单细胞测序在造血系统研究中的应用与展望 被引量：3

1

作者 王军平 陈乃成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期1603-1610,共8页

目的单细胞测序(single cell sequencing,SCS)是一项在细胞个体层面进行精准化分析的技术。它提供了全新的角度去识别单个细胞的种类、功能、状态,以及与其他细胞的相互关联,极大深化了人们对细胞异质性、基因与分子功能多样性等方面的... 目的单细胞测序(single cell sequencing,SCS)是一项在细胞个体层面进行精准化分析的技术。它提供了全新的角度去识别单个细胞的种类、功能、状态,以及与其他细胞的相互关联,极大深化了人们对细胞异质性、基因与分子功能多样性等方面的理解。随着各个技术环节的不断优化,SCS技术已广泛应用于多个研究领域,其中造血系统研究便是该技术运用的范例。SCS不仅在基础研究中,协助完成了生理和病理生理条件下的相关造血细胞图谱的构建,探索了血细胞发育分化的可能路径,而且在临床诊治过程中,有效推动疾病发生、进展和转归等机制的破解,促进个体疗效差异显著、易于复发等现象的潜在因素的挖掘。现就SCS的技术概况、发展趋势及其在造血系统的应用进行评述,以期为后续SCS技术的积极与合理应用提供参考。 展开更多

关键词 单细胞测序 造血系统 发育与分化 临床治疗

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支气管喷入高剂量贫铀染毒犬模型早期损伤特点研究 被引量：2

2

作者 付维林 陈翔宇 +5 位作者 李蓉 朱勇 田铸 曾峰 肖瑶 刘明华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期52-58,共7页

目的探索经支气管喷入高剂量贫铀混悬液染毒早期对机体的损伤特点。方法高剂量贫铀(20 mg/kg)经支气管喷入染毒,建立急性肺损伤染毒犬模型。于沾染前,沾染后3、8 h和1、2、3、5、7 d行血铀含量、动脉血气、血常规、肝功能、肾功能、心... 目的探索经支气管喷入高剂量贫铀混悬液染毒早期对机体的损伤特点。方法高剂量贫铀(20 mg/kg)经支气管喷入染毒,建立急性肺损伤染毒犬模型。于沾染前,沾染后3、8 h和1、2、3、5、7 d行血铀含量、动脉血气、血常规、肝功能、肾功能、心肌酶谱、细胞因子等检测及胸部CT检查。结果染毒犬沾染后各时相点血铀含量均高于沾染前(P<0.05),且沾染后8 h和1、2、3、5、7 d低于沾染后3 h(P<0.01),沾染后8 h和7 d高于沾染后1、2、3、5 d(P<0.05);与沾染前相比,白细胞、中性粒细胞计数于沾染后8 h、5 d升高(P<0.05);CK、CK-MB、AST于沾染后3 h升高(P<0.05),肌酐于沾染后5、7 d升高(P<0.01);IL-8于沾染后3、5 d升高(P<0.05)。沾染后各时相点肺部阴影得分均高于沾染前(P<0.01),且沾染后3、8 h得分与其他时相点相比差异均有统计学意义(P<0.01),沾染后1 d得分高于沾染后5、7 d(P<0.05)。结论高剂量贫铀经支气管喷入染毒下,其在机体内的分布速率可能符合二房室模型;沾染后8 h肺部出现严重炎症反应;沾染后5 d肾功能明显受损,且血铀含量随之复升。 展开更多

关键词 贫铀 高剂量 呼吸道染毒 血液指标 肺部影像

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血小板膜修饰过氧化氢酶/二氧化硅纳米粒抑制机体辐射感染

3

作者 熊太农 李陈文娅 +3 位作者 陈银 韩松伶 王成 王军平 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第6期602-612,共11页

