医学微生物学实验技术教学体系的建设与实践 被引量：7

1

作者 陈云霞 王金胜 +3 位作者 张翠英 张雄鹰 孟莉 程红兵 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第6期124-128,共5页

《医学微生物学及实验技术》是医学实验技术专业的一门重要专业主干课程,该课程的实验技术部分是学生必须掌握的基本技能。经过数年的教学实践,本着培养应用型人才的目标和重实践教学的教学理念,引入企业实践教学,逐步形成了“医学微生... 《医学微生物学及实验技术》是医学实验技术专业的一门重要专业主干课程,该课程的实验技术部分是学生必须掌握的基本技能。经过数年的教学实践,本着培养应用型人才的目标和重实践教学的教学理念,引入企业实践教学,逐步形成了“医学微生物学实验技术”教学体系,由基础性实验、综合性实验、企业实践三部分组成,并初步建立和实施了形成性考核评价体系。教学实践表明,学生较为全面地掌握了医学微生物学实验技术,对全面提高学生的实验实践能力和综合素质有所助益,有效提高了医学微生物学实验技术教学效果。 展开更多

关键词 医学微生物学实验技术 基础性实验 综合性实验 企业实践 形成性考核评价体系

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长链非编码RNA MIAT在非小细胞肺癌中的表达及功能研究 被引量：13

2

作者 裴振 霍小蕾 +3 位作者 田向阳 张毅强 贾建桃 韩玲娜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期592-598,共7页

目的:研究长链非编码RNA心肌梗死相关转录本(MIAT)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及细胞系中的表达情况及其对NSCLC细胞功能的影响。方法:利用Gene Expression Omnibus(GEO)数据库提取GSE19804和GSE30219数据集的生物信息学资料和临床预后资... 目的:研究长链非编码RNA心肌梗死相关转录本(MIAT)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及细胞系中的表达情况及其对NSCLC细胞功能的影响。方法:利用Gene Expression Omnibus(GEO)数据库提取GSE19804和GSE30219数据集的生物信息学资料和临床预后资料,分析MIAT在NSCLC组织和正常肺组织中的表达差异,以及MIAT表达水平与NSCLC患者生存期的关系;用q PCR检测25对NSCLC肿瘤组织和其癌旁组织,以及NSCLC细胞系A549、NCI-H266和NCI-H1299及人正常支气管上皮细胞系HBE中MIAT的表达情况;将MIAT si RNA(si-MIAT)和对照序列(si-NC)分别转染NSCLC细胞系A549,采用流式细胞术、CCK-8实验和细胞集落形成实验检测2组细胞的增殖情况,并且用q PCR和Western blot实验检测2组细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(CDKN1A)的表达情况。结果:GSE19804数据集分析显示MIAT在NSCLC组织中的表达高于正常肺组织(P<0.05),GSE30219数据集分析显示MIAT高表达患者的生存期显著短于低表达患者(P<0.01)。此外,与癌旁正常组织和HBE细胞相比较,NSCLC组织和细胞系中MIAT的表达水平升高(P<0.05);si-MIAT组A549细胞中MIAT表达水平明显低于si-NC组(P<0.01),且细胞活力和细胞集落数均低于siNC组,差异均有统计学意义(P<0.05);同时,相较于si-NC组,si-MIAT组cyclin D1的表达受到明显抑制(P<0.05),而CDKN1A的表达明显升高(P<0.05)。结论:NSCLC组织及细胞系中MIAT呈高表达,沉默MIAT表达可明显抑制NSCLC恶性增殖的表型。MIAT可作为NSCLC靶向治疗的潜在靶标。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 非小细胞肺癌 细胞增殖 心肌梗死相关转录本

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长链非编码RNA LINC00467促进非小细胞肺癌细胞的增殖 被引量：5

3

作者 裴振 霍小蕾 +3 位作者 田向阳 张毅强 贾建桃 韩玲娜 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期402-408,共7页

目的研究长链非编码RNAs(Long non-coding RNAs,LncRNAs)LINC00467在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织及细胞系中的表达及其对NSCLC细胞系功能的影响。方法利用高通量基因表达[Gene Expression Omnibus(GEO)]数据库... 目的研究长链非编码RNAs(Long non-coding RNAs,LncRNAs)LINC00467在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织及细胞系中的表达及其对NSCLC细胞系功能的影响。方法利用高通量基因表达[Gene Expression Omnibus(GEO)]数据库提取GSE19804和GSE18842数据集的生物信息学资料,分析LINC00467在NSCLC组织和正常肺组织中的表达差异;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测收集的25对NSCLC癌组织及其癌旁组织以及NSCLC细胞系(A549、NCI-H266、NCI-H1299)和人正常支气管上皮细胞系HBE中LINC00467的表达;然后将NSCLC细胞系A549分别转染LINC00467siRNA(si-LINC00467组)和对照序列(si-NC组),分别采用流式细胞技术、CCK8和细胞克隆形成实验检测两组细胞的增殖情况,qRT-PCR和Western blot实验检测两组细胞细胞周期相关分子G1/S-特异性周期蛋白-D1(CyclinD1)和细胞周期分子细胞周期素蛋白依赖性激酶6(CDK6)的表达。结果 GEO公共数据库分析显示,LINC00467在NSCLC组织中的表达高于正常肺组织(P<0.05),与癌旁组织和上皮正常细胞相比较,NSCLC癌组织和细胞系中LINC00467的表达水平升高(P<0.05);A549细胞中si-LINC00467组中LINC00467表达水平明显低于si-NC组(P<0.01),且细胞活力和细胞克隆数均低于si-NC组,差异均有统计学意义(P<0.05);相较于si-NC组,si-LINC00467组CyclinD1和CDK6的表达受到明显抑制(P<0.05)。结论NSCLC组织及细胞系中LINC00467呈高表达,沉默LINC00467表达可明显抑制NSCLC恶性增殖的表型,可为NSCLC的靶向治疗提供潜在策略。 展开更多

