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山羊FST慢病毒载体构建及其对卵巢卵泡颗粒细胞增殖的影响
被引量：
7
1
作者
凌英会
朱露
+5 位作者
吴昊
陈青
权青
刘勇
李文雍
张运海
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第9期1690-1698,共9页
研究卵泡抑素(FST)对山羊卵巢卵泡颗粒细胞增殖的影响。采集山羊卵巢组织、分离培养原代卵巢卵泡颗粒细胞,RT-PCR克隆山羊FST,设计shRNA片段,构建慢病毒过表达载体和干扰载体,感染原代卵巢卵泡颗粒细胞,qPCR技术检测过表达与干扰的效果,...
研究卵泡抑素(FST)对山羊卵巢卵泡颗粒细胞增殖的影响。采集山羊卵巢组织、分离培养原代卵巢卵泡颗粒细胞,RT-PCR克隆山羊FST,设计shRNA片段,构建慢病毒过表达载体和干扰载体,感染原代卵巢卵泡颗粒细胞,qPCR技术检测过表达与干扰的效果, CCK-8检测细胞的增殖效果。结果显示:分离培养的山羊卵巢卵泡颗粒细胞经促卵泡素受体(FSHR)免疫荧光鉴定,阳性率为95%;慢病毒感染颗粒细胞时荧光蛋白的表达占比80%;qPCR验证FST过表达和干扰慢病毒载体的效果均显著(P<0.05);过表达FST显著(P<0.05)抑制卵巢卵泡颗粒细胞的增殖,干扰FST显著(P<0.05)促进卵巢卵泡颗粒细胞增殖。笔者分离出山羊卵巢卵泡颗粒细胞,成功构建FST过表达和干扰两种慢病毒载体,感染结果表明FST能够抑制山羊卵巢卵泡颗粒细胞的增殖,为进一步研究FST在哺乳动物卵泡发育调控中的作用及其机制提供了基础资料。
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关键词
FST基因
卵巢卵泡颗粒细胞
慢病毒载体
SHRNA
过表达载体
细胞增殖
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职称材料
热应激对猪卵母细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性及染色质构型的影响
被引量：
1
2
作者
刘勇
张领
+8 位作者
吴晓庆
卫朝辉
王艳红
王启磾
高迪
丁彪
吴风瑞
王荣
李文雍
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2016年第1期22-27,共6页
将屠宰场采集的猪卵巢分为热应激组和对照组,分别检测两组未成熟卵母细胞的各项指标。利用亮甲酚蓝染色法研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性,对比分析热应激对细胞代谢活性的影响;利用Hoechst33342标记DNA区分染色质构型,对比分析热应激对细...
将屠宰场采集的猪卵巢分为热应激组和对照组,分别检测两组未成熟卵母细胞的各项指标。利用亮甲酚蓝染色法研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性,对比分析热应激对细胞代谢活性的影响;利用Hoechst33342标记DNA区分染色质构型,对比分析热应激对细胞染色质构型的影响。结果表明:热应激组卵母细胞BCB+比例显著低于对照组(P<0.05)。热应激组卵母细胞的各期染色质构型比例与对照组比例差异不显著(P>0.05)。BCB+和BCB-组卵母细胞GV1-GV3染色质构型差异不显著(P>0.05),但对照组BCB+卵母细胞的GV4构型比例明显高于BCB-(P<0.05),且GVBD差异不显著(P>0.05);而热应激组BCB+卵母细胞的GVBD比例明显低于BCB-(P>0.05),且GV4差异不显著(P>0.05)。综上,热应激对猪未成熟卵母细胞造成的损伤主要是影响了细胞的代谢活性,对细胞染色质构型的影响不大。
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关键词
染色质构型
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
猪卵母细胞
热应激
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职称材料
题名
山羊FST慢病毒载体构建及其对卵巢卵泡颗粒细胞增殖的影响
被引量：
7
1
作者
凌英会
朱露
吴昊
陈青
权青
刘勇
李文雍
张运海
机构
安徽
农业大学动物科技
学院
安徽
地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级
实验室
阜阳师范学院胚胎发育与生殖调节安徽省重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第9期1690-1698,共9页
基金
国家重点研发计划项目(2018YFD0502001)
国家自然科学基金(31772566)
安徽省重点研发计划项目(1804a07020128)
文摘