目的通过制备能够靶向白细胞的血小板膜修饰过氧化氢酶/二氧化硅纳米粒(platelet membrane modified catalase/silica nanoparticles,PCNP),为辐射感染并发症的防治提供有效策略。方法利用血小板膜、过氧化氢酶(catalase,CAT)以及二氧... 目的通过制备能够靶向白细胞的血小板膜修饰过氧化氢酶/二氧化硅纳米粒(platelet membrane modified catalase/silica nanoparticles,PCNP),为辐射感染并发症的防治提供有效策略。方法利用血小板膜、过氧化氢酶(catalase,CAT)以及二氧化硅制备PCNP以及过氧化氢酶/二氧化硅纳米粒(catalase/silica nanoparticles,CNP),并通过细胞存活实验、溶血实验以及小鼠尾静脉给药后急性毒性实验初步评估PCNP生物安全性;培养基、FITC标记的PCNP(FITC^(+)PCNP)及FITC标记的CNP(FITC^(+)CNP)分别与人外周血B淋巴细胞(AHH-1)和小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)共孵育,分为对照组、FITC^(+)PCNP组及FITC^(+)CNP组,利用激光共聚焦观察细胞内荧光强度来评价PCNP的白细胞靶向功能;将AHH-1分为对照组、辐照组、血小板膜组、CNP(100μg/mL)组和PCNP(100μg/mL)组,与培养基、培养基、血小板膜混悬液、CNP或PCNP溶液共孵育后进行6 Gy Co~(60)γ射线辐照,通过检测羟自由基等活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平及细胞凋亡情况评估纳米粒体外减轻白细胞放射损伤的作用;20只C57BL/6雄性小鼠(体质量18~20 g)简单随机抽样分为(n=10):辐照组与10mg/kg PCNP组,小鼠尾静脉注射生理盐水或PCNP后2 h时进行5 Gy Co~(60)γ射线全身辐照,辐照后2 h时再腹腔注射多重耐药鲍曼不动杆菌(multidrug-resistant Acinetobacter baumannii MDR-AB),通过检测主要脏器细菌载量评估纳米药物抑制辐照后感染效应。结果PCNP水合粒径为91.3 nm,其在低于400μg/mL的浓度下未表现出明显的细胞毒性及溶血毒性;小鼠尾静脉注射PCNP(20mg/kg)后体质量正常增长,心、肝、脾、肺、肾等主要脏器组织未出现病理改变;在AHH-1和RAW264.7细胞中,与FITC^(+)CNP组相比,PCNP的靶向性都具有显著优势[(15.45±3.48)%vs(9.33±2.03)%,P<0.01;(11.25±2.08)%vs(7.06±0.71)%,P<0.001];细胞防护能力检测实验中,与辐照组相比,PCNP能有效降低AHH-1细胞ROS水平[(22.73±3.71)%vs(60.90±9.08)%,P<0.001]及凋亡率[(9.84±0.92)%vs(38.96±3.62)%,P<0.001];小鼠辐照后细菌定植实验表明PCNP干预的小鼠脾脏MDR-AB定植数量显著少于辐照组[(17.50±1.38)×10~4 vs(13.20±2.29)×10~6 CFU/g,P<0.001]。结论PCNP能有效抑制机体辐射感染并发症,其对白细胞的直接保护作用可能是抗感染作用的主要机制。 展开更多

关键词 辐射感染 过氧化氢酶 白细胞靶向 血小板膜修饰纳米粒

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骨髓嵌合促进Lewis肺腺癌细胞体内生长及转移的实验研究 被引量：1

4

作者 韩潇 刘登群 +1 位作者 罗丹 刘国祥 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第21期1932-1941,共10页

目的研究骨髓移植对近交系C57BL/6(C57) 6～8周龄的野生雌性小鼠皮下接种Lewis肺腺癌细胞成瘤及转移能力的影响。方法采用随机数字表法抽取20只野生小鼠作为受体小鼠,通过8 Gy全身照射破坏受体小鼠骨髓造血系统,再通过尾静脉注射向受体... 目的研究骨髓移植对近交系C57BL/6(C57) 6～8周龄的野生雌性小鼠皮下接种Lewis肺腺癌细胞成瘤及转移能力的影响。方法采用随机数字表法抽取20只野生小鼠作为受体小鼠,通过8 Gy全身照射破坏受体小鼠骨髓造血系统,再通过尾静脉注射向受体小鼠移植正常小鼠的骨髓细胞,建立骨髓嵌合小鼠模型。随后将其分为对照B组和荷瘤组(每组10只),再使用随机数字表法取20只同批次未处理的野生小鼠分为对照A组和荷瘤组(每组10只)。分别向骨髓嵌合小鼠和野生小鼠背部皮下注射Lewis肺腺癌细胞获得皮下荷瘤模型,通过比较起瘤时间,肿瘤增长速度,离体瘤质量及肝、肺的转移情况,评价骨髓移植对C57BL/6小鼠皮下荷瘤模型的影响。结果皮下荷瘤后,骨髓嵌合小鼠较正常小鼠起瘤时间提早2 d,接种后第5天即可触及肿瘤;相同荷瘤时间,骨髓嵌合小鼠肿瘤体积增长更快,且离体瘤质量增加49. 27%(P <0. 01),并可观察到肺部有明显的肿瘤细胞转移。结论骨髓嵌合后C57小鼠相对正常C57小鼠更适于皮下荷瘤造模,其肿瘤生长更大,更容易发生转移。 展开更多