关键词 LncRNAs 非小细胞肺癌 基因表达数据库 细胞周期蛋白-D1 细胞周期素蛋白依赖性激酶6 细胞增殖 治疗

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大黄素对肝纤维化大鼠肺损伤的保护作用 被引量：11

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作者 张丽丽 张慧英 +9 位作者 王黎敏 李旭炯 贾建桃 吕敏丽 范毅敏 张翠英 刘明社 赵中夫 韩德五 CHENG Ji 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期291-296,共6页

目的:探讨不同剂量大黄素对肝纤维化大鼠肺损伤的保护作用。方法:采用复合致病因素法(CCl4、乙醇、高脂、高胆固醇和低胆碱)建立肝纤维化大鼠模型并以不同剂量(20 mg/kg和40 mg/kg)大黄素进行治疗。4周后,测定肝指数,检测血清内毒素、... 目的:探讨不同剂量大黄素对肝纤维化大鼠肺损伤的保护作用。方法:采用复合致病因素法(CCl4、乙醇、高脂、高胆固醇和低胆碱)建立肝纤维化大鼠模型并以不同剂量(20 mg/kg和40 mg/kg)大黄素进行治疗。4周后,测定肝指数,检测血清内毒素、同型半胱氨酸、反映肝功能的指标白蛋白、天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、总胆红素、总胆固醇、甘油三酯和肝纤维化指标透明质酸、层黏连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、Ⅲ型前胶原蛋白的含量,观察肝组织病理学改变;测定肺指数,光镜下行肺组织病理学观察,检测肺组织匀浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和过氧亚硝基阴离子(ONOO-)含量。结果:大鼠肝纤维化模型复制成功,模型组大鼠肺指数明显增加,肺脏发生水肿、炎症反应,肺匀浆TNF-α、MDA、NO和ONOO-含量明显增加;大黄素治疗组肺指数较模型组下降,肺组织病理性损伤明显减轻,肺组织TNF-α、MDA、NO和ONOO-含量明显降低。结论:大黄素对肝纤维化大鼠的肺损伤具有一定的保护作用。 展开更多

关键词 大黄素 肝纤维化 肝肺综合征 肺损伤

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LncRNA-BLACAT1调节CyclinD1/CDKN2B轴对非小细胞肺癌细胞增殖的影响及其机制 被引量：6

5

作者 霍小蕾 裴振 +3 位作者 杨浩 张毅强 贾建桃 韩玲娜 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期759-765,I0001,共8页

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织和癌细胞中长链非编码RNA(LncRNAs)BLACAT1的表达特征及其调控机制,阐明BLACAT1在NSCLC发生发展中的作用和临床意义。方法:高通量基因表达数据库(GEO数据库)分析BLACAT1在NSCLC组织的表达特征,Km... 目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织和癌细胞中长链非编码RNA(LncRNAs)BLACAT1的表达特征及其调控机制,阐明BLACAT1在NSCLC发生发展中的作用和临床意义。方法:高通量基因表达数据库(GEO数据库)分析BLACAT1在NSCLC组织的表达特征,Kmplot网站分析BLACAT1表达与NSCLC患者生存预后的联系。 qRT-PCR法检测BLACAT1在25例NSCLC患者癌组织和癌旁组织及NSCLC细胞系中的表达情况。将si-NC(阴性对照)和si-BLACAT1(抑制物)转染入NSCLC A549细胞作为si-NC组和si-BLACAT1组,qRT-PCR法分别检测各组A549细胞中BLACAT1 mRNA表达水平,流式细胞术检测各组细胞不同细胞周期细胞百分率,细胞集落生成实验检测各组细胞克隆形成能力,CCK8实验检测各组细胞增殖活性,qRT-PCR和 Western blotting法检测各组A549细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B(CDKN2B)mRNA和蛋白表达水平。结果: GEO数据库的NSCLC数据集GSE18842和GSE19804、qRT-PCR法检测以及Kmplot分析,与癌旁组织比较,NSCLC患者癌组织中BLACAT1表达水平明显升高(P< 0.01);NSCLC患者癌组织中BLACAT1低表达患者的存活时间明显高于BLACAT1高表达患者(P= 0.011)。与si-NC组比较,si-BLACAT1组 A549细胞中BLACAT1 mRNA表达水平明显降低(P< 0.05);与si-NC组比较,si-BLACAT1组A549细胞周期G 1期细胞百分率增加(P< 0.05),S期细胞百分率降低(P< 0.05),细胞克隆形成能力和细胞增殖活性均降低(P< 0.05或 P<0.01);与si-NC组比较,si-BLACAT1组 A549细胞中CyclinD1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P< 0.05),而CDKN2B mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P< 0.05或 P<0.01)。结论: LncRNA-BLACAT1在NSCLC患者癌组织和癌细胞中表达升高,下调BLACAT1表达可通过调节CyclinD1/CDKN2B轴从而抑制NSCLC A549细胞增殖,BLACAT1可作为NSCLC患者的潜在治疗靶点。 展开更多

