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番茄褪绿病毒外壳蛋白多克隆抗体的制备和应用
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作者 伍维兰 聂三妹 +5 位作者 张坤 鲁洲 李战彪 季英华 郭灵芳 章松柏 《湖北农业科学》 2025年第2期197-201,213,共6页
为建立番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)的快速检测技术,通过RT-PCR技术克隆病毒的主要外壳蛋白(Coat protein,CP)基因,利用Gateway技术将其重组至原核表达载体中,转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21菌株中诱导表达,将纯... 为建立番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)的快速检测技术,通过RT-PCR技术克隆病毒的主要外壳蛋白(Coat protein,CP)基因,利用Gateway技术将其重组至原核表达载体中,转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21菌株中诱导表达,将纯化后的CP作为抗原免疫日本大耳兔制备ToCV CP多克隆抗体。间接ELISA显示ToCV CP多克隆抗体的效价为1∶12 800;Western blot和田间试验结果显示多克隆抗体有很好的特异性和灵敏度。ToCV CP多克隆抗体可用于田间ToCV的检测。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒(ToCV) 外壳蛋白(CP) 原核表达 多克隆抗体 制备
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野生大麦EIL基因家族成员鉴定与表达分析
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作者 胡慧 门瑞龙 +7 位作者 赵明卓 孙铭若 徐俊英 刘海洋 杨隆维 田雨 余为仆 邱先进 《湖北农业科学》 2025年第8期226-229,共4页
基于全基因组分析技术对野生大麦(Hordeum spontaneum)EIL基因家族成员进行鉴定,解析其启动子区顺式作用元件的组成及分布特征,并分析其在逆境胁迫下的表达模式,挖掘潜在的抗逆调控基因。结果表明,野生大麦EIL基因家族包含7个成员,分别... 基于全基因组分析技术对野生大麦(Hordeum spontaneum)EIL基因家族成员进行鉴定,解析其启动子区顺式作用元件的组成及分布特征,并分析其在逆境胁迫下的表达模式,挖掘潜在的抗逆调控基因。结果表明,野生大麦EIL基因家族包含7个成员,分别为HvEIL1、HvEIL2、HvEIL3、HvEIL4、HvEIL5、HvEIL6、HvEIL7。7个成员蛋白质长度平均为489 aa,分子质量均值为53 790.52 u,等电点为4.89~6.27,不稳定性系数为42.66~60.39,均为亲水性蛋白且定位于细胞核内。野生大麦EIL基因家族成员启动子区的顺式作用元件共有14种,主要包括光响应元件、植物激素响应元件和胁迫响应元件。在野生大麦转录组数据分析中,不同处理下基因的表达水平不同。HvEIL2、HvEIL3和HvEIL7在对照处理、干旱胁迫处理和干旱后复水处理中的表达量无明显差异,表明这些基因可能不参与干旱胁迫响应;HvEIL4的表达抑制可能与抗旱性增强相关,提示其可能对大麦抗旱性起负向调节作用。 展开更多
关键词 野生大麦(Hordeum spontaneum) EIL基因家族成员 鉴定 表达分析
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玉米纹枯病菌中新减毒病毒RsHV4的特征研究 被引量:2
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作者 王鹏 李笃花 +6 位作者 张绍辉 杨孟宁 安红柳 方守国 邓清超 郭灵芳 章松柏 《河南农业科学》 北大核心 2024年第2期92-100,共9页
寻找立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)中新的弱毒病毒,为玉米纹枯病提供新的生物防治资源。采用dsRNA技术从玉米纹枯病菌菌株ZYFG11中发现一种新的病毒RsHV4(Rhizoctonia solani hypovirus4),通过基因组克隆、系统发育分析、菌株生长特... 寻找立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)中新的弱毒病毒,为玉米纹枯病提供新的生物防治资源。采用dsRNA技术从玉米纹枯病菌菌株ZYFG11中发现一种新的病毒RsHV4(Rhizoctonia solani hypovirus4),通过基因组克隆、系统发育分析、菌株生长特性测定及致病性测定等试验,对新病毒RsHV4的分类地位、减毒活性等生物学特征进行测定。结果表明,RsHV4的基因组全长为18702 nt,编码一个含5540个氨基酸的多聚蛋白(Polyprotein);系统发育分析显示,RsHV4与减毒病毒科(Hypoviridae)θ-减毒病毒属(Thetahypovirus)病毒聚为一支,其编码的蛋白质与该属的Sclerotium rolfsii hypovirus 1编码的蛋白质同源性最高,为59.46%;立枯丝核菌正常菌株JSJH6与含毒菌株ZYFG11的菌丝生长速度分别为0.50cm/d和0.41 cm/d,菌核大量形成的时间分别为培养5 d和7 d,培养10 d时50颗最大菌核的总质量分别为0.27 g和0.11 g,显示含毒菌株ZYFG11的菌丝生长速度减慢、菌核形成时间延迟、菌核体积和质量变小;接种到玉米植株2周后,接种含毒菌株ZYFG11的玉米植株第2叶鞘病斑面积占30%、第3叶鞘病斑面积占10%,接种无毒菌株JSJH6的植株第2叶鞘和第3叶鞘病斑面积达100%,说明含毒菌株ZYFG11的致病力显著降低。综上,在玉米纹枯病菌中发现了一种新的减毒病毒RsHV4,能够影响寄主真菌的生物学特征和致病力,为玉米纹枯病的防治提供了潜在的病毒资源。 展开更多
关键词 立枯丝核菌 真菌病毒 减毒病毒科 立枯丝核菌减毒病毒4 致病力 玉米
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