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热习服对电磁辐射所致小鼠海马神经损伤的保护作用及机制研究 被引量:1
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作者 王泽泽 杨学森 +8 位作者 王英 谭雨龙 罗珍 李萍 何根林 刘晓倩 申婷婷 刘怡杉 罗雪 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第7期629-638,共10页
目的探究热习服对电磁辐射所致海马神经损伤的保护作用及机制。方法40只雄性BALB/c小鼠(体质量18~22 g,7周龄)按随机数字表法分为4组(n=10):对照(Con)组、热习服(HA)组(34℃,30 d)、电磁辐射(EMF)组(2450 MHz,20 min/d,4周)、热习服+电... 目的探究热习服对电磁辐射所致海马神经损伤的保护作用及机制。方法40只雄性BALB/c小鼠(体质量18~22 g,7周龄)按随机数字表法分为4组(n=10):对照(Con)组、热习服(HA)组(34℃,30 d)、电磁辐射(EMF)组(2450 MHz,20 min/d,4周)、热习服+电磁辐射(HA+EMF)组。采用糖水偏好实验检测各组小鼠蔗糖偏好程度,悬尾实验和强迫游泳实验观察各组不动时间,Morris水迷宫检测各组学习记忆能力。采用HE染色观察各组小鼠海马组织病理变化;分别使用小胶质细胞标志物Iba1、促炎表型标志物CD68及抗炎表型标志物CD206进行免疫荧光标记,检测各组海马内小胶质细胞数量及小胶质细胞表型变化;采用ELISA检测各组海马内TNF-α、IL-1β、TGF-β和IL-10水平;采用Western blot检测各组海马内HSP70的蛋白表达水平。结果与Con组相比,EMF暴露小鼠对蔗糖的偏好降低(P<0.05),悬尾不动时间延长(P<0.01),强迫游泳不动时间延长(P<0.01),第7天的逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越平台次数减少(P<0.05);海马区细胞排列较紊乱、结构较松散、存在细胞形态不规则、肿胀,细胞核固缩、着色深,小胶质细胞水肿;海马区小胶质细胞数量增加(P<0.01),CD68相对荧光强度升高(P<0.01)、CD206相对荧光强度差异无统计学意义(P=0.885),提示此时活化小胶质细胞主要呈促炎型M1表型;海马中TNF-α、IL-1β含量显著升高,IL-10和TGF-β含量显著下降(P<0.01)。与EMF组相比,HA+EMF组小鼠对蔗糖的偏好增加(P<0.01),悬尾不动时间减少(P<0.05),强迫游泳不动时间减少(P<0.01),第7天的逃避潜伏期缩短(P<0.01);小鼠海马区细胞损伤程度改善,细胞固缩减轻。与Con组相比,HA+EMF组海马区小胶质细胞数量增加(P<0.01),抗炎型M2表型标志物CD206相对荧光强度升高(P<0.01),此时CD68相对荧光强度相较EMF组显著下降(P<0.01)。与EMF组相比,HA+EMF组小鼠海马中TNF-α、IL-1β水平下降(P<0.01),TGF-β和IL-10水平升高(P<0.01)。HA+EMF组小鼠海马内HSP70蛋白表达量相较于EMF组显著升高(P<0.01)且显著高于HA组(P<0.01)。结论热习服可能通过改变小胶质细胞表型调节炎症反应,改善电磁辐射诱导的神经损伤。 展开更多
关键词 热习服 电磁辐射 海马神经损伤 神经炎症 热休克蛋白70
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湿热环境高强度运动负荷对小鼠骨骼肌功能及质量的影响
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作者 余宏涛 李韦昉 +4 位作者 罗昶 杨学森 易龙 陈卡 糜漫天 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第17期2079-2087,共9页