关键词 癌 非小细胞肺 长链非编码RNA 细胞增殖 预后

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蛋白激酶C对缺血预处理家兔心肌热休克蛋白70 mRNA的影响 被引量：6

6

作者 卢彦珍 王庸晋 +1 位作者 王晓丽 王黎敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期406-409,共4页

目的 :探讨心肌缺血预处理 (IPC)过程中蛋白激酶 (PKC)对热休克蛋白 (HSP) 70mRNA表达的影响。方法 :在原位及离体家兔心脏缺血再灌注 (I/R)、缺血预处理模型上分别应用PKC抑制剂和激动剂 ,观察对心肌的作用和对心肌HSP70mRNA的表达的... 目的 :探讨心肌缺血预处理 (IPC)过程中蛋白激酶 (PKC)对热休克蛋白 (HSP) 70mRNA表达的影响。方法 :在原位及离体家兔心脏缺血再灌注 (I/R)、缺血预处理模型上分别应用PKC抑制剂和激动剂 ,观察对心肌的作用和对心肌HSP70mRNA的表达的影响。结果 :缺血预处理和使用佛波酯 (PMA)使心肌HSP70mRNA的表达、左心功能明显高于I/R组 ,磷脂酶A2 (PLA2 )活性及心律失常发生率明显低于该组 ;而使用多粘菌素B(PMB)则阻断了缺血预处理对心脏的保护作用 ,同时HSP70mRNA表达也明显低于IPC及PMA组。结论 :PKC参与了缺血预处理过程中HSP70表达的调控。 展开更多

关键词 心肌再灌注损伤 蛋白激酶类 热休克蛋白类 心肌缺血 MRNA 动物实验 IPC

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重复经颅直流电刺激对帕金森病模型大鼠抑郁行为的改善作用及其机制 被引量：9

7

作者 王春雷 常永丽 韩玲娜 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期693-697,共5页

目的:探讨重复经颅直流电刺激(tDCS)对帕金森病(PD)模型大鼠抑郁行为的影响,初步阐明tDCS影响PD相关抑郁行为的部分神经化学机制。方法:32只大鼠随机分为假手术组、PD组、阳极重复tDCS组和阴极重复tDCS组,每组8只,除假手术组外,其余各... 目的:探讨重复经颅直流电刺激(tDCS)对帕金森病(PD)模型大鼠抑郁行为的影响,初步阐明tDCS影响PD相关抑郁行为的部分神经化学机制。方法:32只大鼠随机分为假手术组、PD组、阳极重复tDCS组和阴极重复tDCS组,每组8只,除假手术组外,其余各组大鼠制备PD模型。采用行为学方法观察各组大鼠在强迫游泳实验中的不动时间和蔗糖偏好实验中的蔗糖消耗量;采用高效液相色谱-电化学法观察各组大鼠大脑内侧前额叶皮质(mPFC)和中缝核(RN)中单胺类递质水平。结果:与PD组比较,阳极重复tDCS组和阴极重复tDCS组大鼠的不动时间均明显缩短(P<0.05或P<0.01),阳极重复tDCS组大鼠蔗糖消耗量明显增加(P<0.05),而阴极重复tDCS组大鼠蔗糖消耗量无明显变化(P>0.05);阳极重复tDCS组大鼠mPFC和RN中多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)水平明显升高(mPFC:P<0.05或P<0.01;RN:P<0.01),阴极重复tDCS组大鼠仅mPFC中5-HT水平明显升高(P<0.05)。结论:重复tDCS能改善PD大鼠的抑郁行为,阳极重复tDCS的改善作用更为明显,其机制可能与相关脑区中单胺类递质水平升高有关联。 展开更多

关键词 重复经颅直流电刺激 帕金森病 抑郁 单胺类

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非创伤性预处理对大鼠缺血心肌保护效应机制的探讨 被引量：13

8

作者 卢彦珍 董传仁 +2 位作者 刘永明 张友云 马春艳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期825-838,共14页

目的 :探讨非创伤性下肢缺血预处理对大鼠心肌保护效应的机制。方法 :用雄性SD大鼠 36只 ,分对照、缺血再灌注、经典缺血预处理及非创伤性下肢缺血预处理 4组。分别观察以下指标 :血浆一氧化氮 (NO)水平 ;心肌热休克蛋白 70 (HSP70 )mRN... 目的 :探讨非创伤性下肢缺血预处理对大鼠心肌保护效应的机制。方法 :用雄性SD大鼠 36只 ,分对照、缺血再灌注、经典缺血预处理及非创伤性下肢缺血预处理 4组。分别观察以下指标 :血浆一氧化氮 (NO)水平 ;心肌热休克蛋白 70 (HSP70 )mRNA表达 ;心肌 5’ -核苷酸酶 (5’ -NT)及过氧化氢酶 (CAT)活性。结果 :经典及非创伤性下肢缺血预处理后 ,血浆NO水平显著高于缺血再灌注组和对照组 (P <0 0 1) ,心肌HSP 70mRNA表达明显增强 ,心肌 5’ -NT、CAT活性升高 (P <0 0 5 ,vsI/R) ,而经典及非创伤性下肢缺血预处理两组间上述指标无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 :非创伤性下肢缺血预处理保护心肌的机制可能与经典缺血预处理相似 ,均是通过提高心肌内源性保护物质NO、HSP70mRNA、CAT及 5’ -NT显示预处理效应。 展开更多