关键词 Lewis肺腺癌细胞 骨髓嵌合 荷瘤模型 C57小鼠

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乙二醇壳聚糖-二乙烯三胺五乙酸的合成及相对安全性研究

5

作者 曾峰 付维林 +5 位作者 李蓉 李涛 肖瑶 张翼 陈翔宇 刘明华 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期967-974,共8页

目的合成乙二醇壳聚糖-二乙烯三胺五乙酸(glycol chitosan-diethylenetriamine pentaacetic acid,GC-DTPA)并验证其细胞相容性及常规使用剂量范围内全身毒性。方法通过有机合成、化学交联方法等将二乙烯三胺五乙酸(diethylenetriamine p... 目的合成乙二醇壳聚糖-二乙烯三胺五乙酸(glycol chitosan-diethylenetriamine pentaacetic acid,GC-DTPA)并验证其细胞相容性及常规使用剂量范围内全身毒性。方法通过有机合成、化学交联方法等将二乙烯三胺五乙酸(diethylenetriamine pentaacetic acid,DTPA)接枝到乙二醇壳聚糖(Glycol Chitosan,GC)上,核磁共振氢谱(proton nuclear magnetic resonance,^(1)H NMR)及傅立叶变换红外光谱(Fourier transform infrared,FT-IR)对GC-DTPA进行表征。CCK8法检测不同浓度GC-DTPA对ICE-6细胞增殖的影响。6~8周龄健康SPF级SD大鼠80只,雌雄不拘,体质量180~220 g。随机分为GC-DTPA 60、90、120 mg/kg实验组与对照组(给予同等剂量生理盐水),每组20只。观察各组大鼠体质量变化及存活率,全自动血液体液分析仪及全自动生化免疫分析仪检测14 d血常规、血生化;HE染色系统显微镜观察各器官病理学变化。结果经FT-IR、^(1)H NMR表征,DTPA成功接枝到GC上。不同浓度GC-DTPA组的细胞相对存活率均在90%以上;给药14 d后各剂量组大鼠血常规、血生化等指标差异无临床意义,各器官组织病理未见损伤性改变。结论有机合成、化学交联方法合成的GC-DTPA未见明显细胞毒性;口服给药至120 mg/kg时未见明显全身毒性。 展开更多

关键词 壳聚糖 二乙烯三胺五乙酸 细胞相容性 全身毒性

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高分辨比色探针快速可视化检测水溶液中铜离子 被引量：1

6

作者 唐红 陈默 韩松伶 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期2239-2243,共5页

目的构建特异性识别水中铜离子(Cu^(2+))并快速显色的化学比色探针。方法基于BODIPY荧光染料设计合成Cu^(2+)比色探针BBSCP,紫外-可见光分光光度法评价探针对水中Cu^(2+)的显色能力,加入常见金属离子后评价比色探针的抗干扰能力。结果BB... 目的构建特异性识别水中铜离子(Cu^(2+))并快速显色的化学比色探针。方法基于BODIPY荧光染料设计合成Cu^(2+)比色探针BBSCP,紫外-可见光分光光度法评价探针对水中Cu^(2+)的显色能力,加入常见金属离子后评价比色探针的抗干扰能力。结果BBSCP在485~670 nm波长范围内表现出较宽的吸收带,加入Cu^(2+)后,在465~600 nm区间出现蓝移,波段变尖,而其他金属离子没有引起变化;同时在Cu^(2+)溶液中加入等当量的其他常见金属离子后仍然保持Cu^(2+)显色能力。结论构建的比色探针BBSCP对水溶液中Cu^(2+)具有高度敏感性和选择稳定性,能作为快速检测水中Cu^(2+)的可视化探针广泛应用于生物诊断、食品等多个领域。 展开更多