目的通过构建模拟湿热环境高强度运动负荷实验动物模型,探究该条件下小鼠骨骼肌功能及质量变化情况。方法将24只7~8周龄雄性C57BL/6J小鼠[体质量(21.30±0.67)g]按随机数字表法分为常温常湿对照组(CON组)、常温常湿运动组(NE组)、... 目的通过构建模拟湿热环境高强度运动负荷实验动物模型,探究该条件下小鼠骨骼肌功能及质量变化情况。方法将24只7~8周龄雄性C57BL/6J小鼠[体质量(21.30±0.67)g]按随机数字表法分为常温常湿对照组(CON组)、常温常湿运动组(NE组)、高温高湿运动组(HE组),每组各8只。HE组暴露于37~39℃、70%~80%湿度的高温高湿模拟舱内以坡度10°、80%最大速度进行全程60 min运动干预(运动12 min、休息8 min,循环3次)。CON组不运动,NE组以相同的运动模式在常温常湿环境下进行。通过监测小鼠体质量、体成分分析评估小鼠一般情况,采用全自动生化分析仪检测小鼠血清肌酐、尿素含量。运动结束后,测量小鼠抓力、力竭时间评估运动能力,采用原位/体内/离体肌肉测试系统检测骨骼肌收缩能力及抗疲劳能力,采用骨骼肌HE染色观察骨骼肌形态结构变化并分析肌纤维平均横截面积和平均直径,采用RT-qPCR检测骨骼肌蛋白质合成相关基因(Eif4ebp1、p70S6k)和分解相关基因(Foxo3、Fbxo32、Trim63)以及热应激相关基因(Hsf-1、Hspa1a、Hsp90aa)的表达水平。结果①HE组小鼠与CON组和NE组相比体质量显著降低(P<0.01),瘦体质量降低(P<0.05),HE组小鼠肌酐含量与CON组及NE组比较,均呈现出增高趋势(P<0.05),HE组小鼠尿素含量与CON组及NE组比较,明显增高(P<0.01)。②HE组小鼠与CON组和NE组相比,抓力降低(P<0.001),骨骼肌收缩能力下降及抗疲劳能力减弱(P<0.05)。③与NE组和CON组相比,HE组小鼠肌纤维平均横截面积减少(P<0.05),平均纤维直径减少(P<0.05),Fbxo32、Trim63、Eif4ebp1呈现明显升高(P<0.01),p70S6k表达下降(P<0.05)。④HE组小鼠与CON组和NE组相比,热应激相关基因表达增高(P<0.05)。结论湿热环境高强度运动负荷会导致小鼠骨骼肌功能及质量下降,这可能与过度热应激引发骨骼肌蛋白质合成和分解扰乱有关。 展开更多
关键词 湿热环境 运动能力 骨骼肌 热应激
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热休克蛋白与老年肌少症关系的研究进展 被引量:3
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作者 黄欢欢 陈治宇 +4 位作者 谭雨龙 罗雪 肖谦 赵庆华 杨学森 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期771-775,共5页
肌少症(sarcopenia)是以骨骼肌量减少、肌肉力量下降和/或躯体功能减退为主要表现的进行性、广泛性的全身性疾病,与老年人跌倒、失能、骨折等不良事件密切相关。肌少症发病机制复杂,目前暂无特异性治疗药物。热休克蛋白(heat stress pro... 肌少症(sarcopenia)是以骨骼肌量减少、肌肉力量下降和/或躯体功能减退为主要表现的进行性、广泛性的全身性疾病,与老年人跌倒、失能、骨折等不良事件密切相关。肌少症发病机制复杂,目前暂无特异性治疗药物。热休克蛋白(heat stress protein, HSP)是一类高度保守的应激蛋白,有研究发现HSP在维持肌肉健康方面具有重要意义。因此,本文拟就老年肌少症的特点及发病机制、HSP及其与老年肌少症关系和潜在机制进行综述,以期为国内外同行防治老年肌少症提供思路。 展开更多
关键词 热休克蛋白 应激蛋白 肌少症 肌肉健康
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热习服对大鼠高原脑水肿的预防效应及其机制研究 被引量:2
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作者 柯贤锋 何根林 +7 位作者 董华平 吴刚 徐刚 张二龙 陈建 孙滨达 杨学森 高钰琪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期2043-2050,共8页