关键词 大鼠 心肌缺血 缺血预处理 心肌保护

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糖调节蛋白78在大鼠肠源性内毒素血症促进肝硬化形成中的作用 被引量：9

9

作者 冀菁荃 张慧英 +7 位作者 贾建桃 张丽丽 陈云霞 王黎敏 田小霞 封明 赵中夫 韩德五 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2447-2452,共6页

目的:探讨糖调节蛋白78(GRP78)在大鼠肠源性内毒素血症(IETM)促进肝硬化形成过程中的作用。方法:51只雄性Wistar大鼠随机分为肝硬化模型4周组、6周组、8周组及同期正常对照组。采用复合致病因素法诱导大鼠肝硬化,HE染色和VG染色分别观... 目的:探讨糖调节蛋白78(GRP78)在大鼠肠源性内毒素血症(IETM)促进肝硬化形成过程中的作用。方法:51只雄性Wistar大鼠随机分为肝硬化模型4周组、6周组、8周组及同期正常对照组。采用复合致病因素法诱导大鼠肝硬化,HE染色和VG染色分别观察肝损伤和肝纤维化情况;RT-PCR法和免疫组化法分别检测肝组织GRP78 mRNA及蛋白表达;同时测定血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、内毒素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、同型半胱氨酸(HCY)以及肝组织匀浆中TNF-α、丙二醛(MDA)、Ⅲ型前胶原(PⅢP)水平。结果:(1)随病程进展,各模型组血浆中ALT、内毒素、TNF-α、HCY以及肝组织中GRP78 mRNA、蛋白表达水平、MDA、TNF-α、PⅢP含量和肝组织纤维化指数均逐渐升高并显著高于正常对照组(P<0.05)。(2)血浆中升高的内毒素水平分别与GRP78蛋白、血浆MDA和HCY水平以及肝纤维化指数呈显著正相关(P<0.01);表达增高的GRP78蛋白分别与血浆MDA和HCY水平以及肝纤维化指数呈显著正相关(P<0.01)。结论:GRP78可能在肝硬化形成过程中发挥重要作用;内质网应激很可能是IETM促进肝纤维化乃至肝硬化发生的重要机制。 展开更多

关键词 糖调节蛋白78 内毒素类 内质网应激 肝硬化

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Accutase和胰蛋白酶消化传代对人胚纹状体来源神经干细胞凋亡的影响 被引量：4

10

作者 李婷 李晨 +1 位作者 张翠英 赵杰 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期185-194,共10页

目的探讨Accutase和胰蛋白酶消化神经干细胞（NSCs）后对其凋亡过程的影响。方法来自人类12～16周自然流产胚胎纹状体组织,分离并体外培养NSCs,将体外培养的第3～5代神经球,分别用胰蛋白酶、Accutase消化,消化过程中仅振荡打散,避免巴... 目的探讨Accutase和胰蛋白酶消化神经干细胞（NSCs）后对其凋亡过程的影响。方法来自人类12～16周自然流产胚胎纹状体组织,分离并体外培养NSCs,将体外培养的第3～5代神经球,分别用胰蛋白酶、Accutase消化,消化过程中仅振荡打散,避免巴斯德吸管反复吹打。将神经球打散成的单细胞悬液接种。用Annexin V/碘化丙啶染色、Hoechst 33342活细胞染色镜下观察等方法,在培养传代后2和24 h时间点检测神经干细胞凋亡率。结果两种酶消化后立即用台盼蓝染色判断细胞活性,Accutase消化后活细胞比例为（91.65±4.43）%,胰蛋白酶仅有（83.10±6.76）%,二者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。体外培养的第3～5代人胚纹状体NSCs形成的神经球传代后2 h,Accutase和胰蛋白酶传代的细胞凋亡率差异有统计学意义（P〈0.01）,而到24 h时间点,Accutase消化的细胞凋亡率经Annexin V/碘化丙啶、Hoechst 33342活细胞染色两种方法检测已经达到50%,而胰蛋白酶消化后的细胞凋亡率在此时间点维持在15%～20%。Accutase消化后的NSCs生长4 d后,克隆形成率和神经球直径分别为（7.83±1.32）%和（43.5±9.76）μm,均显著低于胰蛋白酶传代组的（19.22±3.66）%和（58.4±18.73）μm（P〈0.01）。结论虽然台盼蓝染色显示Accutase消化神经球后的细胞存活比胰蛋白酶更多,但消化后24 h内,Accutase消化的细胞凋亡率显著升高,最终神经球新克隆形成率低,直径更小。胰蛋白酶消化振荡打散神经球后的凋亡率较Accutase具有明显优势;神经球消化后台盼蓝即时染色的结果不足以预示后期NSCs凋亡率。 展开更多

关键词 神经干细胞 神经球 Accutase 胰蛋白酶 凋亡

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甜菜碱对肝硬化大鼠肝脏巨噬细胞极化的影响 被引量：3

11

作者 田小霞 来丽娜 +4 位作者 陈云霞 李旭炯 王黎敏 孟丽 张丽丽 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第9期961-967,共7页

