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大肠杆菌耐热性肠毒素(ST)分子生物学研究进展 被引量:7
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作者 许崇波 冯书章 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1994年第3期47-49,共3页
大肠杆菌耐热性肠毒素(ST)分子生物学研究进展许崇波,冯书章(吉林长春解放军农牧大学军事兽医研究所,130012)大肠杆菌耐热性肠毒素(5T)为18或19个氨基酸的小肽,免疫原性极差,100℃加热30分钟仍保持其活性... 大肠杆菌耐热性肠毒素(ST)分子生物学研究进展许崇波,冯书章(吉林长春解放军农牧大学军事兽医研究所,130012)大肠杆菌耐热性肠毒素(5T)为18或19个氨基酸的小肽,免疫原性极差,100℃加热30分钟仍保持其活性。ST可激活小肠上皮细胞内鸟苷酸环... 展开更多
关键词 大肠杆菌 肠毒素 分子生物学
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具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活力的抗体酶研究──单克隆抗体的制备及化学诱变 被引量:2
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作者 刘子 朱振奇 +4 位作者 丁兰 冯书章 罗贵民 杨同书 沈家骢 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 1996年第3期30-33,共4页
将2,4-二硝基氯苯(DNCB)专一地与底物谷胱甘肽(GSH)巯基反应,合成了半抗原GSH-S-DNP;通过蛋白质连接技术(戊二醛法)将此半抗原偶联到牛血清白蛋白(BSA)上,制备出全抗原。用吸收光谱测得每个BSA分... 将2,4-二硝基氯苯(DNCB)专一地与底物谷胱甘肽(GSH)巯基反应,合成了半抗原GSH-S-DNP;通过蛋白质连接技术(戊二醛法)将此半抗原偶联到牛血清白蛋白(BSA)上,制备出全抗原。用吸收光谱测得每个BSA分子上平均连接33个半抗原。用全抗原免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,制备出抗GSH的单克隆抗体杂交瘤细胞系4A4、6A6、1C8和4G3等。将其中的4A4培养上清经50%(NH4)2SO4沉淀、DEAE-52纤维素离子交换柱层析和BiogelP-200凝胶过滤分离得到4A4IgG抗体,经SDS-PAGE检验纯度大于90%。4A4IgG可变区中的丝氨酸(Ser)经苯甲基磺酰氟(PMSF)活化,再用硒化氢(H2Se)处理,则Ser转变成硒代半胱氨酸(SeCys),使4A4IgG引入该催化基因。化学诱变后的4A4IgG具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性,其活力是世界上最好的GPX模拟物PZ51的1100倍,是游离SeCys的2.2×104倍,已达到天然酶活力的数量级水平。经初步应用,该抗体酶可防止自由基对心肌线粒体的损伤。 展开更多
关键词 单克隆抗体 化学诱变 谷胱甘肽 过氧化物酶
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人Ⅱ型免疫缺陷病毒gag基因在大肠杆菌中的表达 被引量:2
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作者 田梅 金宁一 +6 位作者 王秀清 郭志儒 李体远 李宗株 方厚华 范洪学 殷震 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期260-262,共3页
目的:表达HIV2型基因工程gag抗原。方法:将编码HIV2型gag的部分和全部p55gag1/2基因,克隆到载体pET17b后,分别在E.ColiBL21(DE3)中表达。结果:表达产物为51和61kD融合蛋... 目的:表达HIV2型基因工程gag抗原。方法:将编码HIV2型gag的部分和全部p55gag1/2基因,克隆到载体pET17b后,分别在E.ColiBL21(DE3)中表达。结果:表达产物为51和61kD融合蛋白,并可与HIV2病人血清发生特异性反应。表达量分别为菌体总蛋白的12.2%和6.2%。结论:上述两种gag重组蛋白可在E.Coli中得到表达,且有良好的抗原性。 展开更多
关键词 人Ⅱ型免疫缺陷病毒 GAG基因 大肠杆菌 表达
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康氏木霉B-7和黑曲霉X-15原生质体的形成和再生 被引量:2
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作者 王景林 殷勤燕 +1 位作者 陈宗泽 袁毅 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期19-23,共5页
研究了康氏木霉B-7和黑曲霉X-152株纤维素酶高产菌株的原生质体制备与再生。结果表明,采用纤维素酶、蜗牛酶、溶菌酶的混合酶液,可成功地制备2株真菌的原生质体。其中,B-7以这3种酶的配比6:5:2为最佳,X-15以8:4:2为最佳。... 研究了康氏木霉B-7和黑曲霉X-152株纤维素酶高产菌株的原生质体制备与再生。结果表明,采用纤维素酶、蜗牛酶、溶菌酶的混合酶液,可成功地制备2株真菌的原生质体。其中,B-7以这3种酶的配比6:5:2为最佳,X-15以8:4:2为最佳。原生质体形成的缓冲液系统均以0.2mol/L,pH6.0磷酸盐缓冲液为宜,渗透压稳定剂则分别以0.6mol/LNaCl和0.6mol/L蔗糖为宜。以菌龄18h(B-7)和16h(X-15)2株真菌的菌丝体,在37℃下酶解90min可获得最适量的原生质体,产量分别达9×106个/ml和1.9×107个/ml,且其再生率也较高,均达95%左右。 展开更多
关键词 康氏木霉 黑曲霉 原生质体形成和再生
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