目的探讨热习服对大鼠高原脑水肿的预防效应及其机制。方法雄性成年SD大鼠按随机数字表法分为正常对照(C)组、热习服(HA)组(34℃,30 d)、缺氧(H)组(7 600 m,1 d)、热习服+缺氧(HHA)组(34℃30 d+7 600 m 1 d)。各组处理结束后,取脑组织... 目的探讨热习服对大鼠高原脑水肿的预防效应及其机制。方法雄性成年SD大鼠按随机数字表法分为正常对照(C)组、热习服(HA)组(34℃,30 d)、缺氧(H)组(7 600 m,1 d)、热习服+缺氧(HHA)组(34℃30 d+7 600 m 1 d)。各组处理结束后,取脑组织比较其湿干质量比,对脑组织HE染色、FJB染色后观察病理形态学改变,透射电镜观察脑组织超微结构改变,取血液标本检测血常规、血气分析和血红蛋白氧解离曲线,同时检测脑组织中丙二醛(MDA)含量和热休克蛋白70(HSP70)及水通道蛋白4(AQP4)蛋白的表达。结果与C组(4.50±0.07)相比,H组脑组织湿干质量比(4.62±0.08)显著升高(P<0.05);HHA组脑组织湿干质量比(4.52±0.06)显著低于H组(P<0.05)。与C组相比,H组脑组织HE染色和透射电镜结果显示细胞肿胀,胞质疏松,染色质分布不均匀,核明显固缩、破裂、溶解,细胞空泡化明显,FJB染色提示神经元变性增多;与H组相比,HHA组细胞损伤、神经元变性和凋亡程度显著改善。与C组相比,H组血红蛋白、红细胞计数、红细胞压积和中性粒细胞百分比显著升高,血氧饱和度、血氧分压显著降低(P<0.05);与H组相比,HHA组血红蛋白、红细胞和红细胞压积进一步升高,但中性粒细胞百分比显著降低,血氧饱和度、血氧分压显著升高(P<0.05)。与C组相比,H组氧解离曲线发生右移;与H组相比,HHA组氧解离曲线发生右移。与C组相比,H组脑组织MDA含量和AQP4蛋白表达显著升高(P<0.05);与H组相比,HHA组MDA含量和AQP4蛋白表达显著降低,HSP70蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论热习服可以有效预防大鼠高原脑水肿的发生,其机制与提高氧气供应、减轻氧化应激、改善细胞损伤等有关。 展开更多
关键词 热习服 高原脑水肿 预防
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热刺激后小胶质细胞细胞外囊泡对神经元的损伤作用
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作者 李萍 罗雪 +6 位作者 罗珍 何根林 王泽泽 申婷婷 刘晓倩 谭雨龙 杨学森 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第18期2029-2035,共7页
目的探究热刺激后小胶质细胞细胞外囊泡对神经元损伤的影响。方法热刺激BV2小胶质细胞后收集上清,通过不同的超速离心速度获取细胞外大囊泡和小囊泡。利用纳米粒度分析仪检测粒径,利用Western blot检测囊泡上TSG101、CD63和flotillin-1... 目的探究热刺激后小胶质细胞细胞外囊泡对神经元损伤的影响。方法热刺激BV2小胶质细胞后收集上清,通过不同的超速离心速度获取细胞外大囊泡和小囊泡。利用纳米粒度分析仪检测粒径,利用Western blot检测囊泡上TSG101、CD63和flotillin-1的表达。PKH67标记BV2来源的囊泡后与N2a细胞共孵育,检测神经元对小胶质细胞细胞外囊泡的摄取情况。分别将热刺激后BV2来源的大囊泡和小囊泡与N2a共孵育,通过CCK-8、细胞外乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、台盼蓝染色和TUNEL染色法评价热刺激后N2a的损伤情况。结果小囊泡粒径介于30~120 nm,高表达TSG101和CD63,大囊泡粒径介于90~1000 nm,高表达flotillin-1;BV2来源的细胞外囊泡可被N2a细胞摄取并参与热刺激对N2a细胞损伤的调节,其中CCK-8检测结果表明小胶质细胞来源的大小囊泡均能降低热刺激后N2a细胞的活力(P<0.05)。LDH检测、台盼蓝染色及TUNEL检测结果表明大囊泡(P<0.05)和小囊泡(P<0.01)均能显著提高热刺激后N2a细胞LDH的释放水平、N2a细胞的蓝染水平及凋亡程度,且小囊泡处理组中N2a细胞的LDH释放水平、蓝染和凋亡水平高于大囊泡处理组。结论热刺激后小胶质细胞通过细胞外囊泡加剧了神经元的损伤。 展开更多
