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小鼠端粒酶蛋白亚单位重组腺病毒载体的构建及鉴定
被引量：
2
1
作者
姜楠
陆敏强
+5 位作者
李华
蔡常洁
杨扬
许赤
冯炼强
陈规划
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期11-14,共4页
目的构建小鼠端粒酶蛋白亚单位(mousetelomerasereversetranscriptase,mTERT)基因重组腺病毒载体,为下一步研究其体外表达和动物实验研究提供基础。方法从肝癌细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增mTERT的基因编码区序列,将序列定向克隆...
目的构建小鼠端粒酶蛋白亚单位(mousetelomerasereversetranscriptase,mTERT)基因重组腺病毒载体,为下一步研究其体外表达和动物实验研究提供基础。方法从肝癌细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增mTERT的基因编码区序列,将序列定向克隆至真核表达载体pAC,将此表达质粒与腺病毒重组质粒pJM17共同转染293细胞,经同源重组产生重组腺病毒载体Ad-mTERT,纯化后的重组腺病毒载体Ad-mTERT在293细胞大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化,测定病毒滴度。结果PCR及酶切证实:mTERTDNA正确克隆到穿梭质粒pAC中,带mTERTDNA的表达盒成功重组到腺病毒载体基因组E1A缺失区,并在293细胞中成功包装出具有感染活性的重组腺病毒Ad-mTERT。结论成功构建了小鼠TERT基因重组腺病毒载体,为研究其用于肿瘤的基因治疗奠定基础。
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关键词
小鼠端粒酶蛋白亚单位
重组腺病毒载体
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职称材料
题名
小鼠端粒酶蛋白亚单位重组腺病毒载体的构建及鉴定
被引量：
2
1
作者
姜楠
陆敏强
李华
蔡常洁
杨扬
许赤
冯炼强
陈规划
机构
中山大学
附
属第
三
医院
肝脏
移植
中心//
器官
移植
研究所
附中山大学属第三医院肝脏移植中心//器官移植研究所
中山大学
中山
医学院免疫学教研室
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期11-14,共4页
基金
国家重点基础研究发展计划(973计划)基金资助项目(2003CB515507)
文摘
目的构建小鼠端粒酶蛋白亚单位(mousetelomerasereversetranscriptase,mTERT)基因重组腺病毒载体,为下一步研究其体外表达和动物实验研究提供基础。方法从肝癌细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增mTERT的基因编码区序列,将序列定向克隆至真核表达载体pAC,将此表达质粒与腺病毒重组质粒pJM17共同转染293细胞,经同源重组产生重组腺病毒载体Ad-mTERT,纯化后的重组腺病毒载体Ad-mTERT在293细胞大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化,测定病毒滴度。结果PCR及酶切证实:mTERTDNA正确克隆到穿梭质粒pAC中,带mTERTDNA的表达盒成功重组到腺病毒载体基因组E1A缺失区,并在293细胞中成功包装出具有感染活性的重组腺病毒Ad-mTERT。结论成功构建了小鼠TERT基因重组腺病毒载体,为研究其用于肿瘤的基因治疗奠定基础。
关键词
小鼠端粒酶蛋白亚单位
重组腺病毒载体
Keywords
mouse telomerase reverse tranacriptase
recombinant adenovirus vector
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小鼠端粒酶蛋白亚单位重组腺病毒载体的构建及鉴定
姜楠
陆敏强
李华
蔡常洁
杨扬
许赤
冯炼强
陈规划
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
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