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单细胞测序在造血系统研究中的应用与展望 被引量:3
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作者 王军平 陈乃成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期1603-1610,共8页
目的单细胞测序(single cell sequencing,SCS)是一项在细胞个体层面进行精准化分析的技术。它提供了全新的角度去识别单个细胞的种类、功能、状态,以及与其他细胞的相互关联,极大深化了人们对细胞异质性、基因与分子功能多样性等方面的... 目的单细胞测序(single cell sequencing,SCS)是一项在细胞个体层面进行精准化分析的技术。它提供了全新的角度去识别单个细胞的种类、功能、状态,以及与其他细胞的相互关联,极大深化了人们对细胞异质性、基因与分子功能多样性等方面的理解。随着各个技术环节的不断优化,SCS技术已广泛应用于多个研究领域,其中造血系统研究便是该技术运用的范例。SCS不仅在基础研究中,协助完成了生理和病理生理条件下的相关造血细胞图谱的构建,探索了血细胞发育分化的可能路径,而且在临床诊治过程中,有效推动疾病发生、进展和转归等机制的破解,促进个体疗效差异显著、易于复发等现象的潜在因素的挖掘。现就SCS的技术概况、发展趋势及其在造血系统的应用进行评述,以期为后续SCS技术的积极与合理应用提供参考。 展开更多
关键词 单细胞测序 造血系统 发育与分化 临床治疗
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骨髓嵌合促进Lewis肺腺癌细胞体内生长及转移的实验研究 被引量:2
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作者 韩潇 刘登群 +1 位作者 罗丹 刘国祥 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第21期1932-1941,共10页
目的研究骨髓移植对近交系C57BL/6(C57) 6~8周龄的野生雌性小鼠皮下接种Lewis肺腺癌细胞成瘤及转移能力的影响。方法采用随机数字表法抽取20只野生小鼠作为受体小鼠,通过8 Gy全身照射破坏受体小鼠骨髓造血系统,再通过尾静脉注射向受体... 目的研究骨髓移植对近交系C57BL/6(C57) 6~8周龄的野生雌性小鼠皮下接种Lewis肺腺癌细胞成瘤及转移能力的影响。方法采用随机数字表法抽取20只野生小鼠作为受体小鼠,通过8 Gy全身照射破坏受体小鼠骨髓造血系统,再通过尾静脉注射向受体小鼠移植正常小鼠的骨髓细胞,建立骨髓嵌合小鼠模型。随后将其分为对照B组和荷瘤组(每组10只),再使用随机数字表法取20只同批次未处理的野生小鼠分为对照A组和荷瘤组(每组10只)。分别向骨髓嵌合小鼠和野生小鼠背部皮下注射Lewis肺腺癌细胞获得皮下荷瘤模型,通过比较起瘤时间,肿瘤增长速度,离体瘤质量及肝、肺的转移情况,评价骨髓移植对C57BL/6小鼠皮下荷瘤模型的影响。结果皮下荷瘤后,骨髓嵌合小鼠较正常小鼠起瘤时间提早2 d,接种后第5天即可触及肿瘤;相同荷瘤时间,骨髓嵌合小鼠肿瘤体积增长更快,且离体瘤质量增加49. 27%(P <0. 01),并可观察到肺部有明显的肿瘤细胞转移。结论骨髓嵌合后C57小鼠相对正常C57小鼠更适于皮下荷瘤造模,其肿瘤生长更大,更容易发生转移。 展开更多
关键词 Lewis肺腺癌细胞 骨髓嵌合 荷瘤模型 C57小鼠
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辣椒素对造血干细胞稳态的影响
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作者 曾浩 胡梦佳 +3 位作者 汤勇 芦玉凯 陈默 王军平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第22期2021-2026,共6页
目的 观察辣椒素对造血干细胞稳态的影响,并初步探讨其相关机制。方法 采用8~10周龄C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分成实验组和对照组,分别给予0. 4 mg/d辣椒素溶液和单纯溶剂灌胃建立动物模型。采用流式细胞术检测造血干细胞稳态变化... 目的 观察辣椒素对造血干细胞稳态的影响,并初步探讨其相关机制。方法 采用8~10周龄C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分成实验组和对照组,分别给予0. 4 mg/d辣椒素溶液和单纯溶剂灌胃建立动物模型。采用流式细胞术检测造血干细胞稳态变化。利用流式分选得到原代造血干细胞进行q-PCR,分析周期相关蛋白激酶CDK2、CDK6 mRNA表达水平。利用CD45. 1小鼠作为受体进行造血移植实验。结果 流式细胞术分析结果显示,实验组造血干/祖细胞(LSK)比例较对照组明显升高[(0. 299±0. 041)%vs(0. 177±0. 052)%,P 〈0. 01]。亚群分析显示,与对照组比较,实验组短期造血干细胞(ST-HSC)比例上升[(47. 48±3. 22)%vs(37. 63±1. 85)%,P 〈0. 01],造血祖细胞(MPP)比例下降[(40. 59±3. 04)%vs(50. 12±1. 95)%,P 〈0. 01]。周期分析结果显示,与对照组比较,实验组造血干/祖细胞增殖,G0期细胞数目下降。q-PCR结果也证实实验组CDK2、CDK6 mRNA表达增强。凋亡和竞争性骨髓移植结果两组差异无统计学意义(P〉 0. 05)。结论 辣椒素促进造血干细胞增殖,灌胃辣椒素能致短期造血功能增强。 展开更多