关键词 小胶质细胞 细胞外囊泡 热刺激 神经元损伤
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罗沙司他通过上调HIF-1α减轻热打击诱导的肾小管上皮细胞凋亡与衰老
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作者 宋用为 王玲 +3 位作者 陈文婷 张明洋 杨学森 戴欢子 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1092-1099,共8页
目的探讨罗沙司他对热打击诱导的肾小管上皮细胞(HK-2细胞)凋亡与衰老的影响及其机制。方法体外培养HK-2细胞,用不同浓度(10、20、30、40、50μmol/L)的罗沙司他处理24 h,通过CCK-8法确定罗沙司他的最佳干预浓度。将HK-2细胞分为4组(n=... 目的探讨罗沙司他对热打击诱导的肾小管上皮细胞(HK-2细胞)凋亡与衰老的影响及其机制。方法体外培养HK-2细胞,用不同浓度(10、20、30、40、50μmol/L)的罗沙司他处理24 h,通过CCK-8法确定罗沙司他的最佳干预浓度。将HK-2细胞分为4组(n=3):对照组、罗沙司他组(30μmol/L、24 h)、热打击组(43℃、2 h)、热打击+罗沙司他组(30μmol/L罗沙司他处理24 h后热打击2 h)。通过CCK-8检测细胞活力;Western blot检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1α)、Cleaved Caspase-3、p16、p21蛋白表达量;免疫荧光检测HIF-1α分布;细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测SA-β-Gal活性;TUNEL染色检测细胞凋亡情况。结果用30μmol/L罗沙司他处理的细胞活力最高。与对照组比较,热打击组细胞活力显著降低(P<0.05);HIF-1α、Cleaved Caspase-3、p16、p21蛋白表达量显著增加(P<0.05);SA-β-Gal活性显著增加(P<0.05);TUNEL阳性细胞占比显著增加(P<0.05)。与热打击组比较,热打击+罗沙司他组Cleaved Caspase-3、p16、p21蛋白表达量显著降低(P<0.05);SA-β-Gal活性显著降低[(65.44±5.00)%vs(77.15±2.61)%,P<0.05];TUNEL阳性细胞占比显著降低[(16.73±2.20)%vs(46.40±13.87)%,P<0.05],细胞活力显著增加[(86.33±4.51)%vs(66.33±8.50)%,P<0.05];HIF-1α蛋白表达量进一步增加(P<0.05)。免疫荧光结果显示HIF-1α主要分布在细胞核及细胞核周围。结论罗沙司他通过上调HIF-1α减轻热打击诱导的肾小管上皮细胞凋亡和衰老。 展开更多
关键词 热打击 罗沙司他 HIF-1Α 细胞凋亡 细胞衰老
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热习服训练复合缺氧训练增强耐热能力的研究 被引量:9
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作者 罗雪 陈征辉 +6 位作者 何根林 谭雨龙 李萍 申婷婷 罗珍 胡彦 杨学森 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期1611-1619,共9页