关键词 比色探针 铜离子 可视化检测

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“类战争心身应激模型”的创新评价 被引量：1

7

作者 程天民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期275-276,共2页

《第三军医大学学报》2017年等24期发表了由我校全军肝胆外科研究所和心理学院两位专家联合撰写的文章《军事应激研究进展与类战争心身应激模型建立的思考》。读完以后,颇有所感。文章在回顾了与军事应激医学研究相关的国内外和军内外... 《第三军医大学学报》2017年等24期发表了由我校全军肝胆外科研究所和心理学院两位专家联合撰写的文章《军事应激研究进展与类战争心身应激模型建立的思考》。读完以后,颇有所感。文章在回顾了与军事应激医学研究相关的国内外和军内外研究现状后, 展开更多

关键词 类战争心身应激 创新评价

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辣椒素对造血干细胞稳态的影响

8

作者 曾浩 胡梦佳 +3 位作者 汤勇 芦玉凯 陈默 王军平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第22期2021-2026,共6页

目的 观察辣椒素对造血干细胞稳态的影响,并初步探讨其相关机制。方法 采用8～10周龄C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分成实验组和对照组,分别给予0. 4 mg/d辣椒素溶液和单纯溶剂灌胃建立动物模型。采用流式细胞术检测造血干细胞稳态变化... 目的 观察辣椒素对造血干细胞稳态的影响,并初步探讨其相关机制。方法 采用8～10周龄C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分成实验组和对照组,分别给予0. 4 mg/d辣椒素溶液和单纯溶剂灌胃建立动物模型。采用流式细胞术检测造血干细胞稳态变化。利用流式分选得到原代造血干细胞进行q-PCR,分析周期相关蛋白激酶CDK2、CDK6 mRNA表达水平。利用CD45. 1小鼠作为受体进行造血移植实验。结果 流式细胞术分析结果显示,实验组造血干/祖细胞（LSK）比例较对照组明显升高[（0. 299±0. 041）%vs（0. 177±0. 052）%,P 〈0. 01]。亚群分析显示,与对照组比较,实验组短期造血干细胞（ST-HSC）比例上升[（47. 48±3. 22）%vs（37. 63±1. 85）%,P 〈0. 01],造血祖细胞（MPP）比例下降[（40. 59±3. 04）%vs（50. 12±1. 95）%,P 〈0. 01]。周期分析结果显示,与对照组比较,实验组造血干/祖细胞增殖,G0期细胞数目下降。q-PCR结果也证实实验组CDK2、CDK6 mRNA表达增强。凋亡和竞争性骨髓移植结果两组差异无统计学意义（P〉 0. 05）。结论 辣椒素促进造血干细胞增殖,灌胃辣椒素能致短期造血功能增强。 展开更多

关键词 辣椒素 造血干细胞 增殖 干细胞稳态

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腺相关病毒过表达IL22可有效改善葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎 被引量：2

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作者 吴天宇 宋娅岚 +6 位作者 吴静峰 郑植元 张宁 周子默 唐红 王锋超 陈文生 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第19期1995-2006,共12页