关键词 辣椒素 造血干细胞 增殖 干细胞稳态
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线粒体靶向小分子IR-61改善小鼠非酒精性脂肪肝 被引量:4
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作者 唐斌林 王亚伟 +2 位作者 祥蔚 缪洪明 史春梦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期296-301,共6页
目的探讨线粒体靶向七甲川花菁类荧光小分子IR-61对小鼠非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型的治疗效果。方法通过喂养高脂饲料建立NAFLD小鼠模型,腹腔注射磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)或IR-61... 目的探讨线粒体靶向七甲川花菁类荧光小分子IR-61对小鼠非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型的治疗效果。方法通过喂养高脂饲料建立NAFLD小鼠模型,腹腔注射磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)或IR-61,治疗18周后,取肝脏组织切片HE常规染色,显微镜下观察,采用酶比色法检测肝脏和血清甘油三酯(triglyceride,TG)含量,Real-time PCR和Western blot法检测固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP-1c)、乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl-Co A carboxylase-1,ACC1)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor-α,PPARα)和肉毒碱棕榈酰转移酶-1(carnitine palmitoyltransferase-1,CPT1)的mRNA及蛋白表达水平。结果 IR-61可降低高脂诱导的小鼠肝脏TG含量增加,抑制SREBP-1c、ACC1过度表达;同时增加肝脏PPARα、CPT1的表达(P<0.05);IR-61可明显改善小鼠肝脏的脂肪沉积。结论 IR-61通过抑制高脂诱导的脂肪合成代谢过度增强,促进肝脏脂肪酸氧化,减少肝脏甘油三酯沉积,从而改善非酒精性脂肪肝。 展开更多
关键词 IR-61 非酒精性脂肪肝 固醇调节元件结合蛋白1C 乙酰辅酶A羧化酶1
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成纤维细胞生长因子受体2对小肠上皮细胞增殖与分化的影响 被引量:1
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作者 唐才智 任泂 +6 位作者 高美娇 李旭东 杨杰 陈林 王军平 王锋超 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期847-854,共8页
目的探究成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,Fgfr2)功能缺失对成年小鼠小肠上皮细胞增殖和分化的影响。方法繁殖和培育小肠上皮Fgfr2条件性敲除小鼠,经他莫昔芬(tamoxifen)诱导,Western blot验证Fgfr2在肠... 目的探究成纤维细胞生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,Fgfr2)功能缺失对成年小鼠小肠上皮细胞增殖和分化的影响。方法繁殖和培育小肠上皮Fgfr2条件性敲除小鼠,经他莫昔芬(tamoxifen)诱导,Western blot验证Fgfr2在肠上皮的特异性基因敲除情况;将诱导肠上皮敲除Fgfr2的小鼠作为实验组,同胎野生型小鼠作为对照组。利用免疫荧光技术对潘氏细胞和内分泌细胞占肠上皮细胞的比例进行计数,利用Alcian染色对杯状细胞占肠上皮细胞的比例进行计数;运用HE染色和免疫组化染色指标推断小肠上皮Fgfr2功能缺失对小肠上皮细胞增殖的影响。结果经过转基因小鼠繁殖后诱导,Western blot检测结果显示小肠上皮特定敲除的Fgfr2小鼠构建成功;免疫荧光和Alcian染色结果显示:与对照组小鼠比较,Fgfr2敲除小鼠的十二指肠、空肠和回肠上皮潘氏细胞数量增加(P<0.05),杯状细胞数量减少(P<0.05),而内分泌细胞数量不变(P>0.05);HE染色和免疫组化染色结果显示:绒毛长度和隐窝深度以及增殖细胞数目未见明显变化(P>0.05)。结论 Fgfr2介导的微环境信号可参与调控成年小鼠小肠上皮分泌系细胞分化,但对小肠上皮细胞增殖无显著影响。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子受体2 小肠上皮 细胞分化 细胞增殖
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