目的:探讨甜菜碱干预对复合致病因素诱导肝硬化大鼠肝脏巨噬细胞极化的影响,并初步探讨其发挥作用可能的机制。方法:48只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、甜菜碱干预对照组、肝硬化模型组和肝硬化模型甜菜碱干预组。各组动物分别于造模第... 目的:探讨甜菜碱干预对复合致病因素诱导肝硬化大鼠肝脏巨噬细胞极化的影响,并初步探讨其发挥作用可能的机制。方法:48只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、甜菜碱干预对照组、肝硬化模型组和肝硬化模型甜菜碱干预组。各组动物分别于造模第6周末和8周末处死取材。肝组织切片行Masson染色;Elisa法检测大鼠血浆中ALT、内毒素、同型半胱氨酸(Hcy)的水平和肝组织匀浆中TNF-α、IL-6、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)的水平;实时荧光定量PCR法检测肝组织中葡萄糖调节蛋白78(Grp78)、CD_(86)、CD_(206)和转化生长因子-β(TGF-β_1)的信使核糖核酸(mRNA)表达。结果:与相应的空白对照组相比,肝硬化模型组动物血浆中ALT、内毒素、Hcy水平和肝组织中Grp78的mRNA表达随病程进展逐渐显著升高(P<0.05);肝组织中TNF-α、IL-6、iNOS水平和CD_(86)的mRNA表达均显著升高(P<0.05),且其6周水平高于8周;而肝组织中Arg-1水平和CD_(206)、TGF-β_1的mRNA表达在6周至8周逐渐显著升高(P<0.05)。与相应的肝硬化模型组相比,肝硬化模型甜菜碱干预组动物血浆中ALT、内毒素、Hcy水平和肝组织中Grp78的mRNA表达均显著降低(P<0.05);肝组织中TNF-α、IL-6水平在6周显著降低(P<0.05),8周变化不明显;肝组织中iNOS、Arg-1水平和肝组织中CD_(86)、CD_(206)、TGF-β_1的mRNA表达均显著降低(P<0.05)。相关性分析结果显示:大鼠血浆中内毒素水平与肝组织中Grp78的mRNA表达显著相关(P<0.01),血浆中内毒素水平和肝组织中Grp78的mRNA表达分别与肝组织中CD_(86)、CD_(206)的mRNA表达显著相关(P<0.01)。结论:甜菜碱可能通过降低血浆内毒素水平,拮抗肝脏内质网应激反应,调节巨噬细胞的极化状态等途径,发挥保护肝脏的作用。 展开更多

关键词 甜菜碱 肝硬化 肝纤维化 巨噬细胞 内毒素 内质网应激

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姜黄素对肝肺综合征大鼠的保护作用 被引量：5

12

作者 李旭炯 刘安 +1 位作者 陈云霞 李淑芬 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2017年第7期738-742,共5页

目的:观察姜黄素对胆总管结扎诱导的大鼠肝肺综合征(HPS)肺组织炎性损伤的保护作用。方法:造模1周后,姜黄素(50 mg·kg^(-1)·d^(-1))通过灌胃给予。给药2周后,进行血气分析、血浆TNF-α及肝功能检测。对肺、肝组织病理改变(HE... 目的:观察姜黄素对胆总管结扎诱导的大鼠肝肺综合征(HPS)肺组织炎性损伤的保护作用。方法:造模1周后,姜黄素(50 mg·kg^(-1)·d^(-1))通过灌胃给予。给药2周后,进行血气分析、血浆TNF-α及肝功能检测。对肺、肝组织病理改变(HE染色)进行观察。并采用免疫荧光染色对肺组织CD68、NF-κB P-65及TNF-α进行检测,同时采用Western blotting法对IκBα/p-IκBα进行检测。结果:姜黄素减轻HPS大鼠的肺组织巨噬细胞聚集及炎性损伤、降低了Aa PO2,同时也降低了HPS大鼠血浆和肺组织TNF-α含量及NF-κB激活程度。结论:姜黄素对HPS大鼠的肺组织炎性损伤具有保护作用,其机制可能与NF-κB激活程度减轻有关。 展开更多

关键词 肝肺综合征 姜黄素 TNF-Α NF-ΚB

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甜菜碱对复合致病因素诱导肝硬化大鼠的作用及机制研究 被引量：3

13

作者 田小霞 来丽娜 +2 位作者 李旭炯 陈云霞 郭晓姝 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第4期372-377,383,共7页

目的:探讨甜菜碱对复合致病因素诱导肝硬化大鼠的保护作用及可能的机制。方法:72只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,甜菜碱干预的对照组,肝硬化模型组和肝硬化模型甜菜碱干预组。各组动物分别于造模第4周末、6周末和8周末处死取材。Elisa... 目的:探讨甜菜碱对复合致病因素诱导肝硬化大鼠的保护作用及可能的机制。方法:72只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,甜菜碱干预的对照组,肝硬化模型组和肝硬化模型甜菜碱干预组。各组动物分别于造模第4周末、6周末和8周末处死取材。Elisa法检测大鼠血浆中ALT、内毒素和肝组织匀浆中TNF-α、IL-6水平;肝组织切片行HE染色,NF-κB p65免疫组化染色;实时荧光定量PCR法和Western blot法分别检测肝组织中Toll样受体4(TLR4)mRNA、NF-κB mRNA和TLR4蛋白的表达。结果:与相应的空白对照组相比,肝硬化模型组:血浆中ALT、内毒素水平均随病程进展逐渐显著升高(P<0.05);肝组织中TNF-α、IL-6水平均显著升高(P<0.05),TLR4mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.05),NF-κB mRNA的表达显著升高(P<0.05),NF-κB p65核转位也显著增多(P<0.05),它们的变化趋势为6周水平最高,4周次之,8周最低。与相应的肝硬化模型组相比,肝硬化模型甜菜碱干预组:血浆中ALT、内毒素水平均显著降低(P<0.05);4周和6周组肝组织中TNF-α、IL-6水平均显著降低(P<0.05);肝组织中TLR4 mRNA和蛋白均显著降低(P<0.05),NF-κB mRNA的表达显著降低(P<0.05),NF-κB p65核转位显著降低(P<0.05)。结论:甜菜碱可能通过抑制TLR4/NF-κB信号途径,有效减轻肝脏炎症和纤维化程度,发挥保护肝脏的作用。 展开更多