目的探讨白介素22(IL22)在小鼠葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium salt,DSS)诱导的急性结肠炎中的作用及其机制。方法选取8周龄雄性同窝IL22敲除小鼠(IL22-/-)及对照基因型小鼠(IL22+/+)各3只,给予2组小鼠2.5%DSS自由饮水6 d、正常饮... 目的探讨白介素22(IL22)在小鼠葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium salt,DSS)诱导的急性结肠炎中的作用及其机制。方法选取8周龄雄性同窝IL22敲除小鼠(IL22-/-)及对照基因型小鼠(IL22+/+)各3只,给予2组小鼠2.5%DSS自由饮水6 d、正常饮水2 d构建小鼠急性结肠炎模型,记录小鼠体质量变化及疾病活动指数(disease activity index,DAI),干预8 d后行小鼠肠道内窥镜检查,测量2组小鼠结肠长度以及主要免疫器官脏器指数,采用Western blot检测白介素1α(IL1α)、白介素1β(IL1β)、白介素6(IL6)、肿瘤坏死因子α(TNFα)等促炎细胞因子蛋白水平表达;选取8周龄雄性C57BL/6小鼠建立腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)转染模型,给予DSS诱导结肠炎模型,设置PBS组(n=5)、AAV-mock+DSS组(n=5)、AAV-IL22+DSS组(n=5),采用免疫荧光检测各组结肠闭合小环蛋白1(ZO-1)、钙粘附蛋白(E-claudin)表达,采用Western blot检测IL22、闭合蛋白(Occludin)、信号传导及转录激活蛋白3(Stat3)、p-Stat3蛋白表达水平。结果与IL22+/+组比较,IL22-/-组小鼠在DSS诱导后第8天体质量显著降低(P<0.05),DAI评分(P<0.01)和肠镜评分显著升高(P<0.05),组织损伤加重,病理评分显著升高(P<0.01),促炎细胞因子IL1α、IL1β、cleaved-IL1β、IL6、TNFα表达上调(P<0.05)。与AAV-mock+DSS组相比,AAV-IL22+DSS组可逆转DSS诱导结肠炎,结肠组织炎症水平显著降低(P<0.05),免疫荧光结果示E-claudin表达显著升高(P<0.05),Western blot结果显示Occludin、p-Stat3表达水平显著增高(P<0.01)。结论IL22缺乏加重小鼠DSS诱导结肠炎,而通过AAV过表达IL22能增强结肠紧密连接蛋白表达,减少炎症浸润,缓解DSS肠炎,其机制可能与Jak/Stat3通路激活有关。 展开更多

关键词 白细胞介素22 腺相关病毒 炎症性肠病 葡聚糖硫酸钠 Jak/Stat3通路

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线粒体靶向小分子IR-61改善小鼠非酒精性脂肪肝 被引量：4

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作者 唐斌林 王亚伟 +2 位作者 祥蔚 缪洪明 史春梦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期296-301,共6页

目的探讨线粒体靶向七甲川花菁类荧光小分子IR-61对小鼠非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型的治疗效果。方法通过喂养高脂饲料建立NAFLD小鼠模型,腹腔注射磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)或IR-61... 目的探讨线粒体靶向七甲川花菁类荧光小分子IR-61对小鼠非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型的治疗效果。方法通过喂养高脂饲料建立NAFLD小鼠模型,腹腔注射磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)或IR-61,治疗18周后,取肝脏组织切片HE常规染色,显微镜下观察,采用酶比色法检测肝脏和血清甘油三酯(triglyceride,TG)含量,Real-time PCR和Western blot法检测固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP-1c)、乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl-Co A carboxylase-1,ACC1)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor-α,PPARα)和肉毒碱棕榈酰转移酶-1(carnitine palmitoyltransferase-1,CPT1)的mRNA及蛋白表达水平。结果 IR-61可降低高脂诱导的小鼠肝脏TG含量增加,抑制SREBP-1c、ACC1过度表达;同时增加肝脏PPARα、CPT1的表达(P<0.05);IR-61可明显改善小鼠肝脏的脂肪沉积。结论 IR-61通过抑制高脂诱导的脂肪合成代谢过度增强,促进肝脏脂肪酸氧化,减少肝脏甘油三酯沉积,从而改善非酒精性脂肪肝。 展开更多

关键词 IR-61 非酒精性脂肪肝 固醇调节元件结合蛋白1C 乙酰辅酶A羧化酶1

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成纤维细胞生长因子受体2对小肠上皮细胞增殖与分化的影响 被引量：1

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作者 唐才智 任泂 +6 位作者 高美娇 李旭东 杨杰 陈林 王军平 王锋超 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期847-854,共8页