目的采用经典热习服训练方法复合缺氧训练以探索提升机体耐热能力的有效方法。方法在温度33℃以上、湿度大于70%的湿热条件下,以2018年某部队60名经严格筛查的男性健康志愿者为对象,进行为期12 d的热习服训练和测试。60名志愿者分为3组... 目的采用经典热习服训练方法复合缺氧训练以探索提升机体耐热能力的有效方法。方法在温度33℃以上、湿度大于70%的湿热条件下,以2018年某部队60名经严格筛查的男性健康志愿者为对象,进行为期12 d的热习服训练和测试。60名志愿者分为3组,分别为对照组、热习服组和缺氧训练复合热习服组,每组20名。采集热习服前后耳温、心率、出汗量、心肺功能、综合感受评分、生理紧张指数(physiological strain index,PSI)、最大摄氧量(maximal oxygen uptake, VO2max)、心率为170次/min时的体力工作能力(physical work capacity at heart rate of 170 beats per minute, PWC170)进行耐热能力的评估。结果与对照组相比,热习服组以及缺氧复合热习服组基础耳温、耐热测试后的耳温均显著下降(P<0.05),基础心率以及耐热测试后的心率均显著下降(P<0.05);PSI与呼吸频率也显著降低(P<0.05);出汗量、VO2max、PWC170、最大心输出量、氧耗量/最大心率、最大二氧化碳排出量、最大肺通气量均显著增加(P<0.05)。缺氧复合热习服组在耐热测试后的心率与耳温均低于热习服组(P<0.05),并且PSI与呼吸频率也出现显著降低(P<0.05)。与热习服组相比,缺氧复合热习服组的出汗量、VO2max、PWC170、最大心输出量、氧耗量/最大心率、最大二氧化碳排出量、最大肺通气量均显著增加(P<0.05)。结论在经典热习服训练基础上增加耐缺氧训练,能更有效地促进热习服的形成。 展开更多
关键词 热习服 缺氧训练 心肺功能 耐热能力
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经典型及劳力型热射病大鼠心肌损伤对比研究 被引量:3
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作者 张伯翼 罗雪 +7 位作者 罗珍 王泽泽 谭雨龙 何根林 李萍 申婷婷 刘晓倩 杨学森 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第17期1779-1789,共11页
目的 比较劳力型热射病(exertional heat stroke, EHS)与经典型热射病(classical heat stroke, CHS)大鼠动物模型心肌损伤的差异,为热射病心肌损伤的临床治疗提供可能的实验室依据。方法 80只SD大鼠按随机数表法随机分为对照组(n=10)、... 目的 比较劳力型热射病(exertional heat stroke, EHS)与经典型热射病(classical heat stroke, CHS)大鼠动物模型心肌损伤的差异,为热射病心肌损伤的临床治疗提供可能的实验室依据。方法 80只SD大鼠按随机数表法随机分为对照组(n=10)、运动对照组(EXC,n=10)、经典热射病组(CHS,n=30)和劳力型热射病组(EHS,n=30)。对照组和EXC组大鼠置于温度(25±0.5)℃,相对湿度(50±5)%环境中;EHS组和CHS组大鼠置于模拟热气候动物舱内,舱内环境温度(39±0.5)℃,相对湿度(50±5)%;EHS组和EXC组大鼠给予跑台运动处理,跑步速度设置为12 m/min,坡度为0°,每运动8 min休息2 min,以监测大鼠直肠温度等。核心体温达到42.3℃或出现瘫倒(掐尾反射消失)作为热射病的开始,之后将大鼠移至常温环境复温。采用超声心动图仪检测大鼠心功能指标,生化法检测血清心肌酶(AST、LDH、CK-MB、CK)水平,苏木精-伊红(HE)染色法检测大鼠心肌组织病理,TUNEL染色检测大鼠心肌细胞凋亡情况。采用蛋白免疫印迹法检测大鼠心肌组织中醌氧化还原酶1(Nrf2)、切割半胱天冬氨酸蛋白酶(Cl-Caspase-3)、抗凋亡蛋白(Bcl-2)、促凋亡蛋白(Bax)、血红素加氧酶-1(HO-1)的蛋白表达水平。结果 与CHS组大鼠比较,EHS组大鼠热射病潜伏期显著缩短(P<0.01),且诱发热射病所需的热负荷显著减少(P<0.01)。CHS组大鼠的脱水率显著大于EHS组(P<0.01),但EHS组大鼠的脱水速率显著高于CHS组(P<0.01)。两组大鼠热射病发生时的直肠温度无显著差异(P>0.05)。超声心动图提示,EHS组大鼠的左室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)显著低于CHS组大鼠(P<0.05)。EHS组大鼠的AST和LDH水平显著高于CHS组大鼠(P<0.01)。两组大鼠均出现急性心肌损伤的病理改变,表现为心肌细胞水肿、肌纤维排列混乱、断裂,可见炎性浸润,且EHS组心肌损伤病理评分高于CHS组(P<0.05),EHS组心肌细胞凋亡比率亦显著高于CHS组(P<0.05)。氧化应激相关信号通路中,EHS组大鼠心肌组织的蛋白质表达水平显著高于CHS组。结论 高温同时复合运动有更高的热射病易感性,EHS介导的心功能异常及心肌细胞凋亡较CHS更重,且可能与氧化应激相关信号通路活化相关。 展开更多
