合成相比于回复株XN108-R明显增多,增厚。RT-qPCR筛选提示WalK(S221P)促进金葡菌荚膜合成可能是通过上调MgrA表达水平实现的,结合位点检索分析及EMSA实验证实WalK激活的WalR具有直接结合mgrA基因调控区的功能。结论金葡菌WalK(S221P)突变具有促进金葡菌荚膜产生的作用,该作用的发挥可能通过上调MgrA的表达而实现。; 关键词金黄色葡萄球菌荚膜二元调控系统WalKR WalK(S221P) MgrA; Keywords Staphylococcus aureus capsule two-component system WalKR WalK(S221P) MgrA; 分类号 R372 [医药卫生—病原生物学] R378.11 [医药卫生—病原生物学] R394.3 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基于Antares2的金黄色葡萄球菌生物发光示踪系统的构建	胡珍尚伟龙饶贤才	《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	脂蛋白SA2275抗体治疗金黄色葡萄球菌脑脓肿的实验初探	郑颖杨裔彭华刚饶一凡胡珍胡启文钟莲梅饶贤才尚伟龙周人杰	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2020	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	WalK(S221P)突变影响万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌毒力的作用	饶一凡毛旭虎彭华刚尚伟龙饶贤才	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2020	7	在线阅读下载PDF 职称材料
4	WalK(S221P)突变促进金黄色葡萄球菌荚膜产生的作用研究	郭祖文饶一凡彭华刚饶贤才	《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料