目的探究成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,Fgfr2)功能缺失对成年小鼠小肠上皮细胞增殖和分化的影响。方法繁殖和培育小肠上皮Fgfr2条件性敲除小鼠,经他莫昔芬(tamoxifen)诱导,Western blot验证Fgfr2在肠... 目的探究成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,Fgfr2)功能缺失对成年小鼠小肠上皮细胞增殖和分化的影响。方法繁殖和培育小肠上皮Fgfr2条件性敲除小鼠,经他莫昔芬(tamoxifen)诱导,Western blot验证Fgfr2在肠上皮的特异性基因敲除情况;将诱导肠上皮敲除Fgfr2的小鼠作为实验组,同胎野生型小鼠作为对照组。利用免疫荧光技术对潘氏细胞和内分泌细胞占肠上皮细胞的比例进行计数,利用Alcian染色对杯状细胞占肠上皮细胞的比例进行计数;运用HE染色和免疫组化染色指标推断小肠上皮Fgfr2功能缺失对小肠上皮细胞增殖的影响。结果经过转基因小鼠繁殖后诱导,Western blot检测结果显示小肠上皮特定敲除的Fgfr2小鼠构建成功;免疫荧光和Alcian染色结果显示:与对照组小鼠比较,Fgfr2敲除小鼠的十二指肠、空肠和回肠上皮潘氏细胞数量增加(P<0.05),杯状细胞数量减少(P<0.05),而内分泌细胞数量不变(P>0.05);HE染色和免疫组化染色结果显示:绒毛长度和隐窝深度以及增殖细胞数目未见明显变化(P>0.05)。结论 Fgfr2介导的微环境信号可参与调控成年小鼠小肠上皮分泌系细胞分化,但对小肠上皮细胞增殖无显著影响。 展开更多

关键词 成纤维细胞生长因子受体2 小肠上皮 细胞分化 细胞增殖

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血小板反应蛋白-1敲除对放射性肺纤维化的影响及其机制 被引量：2

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作者 焦露 李杰 +2 位作者 张静 陈用来 郝玉徽 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期975-981,共7页

目的探讨血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)对放射性肺纤维化的影响及其可能机制。方法选取6~8周龄雄性野生型C57BL/6小鼠(wild type,WT)和全身性敲除TSP-1小鼠(TSP-1^(-/-)),将小鼠分为野生辐照组(WT+IR)和TSP-1敲除辐照组(TSP... 目的探讨血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)对放射性肺纤维化的影响及其可能机制。方法选取6~8周龄雄性野生型C57BL/6小鼠(wild type,WT)和全身性敲除TSP-1小鼠(TSP-1^(-/-)),将小鼠分为野生辐照组(WT+IR)和TSP-1敲除辐照组(TSP-1^(-/-)+IR),每组各6只。采用60 Coγ射线全肺照射16 Gy建立放射性肺纤维化小鼠模型。照射后第16周,HE染色观察小鼠肺组织形态变化,天狼猩红染色观察肺组织胶原表达水平,qRT-PCR法检测小鼠肺组织中TGF-β1和CollagenⅠ的mRNA表达水平,micro-CT评价肺损伤和肺实变情况,FlexiVent系统评价小鼠肺功能水平,免疫荧光染色检测肺组织LC-3和p62的蛋白表达,透射电镜观察肺组织细胞自噬体。结果与野生辐照组相比,TSP-1敲除辐照组小鼠肺损伤减轻,肺组织胶原沉积减少,TGF-β1和CollagenⅠ的mRNA表达水平显著降低(P<0.01),肺功能水平有所改善。免疫荧光和透射电镜结果显示TSP-1敲除辐照组小鼠肺组织出现细胞自噬。结论TSP-1敲除能够减轻放射性肺纤维化,其机制可能与细胞自噬激活有关。 展开更多

关键词 血小板反应蛋白-1 放射性肺纤维化 自噬 TGF-Β1 FlexiVent

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川陈皮素在体内外模型中对肠干细胞增殖的影响

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作者 吴静峰 郭科男 +5 位作者 张宁 吴天宇 周子默 陆治宇 王锋超 陈文生 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期2195-2205,共11页