关键词 经典型热射病 劳力型热射病 心肌损伤 超声心动图 凋亡
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温度对斯氏按蚊繁殖能力和生存时间的影响 被引量:3
9
作者 秦杰 于莎莎 +3 位作者 王盼 刘婷婷 王静 王英 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期241-245,共5页
目的研究环境温度对按蚊繁殖能力的影响及其分子机制。方法在16、20、24、28、32℃5个温度梯度下进行斯氏按蚊的饲养,比较分析不同温度下斯氏按蚊的产卵能力和生存时间。并在饲血前后不同时间点提取斯氏按蚊总RNA,利用RT-qPCR的方法检... 目的研究环境温度对按蚊繁殖能力的影响及其分子机制。方法在16、20、24、28、32℃5个温度梯度下进行斯氏按蚊的饲养,比较分析不同温度下斯氏按蚊的产卵能力和生存时间。并在饲血前后不同时间点提取斯氏按蚊总RNA,利用RT-qPCR的方法检测按蚊卵黄蛋白原(Vg)分子转录水平。结果在16℃的环境温度下斯氏按蚊停止繁殖,20℃的产卵率明显低于24、28和32℃(P<0.05),其余各组间的产卵率比较则无统计学差异。在20~28℃温度范围内,随着环境温度升高斯氏按蚊的产卵时间逐渐缩短(P<0.001)、产卵数量逐渐增高(P<0.05,P<0.01)、生存时间逐渐延长(P<0.05,P<0.01);当环境温度升至32℃时,与28℃比较,斯氏按蚊的产卵时间进一步缩短(P>0.05),但产卵数量明显减少(P<0.01),且生存时间明显缩短(P<0.01)。Vg转录水平在16℃下吸血前后始终处于基础低表达水平,其他各组在吸血后24 h显著升高,各温度间转录水平有统计学差异(P<0.01),且与产卵数量差异趋势一致。结论 28℃是斯氏按蚊繁殖和生存的最佳环境温度,其分子机制可能是通过温度影响卵黄蛋白原表达水平而实现的。 展开更多
关键词 温度 斯氏按蚊 繁殖能力 卵黄蛋白原
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大劣按蚊卵黄蛋白原基因cDNA全长序列扩增及功能域蛋白的表达与纯化研究 被引量:1
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作者 于莎莎 胡辉 +4 位作者 秦杰 王静 刘婷 刘婷婷 王英 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1140-1145,共6页
目的对大劣按蚊卵黄蛋白原(Anopheles dirus vitellogenin, AdVg)基因cDNA的全长序列进行扩增和分析,并对其功能域蛋白进行表达与纯化。方法基于前期克隆的AdVg基因cDNA片段,利用RACE PCR技术,扩增AdVg基因的5′末端及3′末端序列。用Ve... 目的对大劣按蚊卵黄蛋白原(Anopheles dirus vitellogenin, AdVg)基因cDNA的全长序列进行扩增和分析,并对其功能域蛋白进行表达与纯化。方法基于前期克隆的AdVg基因cDNA片段,利用RACE PCR技术,扩增AdVg基因的5′末端及3′末端序列。用Vector NTI软件将测序得到的AdVg cDNA片段、5′末端序列、3′末端序列进行校正,拼接得到完整的AdVg cDNA全长序列。对AdVg全长序列进行功能域预测。利用pet28a(+)构建重组质粒进行AdVg功能域蛋白的表达与纯化。结果成功获得AdVg基因全长cDNA序列,包括117 bp的5′UTR序列、192 bp的3′UTR序列和6 186 bp的ORF序列。AdVg蛋白主要包含Vit N、DUF1943及vWD 3个结构域。通过构建重组质粒,成功表达和纯化了AdVg Vit N功能域蛋白。结论成功克隆了大劣按蚊卵黄蛋白原基因的全长序列,并获得了重组蛋白。 展开更多
