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外泌体circRNAs ITCH/miRNAs靶向调控成骨分化、骨生成机制
1
作者
徐娣
魏伟强
+2 位作者
李莎
李文姝
蒋腾龙
《中国骨质疏松杂志》
北大核心
2025年第5期683-690,共8页
目的 探讨外泌体(exosomes, Exo)来源环状RNA(circular RNAs, circRNAs)ITCH在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)成骨分化中的调控作用及分子机制。方法 将来自卵巢切除大鼠(OVX-Exo)和假手术大鼠(Sham-Exo)...
目的 探讨外泌体(exosomes, Exo)来源环状RNA(circular RNAs, circRNAs)ITCH在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)成骨分化中的调控作用及分子机制。方法 将来自卵巢切除大鼠(OVX-Exo)和假手术大鼠(Sham-Exo)的BMSCs来源外泌体与骨髓来源的巨噬细胞共培养,以研究它们对破骨细胞分化的影响。为了阐明ITCH对BMSCs的成骨分化影响,将BMSCs分为Sham-Exo(假手术)组、OVX-Exo(卵巢切除)组、OVX-Exo+mimic-NC组和OVX-Exo+ITCH mimic组。为了证实ITCH通过抑制miR-23a-5p表达促进成骨细胞增殖和分化潜能,将BMSCs分为OVX-Exo+ITCH+mimic-NC组和OVX-Exo+ITCH+miR-23a-5p mimic组。通过定量实时PCR (qRT-PCR)确定BMSCs中ITCH、miR-23a-5p表达。分别通过CCK-8、茜素红染色和ALP染色检测细胞增殖、钙化结节和细胞活性情况。结果 与Sham-Exo组相比,OVX-Exo组TRAP阳性细胞的数量和破骨细胞标记物的mRNA表达显著升高(P<0.05)。OVX-Exo中ITCH mRNA表达水平显著低于Sham-Exo(P<0.01)。在BMSCs的成骨分化期间,ITCH表达在成骨诱导后的第5、7、9天显著增加(P<0.01)。与Sham-Exo组相比,OVX-Exo组和OVX-Exo+mimic-NC组BMSCs细胞增殖显著降低(P<0.05),而OVX-Exo+ITCH mimic组BMSCs细胞增殖显著高于OVX-Exo+mimic-NC组(P<0.05)。与Sham-Exo组相比,OVX-Exo组和OVX-Exo+mimic-NC组BMSCs细胞ALP活性和矿物质沉积显著降低(P<0.05),而OVX-Exo+ITCH mimic组BMSCs细胞ALP活性和矿物质沉积显著高于OVX-Exo+mimic-NC组(P<0.05)。miR-23a-5p mimic显著降低了ITCH-WT报告载体的荧光素酶活性,和miR-23a-5p抑制剂显著增加了ITCH-WT报告载体的荧光素酶活性。与OVX-Exo+ITCH mimic+mimic-NC相比,OVX-Exo+ITCH mimic+miR-23a-5p mimic组BMSCs细胞增殖、ALP活性和矿物质沉积均显著降低(P<0.05)。结论 ITCH在介导Exo调节骨形成和骨吸收中发挥重要作用,其过表达通过海绵miR-23a-5p促进BMSCs的成骨分化。
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关键词
外泌体
circRNAs
ITCH
miR-23a-5p
骨髓间充质干细胞
卵巢切除大鼠
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题名
外泌体circRNAs ITCH/miRNAs靶向调控成骨分化、骨生成机制
1
作者
徐娣
魏伟强
李莎
李文姝
蒋腾龙
机构
长沙市
第四
医院
(
湖南师范大学
附属
长沙
医院
)
骨一
科
出处
《中国骨质疏松杂志》
北大核心
2025年第5期683-690,共8页
基金
湖南省卫生健康委科研计划项目(202202256321)。
文摘
目的 探讨外泌体(exosomes, Exo)来源环状RNA(circular RNAs, circRNAs)ITCH在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)成骨分化中的调控作用及分子机制。方法 将来自卵巢切除大鼠(OVX-Exo)和假手术大鼠(Sham-Exo)的BMSCs来源外泌体与骨髓来源的巨噬细胞共培养,以研究它们对破骨细胞分化的影响。为了阐明ITCH对BMSCs的成骨分化影响,将BMSCs分为Sham-Exo(假手术)组、OVX-Exo(卵巢切除)组、OVX-Exo+mimic-NC组和OVX-Exo+ITCH mimic组。为了证实ITCH通过抑制miR-23a-5p表达促进成骨细胞增殖和分化潜能,将BMSCs分为OVX-Exo+ITCH+mimic-NC组和OVX-Exo+ITCH+miR-23a-5p mimic组。通过定量实时PCR (qRT-PCR)确定BMSCs中ITCH、miR-23a-5p表达。分别通过CCK-8、茜素红染色和ALP染色检测细胞增殖、钙化结节和细胞活性情况。结果 与Sham-Exo组相比,OVX-Exo组TRAP阳性细胞的数量和破骨细胞标记物的mRNA表达显著升高(P<0.05)。OVX-Exo中ITCH mRNA表达水平显著低于Sham-Exo(P<0.01)。在BMSCs的成骨分化期间,ITCH表达在成骨诱导后的第5、7、9天显著增加(P<0.01)。与Sham-Exo组相比,OVX-Exo组和OVX-Exo+mimic-NC组BMSCs细胞增殖显著降低(P<0.05),而OVX-Exo+ITCH mimic组BMSCs细胞增殖显著高于OVX-Exo+mimic-NC组(P<0.05)。与Sham-Exo组相比,OVX-Exo组和OVX-Exo+mimic-NC组BMSCs细胞ALP活性和矿物质沉积显著降低(P<0.05),而OVX-Exo+ITCH mimic组BMSCs细胞ALP活性和矿物质沉积显著高于OVX-Exo+mimic-NC组(P<0.05)。miR-23a-5p mimic显著降低了ITCH-WT报告载体的荧光素酶活性,和miR-23a-5p抑制剂显著增加了ITCH-WT报告载体的荧光素酶活性。与OVX-Exo+ITCH mimic+mimic-NC相比,OVX-Exo+ITCH mimic+miR-23a-5p mimic组BMSCs细胞增殖、ALP活性和矿物质沉积均显著降低(P<0.05)。结论 ITCH在介导Exo调节骨形成和骨吸收中发挥重要作用,其过表达通过海绵miR-23a-5p促进BMSCs的成骨分化。
关键词
外泌体
circRNAs
ITCH
miR-23a-5p
骨髓间充质干细胞
卵巢切除大鼠
Keywords
exosomes
circRNAs ITCH
miR-23a-5p
bone marrow mesenchymal stem cells
ovariectomized rats
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
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被引量
操作
1
外泌体circRNAs ITCH/miRNAs靶向调控成骨分化、骨生成机制
徐娣
魏伟强
李莎
李文姝
蒋腾龙
《中国骨质疏松杂志》
北大核心
2025
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