目的探讨在体内外模型中常用有效剂量川陈皮素(nobiletin,NOB)对肠道干细胞的调节作用。方法构建小鼠结肠癌细胞系MC38的3D培养模型,加入不同浓度NOB,观察克隆死亡和存活。构建小鼠小肠类器官模型,在类器官培养体系中添加不同浓度的NOB... 目的探讨在体内外模型中常用有效剂量川陈皮素(nobiletin,NOB)对肠道干细胞的调节作用。方法构建小鼠结肠癌细胞系MC38的3D培养模型,加入不同浓度NOB,观察克隆死亡和存活。构建小鼠小肠类器官模型,在类器官培养体系中添加不同浓度的NOB,观察类器官的出芽和生长,利用MTT染色后的类器官成像进行面积和吸光值计算。在50、100μmol/L浓度NOB干预体系中不同时间撤掉NOB,观察类器官生长。在50μmol/L浓度NOB处理类器官的体系中分别加入R-spondin1、CHIR99021加强Wnt通路激活信号,观察类器官的生长。对C57/B6J小鼠灌胃不同浓度NOB,连续给药4 d,观察肠道隐窝和绒毛长度比,观察隐窝细胞凋亡,以及隐窝底部干细胞龛中Olfm4/BrdU染色阳性的细胞数量。结果与对照组相比,50μmol/L NOB即可显著促进肿瘤细胞MC38成球后死亡,显著降低克隆形成率(P<0.001)。与对照组相比,NOB从50μmol/L起可以显著抑制肠类器官的出芽,50~200μmol/L NOB可以显著抑制类器官的生长(P<0.001),并且具有剂量依赖效应;NOB撤药后在50μmol/L时肠类器官生长容易恢复,在100μmol/L时难以恢复到正常水平。增强Wnt通路的激活可以部分挽救NOB对肠类器官的抑制作用。在体给予高于常用浓度的NOB不能诱导肠隐窝细胞凋亡,不影响肠干细胞的数目和增殖,不影响隐窝和绒毛比。结论NOB具有抑制正常肠干细胞的能力,可能通过调控干细胞相关通路如Wnt发挥作用,但其在在体不能发挥抑制干细胞增殖的效应;这提示NOB在常规浓度应用的安全性,同时提醒对NOB在在体肿瘤模型中发挥的抑制作用需要进行更深入的评估。 展开更多

关键词 川陈皮素 小肠干细胞 小肠类器官 细胞增殖 在体

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聚乙二醇化吲哚花菁小分子的合成及其抗肾癌细胞活性评价

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作者 吴自飞 罗圣霖 +4 位作者 黄燮 杜在芝 袁少隆 刘晶 王卫东 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期656-664,共9页

目的在前期发现具有肿瘤靶向性的吲哚花菁小分子的结构基础上,对其进行聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)水溶性修饰,并评价其理化性质和肿瘤靶向光动力治疗作用。方法分别以2,3,3-三甲基吲哚、聚乙二醇单甲醚为原料,设计并化学合成PE... 目的在前期发现具有肿瘤靶向性的吲哚花菁小分子的结构基础上,对其进行聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)水溶性修饰,并评价其理化性质和肿瘤靶向光动力治疗作用。方法分别以2,3,3-三甲基吲哚、聚乙二醇单甲醚为原料,设计并化学合成PEG修饰吲哚花菁小分子,采用核磁氢谱、质谱等检测、表征其化学结构;通过水溶性比较、光学性质表征、肾脏正常细胞HK-2与肿瘤细胞RENCA摄入比较、细胞活力测试、单线态氧以及细胞活性氧测定等,评价其理化性质与肿瘤靶向光动力作用。结果通过汇聚合成策略,经过6步化学反应,成功合成PEG修饰的吲哚花菁小分子PEG-808-NM2,其结构经核磁氢谱、质谱等确证。与808-NM2相比,PEG-808-NM2水溶性显著增加,在甲醇和PBS中均表现出优异的近红外荧光特性。PEG-808-NM2优先被肾癌细胞RENCA摄取,并在808 nm激光照射下,诱导产生大量的单线态氧和细胞内活性氧自由基。结论合成的PEG-808-NM2在保留吲哚花菁小分子原有的肿瘤靶向、近红外成像作用基础上显著改善其理化及光敏特性,对肾癌细胞具有显著的光动力治疗作用。 展开更多

关键词 吲哚花菁 聚乙二醇 肿瘤靶向 光动力治疗 肾癌

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