关键词 大劣按蚊 卵黄蛋白原基因 RACE扩增 蛋白表达与纯化
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罗沙司他调控线粒体分裂与融合减轻热射病小鼠脑损伤
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作者 周欢 黄雪妍 +4 位作者 申婷婷 张伯翼 何根林 罗雪 杨学森 《陆军军医大学学报》 CAS 2024年第19期2208-2217,共10页
目的探究缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)脯氨酰羟化酶(prolyl hydroxylase,PHD)抑制剂罗沙司他(FG-4592)对热射病(heat stroke,HS)导致的脑损伤的保护作用及其机制。方法选取140只6~8周龄的雄性C57BL/6J小鼠,体质量为18~2... 目的探究缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)脯氨酰羟化酶(prolyl hydroxylase,PHD)抑制剂罗沙司他(FG-4592)对热射病(heat stroke,HS)导致的脑损伤的保护作用及其机制。方法选取140只6~8周龄的雄性C57BL/6J小鼠,体质量为18~22 g。其中40只按随机数字表法分为热射病(HS)组,罗沙司他低剂量(LD,5 mg/kg)组、中剂量(MD,10 mg/kg)组、高剂量(HD,20 mg/kg)组,每组10只,进行热打击实验,观察各组小鼠24 h生存情况,确定最佳给药剂量。另外100只小鼠按随机数字表法分为正常对照(Control)组、罗沙司他(FG-4592)组、热射病(HS)组、罗沙司他+热射病(FG-4592+HS)组,每组25只,进行热打击实验,建立HS动物模型。采用改良神经功能缺损评分(modified neurological severity score,mNSS)评价神经功能,脑切片HE染色观察病理损伤情况;Fluoro-Jade C染色观察神经元变性;测定脑组织总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量评价氧化应激情况;透射电镜观察线粒体损伤;Western blot检测大脑皮层中Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Mfn1、Mfn2、Opa1、Drp1、p-Drp1(Ser616)、Fis1、HIF-1α、HO-1蛋白表达水平。结果与HS组比较,FG-4592可以显著提高热射病小鼠24 h内的生存率,且MD组生存率最高。与Control组比较,HS组小鼠mNSS评分增加(P<0.05),大脑皮层MDA含量增加(P<0.05),总SOD活性降低(P<0.05),且大脑皮层组织出现显著病理损伤和神经元变性,大脑皮层组织线粒体结构明显损伤,Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Fis1、HIF-1α、HO-1蛋白表达和p-Drp1(Ser616)/Drp1比值升高(P<0.05),Mfn1、Mfn2、Opa1蛋白表达降低(P<0.05)。经FG-4592预处理后显著降低HS小鼠的mNSS评分(P<0.05),降低了组织MDA含量(P<0.05),增加了总SOD活性(P<0.05);同时FG-4592预处理改善了大脑皮层组织病理损伤、减轻了神经元变性和线粒体结构损伤,并降低了Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Fis1蛋白表达和p-Drp1(Ser616)/Drp1比值(P<0.05),增加了Mfn1、Mfn2、Opa1、HIF-1α、HO-1蛋白表达(P<0.05)。结论罗沙司他调控线粒体分裂融合平衡,减轻线粒体结构损伤,减少氧化应激和细胞凋亡,减轻热射病脑损伤。 展开更多
关键词 罗沙司他 热射病 氧化应激 线粒体 缺氧诱导因子1-α
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