关键词 甜菜碱 肝硬化 肝纤维化 内毒素 TOLL样受体

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肠道菌群、GRP78、TLR4在大鼠肝硬化发生发展中的作用 被引量：4

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作者 陈云霞 张慧英 +3 位作者 杨泽溪 来丽娜 孟莉 李旭炯 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第3期254-260,共7页

目的探讨肠道菌群、肠组织中内质网应激蛋白GRP78(glucose-regulated protein 78)、模式识别受体TLR4(toll-like receptors 4)表达水平的改变在大鼠肝硬化发生发展中的作用。方法采用复合致病因素法诱导大鼠肝硬化。HE染色观察肝与小肠... 目的探讨肠道菌群、肠组织中内质网应激蛋白GRP78(glucose-regulated protein 78)、模式识别受体TLR4(toll-like receptors 4)表达水平的改变在大鼠肝硬化发生发展中的作用。方法采用复合致病因素法诱导大鼠肝硬化。HE染色观察肝与小肠病理学改变,ARISA(automated ribosomal intergenic-spacer analysis)分析回肠内容物肠道菌群组成,培养法检测各组动物细菌易位情况,ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)测定血浆生化指标,quantitative real-time PCR、Western blotting检测肝、肠组织GRP78、TLR4的表达。结果肝硬化模型动物肝、肠组织病理学改变明显。随着肝硬化的进展,模型动物血浆中ALT(alanine aminotransferase)、内毒素和Hcy(homocysteine)的水平逐渐增高。模型组与对照组间肠道菌群的组间相似性明显降低。模型组发生细菌易位的大鼠数量、易位率显著升高。模型组动物肝、肠组织中GRP78的表达水平均随病程进展显著升高;肝组织中TLR4的表达水平在6周之前随病程进展显著升高,8周仍明显高于正常动物,但低于6周时的表达水平;肠组织中TLR4的表达水平在6周之前随病程进展显著升高,8周则明显降低。结论肠道微生物群落结构的生态失调、应激水平升高、免疫功能下降,导致肠道细菌易位,加重肝损伤,促进肝硬化形成。 展开更多

关键词 肝硬化 肠道菌群 细菌易位 GRP78 TLR4

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罗哌卡因对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和迁移能力的影响 被引量：3

15

作者 郭晓姝 巩继平 +3 位作者 杨根庆 常永丽 高莉晶 田小霞 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1152-1159,共8页

目的:探讨罗哌卡因对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖能力和迁移能力的影响,为BMSCs的临床应用提供进一步的研究基础。方法:使用贴壁法分离扩增大鼠BMSCs,流式细胞仪检测细胞表面分子标志物;成脂... 目的:探讨罗哌卡因对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖能力和迁移能力的影响,为BMSCs的临床应用提供进一步的研究基础。方法:使用贴壁法分离扩增大鼠BMSCs,流式细胞仪检测细胞表面分子标志物;成脂、成骨和成肌诱导分化检测细胞的分化潜能;分别使用CCK-8和Brdu掺入方法检测不同浓度罗哌卡因处理对BMSCs增殖能力的影响;细胞划痕实验和Millicell小室迁移实验检测不同浓度罗哌卡因对大鼠BMSCs迁移能力的影响。结果:培养所得细胞具备BMSCs的表面标志物特点和多向分化潜能。50,100μmol/L罗哌卡因处理可显著降低BMSCs的增殖速度,降低BMSCs的Brdu阳性率,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。划痕实验和迁移实验表明罗哌卡因处理可引起BMSCs迁移能力的明显降低(P<0.05)。上述效应均对罗哌卡因的给药剂量呈现明显的剂量依赖关系,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:罗哌卡因可显著降低大鼠BMSCs的增殖能力和细胞迁移能力,提示外科应用BMSCs时需注意罗哌卡因等长效局部麻醉剂对BMSCs造成的不利影响。 展开更多

关键词 间充质干细胞 罗哌卡因 细胞增殖 细胞迁移

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外侧缰核中5-HT_(2C)受体在帕金森病模型大鼠焦虑行为中的调节作用及其机制 被引量：6