研究卵泡抑素(FST)对山羊卵巢卵泡颗粒细胞增殖的影响。采集山羊卵巢组织、分离培养原代卵巢卵泡颗粒细胞,RT-PCR克隆山羊FST,设计shRNA片段,构建慢病毒过表达载体和干扰载体,感染原代卵巢卵泡颗粒细胞,qPCR技术检测过表达与干扰的效果, CCK-8检测细胞的增殖效果。结果显示:分离培养的山羊卵巢卵泡颗粒细胞经促卵泡素受体(FSHR)免疫荧光鉴定,阳性率为95%;慢病毒感染颗粒细胞时荧光蛋白的表达占比80%;qPCR验证FST过表达和干扰慢病毒载体的效果均显著(P<0.05);过表达FST显著(P<0.05)抑制卵巢卵泡颗粒细胞的增殖,干扰FST显著(P<0.05)促进卵巢卵泡颗粒细胞增殖。笔者分离出山羊卵巢卵泡颗粒细胞,成功构建FST过表达和干扰两种慢病毒载体,感染结果表明FST能够抑制山羊卵巢卵泡颗粒细胞的增殖,为进一步研究FST在哺乳动物卵泡发育调控中的作用及其机制提供了基础资料。
关键词
FST基因
卵巢卵泡颗粒细胞
慢病毒载体
SHRNA
过表达载体
细胞增殖
Keywords
follistatin gene
ovarian follicular granulosa cells
lentivirus vector
shRNA
overexpression vector
cell proliferation
分类号
S827.2 [农业科学—畜牧学]
S852.1 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
热应激对猪卵母细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性及染色质构型的影响
被引量：
1
2
作者
刘勇
张领
吴晓庆
卫朝辉
王艳红
王启磾
高迪
丁彪
吴风瑞
王荣
李文雍
机构
阜阳师范学院胚胎发育与生殖调节安徽省重点实验室
出处
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2016年第1期22-27,共6页
基金
国家自然科学基金(31201789
31372273)
+5 种基金
安徽省自然科学基金项目(1508085QC59
1408085QC65)
安徽省省级学科建设重大项目(皖教秘科[2014]28号)
安徽省大学生创新创业训练计划项目(AH201410371031)
省级科研机构校级委托专项(2014PTFY04ZD)
阜阳师范学院学生科研立项资助的课题(fsyxsc201431)
文摘
将屠宰场采集的猪卵巢分为热应激组和对照组,分别检测两组未成熟卵母细胞的各项指标。利用亮甲酚蓝染色法研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性,对比分析热应激对细胞代谢活性的影响;利用Hoechst33342标记DNA区分染色质构型,对比分析热应激对细胞染色质构型的影响。结果表明:热应激组卵母细胞BCB+比例显著低于对照组(P<0.05)。热应激组卵母细胞的各期染色质构型比例与对照组比例差异不显著(P>0.05)。BCB+和BCB-组卵母细胞GV1-GV3染色质构型差异不显著(P>0.05),但对照组BCB+卵母细胞的GV4构型比例明显高于BCB-(P<0.05),且GVBD差异不显著(P>0.05);而热应激组BCB+卵母细胞的GVBD比例明显低于BCB-(P>0.05),且GV4差异不显著(P>0.05)。综上,热应激对猪未成熟卵母细胞造成的损伤主要是影响了细胞的代谢活性,对细胞染色质构型的影响不大。
关键词
染色质构型
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
猪卵母细胞
热应激
Keywords
chromatin configuration
glucose-6-phosphate dehydrogenase（G6PD）
pig oocyte
heat stress
分类号
S811.2 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
山羊FST慢病毒载体构建及其对卵巢卵泡颗粒细胞增殖的影响
凌英会
朱露
吴昊
陈青
权青
刘勇
李文雍
张运海
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
7
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职称材料
2
热应激对猪卵母细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性及染色质构型的影响
刘勇
张领
吴晓庆
卫朝辉
王艳红
王启磾
高迪
丁彪
吴风瑞
王荣
李文雍
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2016
1
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职称材料
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