16

作者 韩玲娜 王春雷 张莉 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期473-480,共8页

目的:探讨外侧缰核(LHb)中5-羟色胺2C(5-HT_(2C))受体在调节帕金森病(PD)大鼠相关焦虑行为中的作用,阐明PD相关焦虑行为的神经机制。方法:将126只大鼠随机分为假手术组(n=63)和黑质致密部(SNc)损毁组(n=63)。采用行为学方法观察2组大鼠... 目的:探讨外侧缰核(LHb)中5-羟色胺2C(5-HT_(2C))受体在调节帕金森病(PD)大鼠相关焦虑行为中的作用,阐明PD相关焦虑行为的神经机制。方法:将126只大鼠随机分为假手术组(n=63)和黑质致密部(SNc)损毁组(n=63)。采用行为学方法观察2组大鼠在旷场实验中的中央区停留时间百分比、高架十字迷宫实验(EPM)中的开放臂进入次数百分比和开放臂停留时间百分比;采用高效液相色谱-电化学检测法观察大鼠边缘相关脑区中单胺类递质水平;采用组织学和免疫组织化学染色法确认套管位置及SNc损毁后多巴胺(DA)神经元的缺失程度。结果:与假手术组比较,SNc损毁组大鼠中央区停留时间百分比(F1,72=36.678,P<0.001)、开放臂进入次数百分比(F1,72=59.077,P<0.001)和开放臂停留时间百分比(F1,72=84.245,P<0.001)均明显降低,且内侧前额叶皮层(mPFC)(P<0.01)、杏仁核(P<0.01)和海马(P<0.05)中DA水平均明显下降;LHb中局部注射5-HT_(2C)受体激动剂Ro60-0175后,与未加入Ro60-0175时比较,2组大鼠中央区停留时间百分比(P<0.05或P<0.01)、开放臂进入次数百分比(P<0.05或P<0.01)和开放臂停留时间百分比(P<0.05或P<0.01)均明显降低;且mPFC、杏仁核和海马中3种单胺类递质DA、5-HT和去甲肾上腺素(NA)水平均不同程度下降。在mPFC,2组大鼠给予Ro60-0175后,3种递质水平均明显降低(P<0.05或P<0.01);在杏仁核,给予Ro60-0175后,除5-HT水平无明显变化外,其余2种递质水平明显下降(P<0.05或P<0.01);在海马,给予Ro60-0175后,除假手术组大鼠NA水平无变化外,其余均明显下降(P<0.05或P<0.01)。组织学确认行为学实验中使用大鼠套管均位于LHb上方1mm;免疫组织化学检测,SNc损毁组大鼠损毁侧SNc中DA神经元完全缺失,且腹侧被盖区DA神经元较未损毁侧明显减少(P<0.001)。结论:LHb中5-HT_(2C)受体的激活可诱发或增强大鼠的焦虑行为,其机制与相关脑区中单胺类递质水平变化有关联。 展开更多

关键词 帕金森病 焦虑 外侧缰核 5-HT(2C)受体

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电损毁外侧缰核对帕金森病模型大鼠空间学习记忆功能的影响及其机制 被引量：3

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作者 韩玲娜 王春雷 +2 位作者 常永丽 原丽 刘小静 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1108-1115,共8页

目的:观察电损毁外侧缰核(LHb)对帕金森病(PD)模型大鼠空间学习记忆功能的影响,阐明LHb在PD大鼠认知功能障碍中的作用及其相关机制。方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为对照组、PD组和PD+LHb损毁组,每组10只,除对照组外,其余2组大鼠制备P... 目的:观察电损毁外侧缰核(LHb)对帕金森病(PD)模型大鼠空间学习记忆功能的影响,阐明LHb在PD大鼠认知功能障碍中的作用及其相关机制。方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为对照组、PD组和PD+LHb损毁组,每组10只,除对照组外,其余2组大鼠制备PD模型,PD+LHb损毁组PD大鼠造模2周后电损毁LHb,造模后第4周进行相关检测;旷场实验观察3组大鼠穿行格数和站立次数;Morris水迷宫实验观察3组大鼠寻找水下平台游泳距离和撤除平台后在目标象限内游泳距离百分率;神经化学法观察3组大鼠脑内内侧前额叶皮层(mPFC)和海马组织中5-羟色胺(5-HT)水平;免疫组织化学和组织学染色法检测脑组织中多巴胺(DA)能神经元的缺失程度和LHb电损毁情况。结果:旷场实验,与对照组比较,PD组大鼠的穿行格数和站立次数明显减少(P<0.01);与PD组比较,PD+LHb损毁组大鼠的穿行格数和站立次数差异无统计学意义(P>0.05)。Morris水迷宫实验,与对照组比较,训练第2、3、4和5天PD组大鼠在定位航行实验中寻找水下平台游泳距离明显增加(P<0.01),撤除平台后空间探索实验中目标象限内游泳距离百分率明显降低(P<0.05),但对照组和PD组大鼠脑内mPFC和海马组织中5-HT水平差异无统计学意义(P>0.05);与PD组比较,训练第2、3、4和5天PD+LHb损毁组大鼠寻找水下平台游泳距离增加(P<0.01),且撤除平台后目标象限内游泳距离百分率也进一步降低(P<0.05),脑内mPFC和海马组织中5-HT水平明显降低(P<0.01)。免疫组织化学检测,PD大鼠损毁侧黑质致密部DA能神经元完全缺失,且腹侧被盖区DA能神经元较未损毁侧明显减少(P<0.01);组织学确认LHb被部分损毁。结论:损毁LHb可加重PD大鼠空间学习记忆功能损伤,其机制与改变相关脑区中5-HT递质水平有关。 展开更多

关键词 外侧缰核 空间学习记忆 帕金森病 MORRIS水迷宫

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巨噬细胞极化在大鼠肝硬化发生发展中的作用 被引量：4

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作者 田小霞 张慧英 +7 位作者 陈云霞 李旭炯 王黎敏 孟丽 来丽娜 赵中夫 韩德五 CHENG Ji 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期880-885,共6页

目的：探讨在大鼠肝硬化发病过程中,巨噬细胞的极化状态及其与肠源性内毒素血症-内质网应激反应之间的关系。方法：36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和肝硬化模型组。各组动物分别于造模第4周末、6周末和8周末处死取材。ELISA法检测大... 目的：探讨在大鼠肝硬化发病过程中,巨噬细胞的极化状态及其与肠源性内毒素血症-内质网应激反应之间的关系。方法：36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和肝硬化模型组。各组动物分别于造模第4周末、6周末和8周末处死取材。ELISA法检测大鼠血浆中ALT、内毒素、Hcy的水平和肝组织匀浆中i NOS、TNF-α、IL-6、Arg-1、IL-10的水平;肝组织切片行HE染色和VG染色;实时荧光定量PCR法检测大鼠肝组织中Grp78、NF-κB、IRF5、CD86、CD206和TGF-β1的mRNA表达。结果：与相应的正常对照组相比,肝硬化模型组动物血浆中ALT、内毒素、Hcy水平和肝组织中Grp78的mRNA表达在4周、6周和8周均随病程进展逐渐升高（P〈0.05）;肝组织中NF-κB、IRF5和CD86的mRNA表达以及i NOS、TNF-α、IL-6的水平均显著升高（P〈0.05）,且它们的变化趋势为6周水平最高,4周次之,8周最低;肝组织中CD206和TGF-β1的mRNA表达以及Arg-1、IL-10的水平在4周未见明显变化,在6~8周逐渐升高（P〈0.05）。相关性分析结果显示,血浆中内毒素水平与肝组织中Grp78的mRNA表达显著相关（P〈0.01）;血浆中内毒素水平和肝组织中Grp78的mRNA表达均与肝组织中CD86和CD206的mRNA表达显著相关（P〈0.01）。结论：肝损伤-肠源性内毒素血症-内质网应激-巨噬细胞极化途径可能是肝纤维化乃至肝硬化发病的重要机制。 展开更多

关键词 肝硬化 肝纤维化 巨噬细胞 内质网应激 内毒素

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三七皂甙单体Rb_1对大鼠脑缺血再灌注时脑细胞凋亡及cPLA_2蛋白表达的影响 被引量：15

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作者 王东吉 武凡 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期414-417,共4页

目的:观察三七皂甙单体Rb1对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑细胞凋亡和胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)及相关蛋白表达的影响。方法:用线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注(MCA-IR)模型,用原位末端标记(TUNEL)法检测脑细胞凋亡,用免疫组织化学法检测cPLA2... 目的:观察三七皂甙单体Rb1对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑细胞凋亡和胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)及相关蛋白表达的影响。方法:用线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注(MCA-IR)模型,用原位末端标记(TUNEL)法检测脑细胞凋亡,用免疫组织化学法检测cPLA2、c-fos和c-jun在脑细胞中的表达,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果:在大鼠MCA-IR脑损伤时,三七Rb1明显降低凋亡细胞数和血清中TNF-α水平及cPLA2、c-fos和c-jun在脑细胞中的表达,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:三七Rb1通过抑制cPLA2及相关蛋白表达,对大脑中动脉缺血再灌注脑损伤有良好的保护作用。 展开更多

关键词 脑缺血 三七皂甙Rb1 胞浆型磷脂酶A2

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非创伤缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌的作用 被引量：5

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作者 卢彦珍 董传仁 +3 位作者 张友云 郑汉巧 涂淑珍 欧阳静萍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期252-255,共4页

目的：确定非创伤性缺血预处理对大鼠缺血／再灌注（Ｉ／Ｒ）心肌损伤是否具有对抗作用，以扩展缺血预处理的实际应用。方法：采用非创伤性下肢缺血预处理及经典缺血预处理的动物模型，比较两种处理方法对Ｉ／Ｒ心肌损伤的效应。实验动... 目的：确定非创伤性缺血预处理对大鼠缺血／再灌注（Ｉ／Ｒ）心肌损伤是否具有对抗作用，以扩展缺血预处理的实际应用。方法：采用非创伤性下肢缺血预处理及经典缺血预处理的动物模型，比较两种处理方法对Ｉ／Ｒ心肌损伤的效应。实验动物分４组：正常对照组（ＮＣ，ｎ＝８），开胸旷置５０ｍｉｎ；缺血／再灌注组（Ｉ／Ｒ，ｎ＝１２），结扎冠脉３０ｍｉｎ，再灌注２０、１８０ｍｉｎ；经典缺血预处理组（Ｃ－ＩＰＣ，ｎ＝１２），按经典Ｍｕｒｙ法复制；非创伤性下肢缺血预处理组（Ｎ－ＷＩＰＣ，ｎ＝１２），捆绑双下肢５ｍｉｎ，松开５ｍｉｎ，反复４次后，阻断冠脉３０ｍｉｎ，再灌２０、１８０ｍｉｎ。以左室功能，心肌梗塞范围，血清肌酸激酶（ＣＫ）及心肌组织丙二醛（ＭＤＡ）含量、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性为观察指标。结果：与Ｉ／Ｒ组相比，Ｎ－ＷＩＰＣ组与Ｃ－ＩＰＣ组均显著缩小Ｉ／Ｒ后的心肌梗塞范围（Ｐ＜００１）；明显恢复Ｉ／Ｒ后的左室功能（Ｐ＜００５，００１）；减轻自由基对心肌的损害：血清ＣＫ，心肌ＭＤＡ含量显著降低（Ｐ＜００１）。Ｎ－ＷＩＰＣ组还使心肌ＳＯＤ活性增高（Ｐ＜００５）。结论：非创伤性下肢缺血预处理与经典缺血预处理可诱发同等强度的? 展开更多

关键词 大鼠 再灌注损伤 心肌缺血 缺血预处理

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