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新基因s-lap编码区的克隆及其重组表达质粒PHB/s-lap的构建 被引量:2
1
作者 宋忆淑 宋志宇 +3 位作者 费向东 贺冰 李玉新 谭大鹏 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期856-859,共4页
目的 :克隆新基因 s- lap编码区序列并构建其重组表达质粒。方法 :利用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR )方法 ,以可见光损伤早期的培养的猪视网膜色素上皮 (RPE)细胞 ds c DNA为模板 ,扩增新基因 s- lap编码区序列 ;利用基因重组技术构建 P... 目的 :克隆新基因 s- lap编码区序列并构建其重组表达质粒。方法 :利用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR )方法 ,以可见光损伤早期的培养的猪视网膜色素上皮 (RPE)细胞 ds c DNA为模板 ,扩增新基因 s- lap编码区序列 ;利用基因重组技术构建 PHB/ s- lap重组表达质粒。结果 :经测序证实获得了正确的新基因 s- lap编码区序列 ,酶切鉴定及 DNA序列分析表明已经将 s- lap基因编码区序列克隆到 PHB表达载体 ,成功地构建了 PHB/ s- lap重组表达质粒。结论 :成功地克隆了新基因 s- lap编码区序列 ,并构建了其重组表达质粒 PHB/ s- lap。 展开更多
关键词 基因 s-lap基因 克隆 分子 逆转录聚合酶链反应 基因表达 质粒
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原发性附睾肿瘤临床分析(附12例报告) 被引量:2
2
作者 郑国有 陈歧辉 +2 位作者 赵忠文 王乃义 施刚 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期196-197,共2页
关键词 原发性附睾肿瘤 诊断 分类 治疗
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s-lap/GFP融合蛋白在Hela细胞中的表达与定位 被引量:1
3
作者 宋忆淑 宋志宇 +2 位作者 费向东 贺冰 李玉新 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期39-41,共3页
目的 :观察 s- lap/ GFP融合蛋白在 Hela细胞中的表达及定位。方法 :根据 s- lap基因的编码区序列 ,应用 PCR技术突变其 3′末端终止密码子 ,并通过基因重组技术将其与 GFP基因融合 ,构建 s- lap/ GFP重组质粒 ;采用脂质体转染法 ,将 s-... 目的 :观察 s- lap/ GFP融合蛋白在 Hela细胞中的表达及定位。方法 :根据 s- lap基因的编码区序列 ,应用 PCR技术突变其 3′末端终止密码子 ,并通过基因重组技术将其与 GFP基因融合 ,构建 s- lap/ GFP重组质粒 ;采用脂质体转染法 ,将 s- lap/ GFP融合基因转入 Hela细胞中 ,用荧光显微镜观察其表达。结果 :s- lap/ GFP重组质粒序列测定的结果与预期设计完全一致。荧光显微镜显示 ,在转染 GFP基因的 Hela细胞中 ,荧光呈网状均匀分布于细胞浆内 ,而细胞核内低表达 ;在转染 s- lap/ GFP融合基因的 Hela细胞中 ,荧光均匀分布于整个细胞 ,尤其以细胞核内高表达。结论 :s- lap/ GFP融合蛋白可在人 Hela细胞中表达 ,并主要定位于细胞核。 展开更多
关键词 s-lap/GFP融合蛋白 重组融合蛋白质类/遗传学 基因融合/方法 HELA细胞
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RPE细胞光损伤相关新基因s-lap编码区克隆及s-lap/GFP融合蛋白在B16黑色素瘤细胞中的表达与定位 被引量:1
4
作者 宋忆淑 李玉新 +2 位作者 费向东 鲍永利 谭大鹏 《眼科新进展》 CAS 2005年第1期11-13,共3页
目的 克隆新基因s lap编码区序列 ,研究其编码的蛋白质在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。方法 分析s lapcDNA序列 ,建立视网膜色素上皮 (retinalpigmentep ithelium ,RPE)细胞光损伤模型 ,RT PCR克隆其编码区序列 ,构建了带有绿色荧... 目的 克隆新基因s lap编码区序列 ,研究其编码的蛋白质在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。方法 分析s lapcDNA序列 ,建立视网膜色素上皮 (retinalpigmentep ithelium ,RPE)细胞光损伤模型 ,RT PCR克隆其编码区序列 ,构建了带有绿色荧光蛋白的目的基因真核表达重组质粒 pcDNA3 .1 GFP/s lap ,转染B16黑色素瘤细胞 ,观察s lap/GFP融合蛋白在B16黑色素瘤细胞内的表达与定位。结果 s lapcDNA序列含有编码10 1个氨基酸的开放读码框架 ,有 2个可能的N 糖基化位点 ,1个可能的caseinkinaseII磷酸化位点和 2个可能的PKC磷酸化位点 ;成功地克隆了s lap蛋白编码区序列 ,构建了其真核表达载体 ,荧光显微镜观察 ,在转染 pcDNA3 .1 GFP质粒的B16黑色素瘤细胞中 ,荧光呈网状分布于细胞浆内 ,而细胞核内低表达 ;在转染s lap/GFP融合基因的B16黑色素瘤细胞中 ,荧光均匀分布于整个细胞 ,尤其以细胞核内高表达。结论 新基因s lap编码的蛋白质可在B16黑色素瘤细胞中获得表达 ,并以细胞核内高表达。 展开更多
关键词 s-lap基因 克隆 s-lap/GFP 融合蛋白 基因表达 基因定位
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超临界流体萃取技术在中草药成分研究中的应用 被引量:12
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作者 赵启铎 贡济宇 +2 位作者 高颖 刁习霞 李书丰 《中医药学刊》 2003年第5期821-823,共3页
对近年来超临界流体萃取技术在中草药成分研究中的应用作了综述,即:挥发性成分及挥发油、生物碱、香豆素和木脂素、黄酮类成分、醌及其衍生物、糖及苷类等的提取。
关键词 超临界流体萃取技术 中草药成分 应用
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奥扎格雷钠治疗急性脑梗死120例疗效观察 被引量:2
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作者 任守成 孙永敏 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期351-351,共1页
关键词 脑梗塞 奥扎格雷钠 疗效
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P_(21)^(ras)在胃癌细胞学诊断中的意义
7
作者 徐红 郑玉贵 +1 位作者 王文军 朱冬元 《白求恩医科大学学报》 CSCD 2000年第4期391-392,共2页
目的 :探讨 Pras2 1在胃癌细胞学诊断中的临床意义。方法 :采用免疫组化单克隆抗体方法检测细胞刷检中的 ras基因产物 P2 1。结果 :取自正常胃粘膜或良性病变的 2 8例胃良性上皮细胞中有2 6例呈阴性反应 ,仅有 2例胃溃疡病变呈弱阳性反... 目的 :探讨 Pras2 1在胃癌细胞学诊断中的临床意义。方法 :采用免疫组化单克隆抗体方法检测细胞刷检中的 ras基因产物 P2 1。结果 :取自正常胃粘膜或良性病变的 2 8例胃良性上皮细胞中有2 6例呈阴性反应 ,仅有 2例胃溃疡病变呈弱阳性反应。58例胃癌中的 50例呈阳性反应而且与组织分化程度无关。结论 :免疫组化方法检测 Pras2 1可能成为一种新的组织学诊断手段。 展开更多
关键词 胃癌 P^ras21 细胞学诊断
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宫内解脲支原体感染与新生儿出生体重 被引量:2
8
作者 刘子韬 李丽娜 +1 位作者 王俊松 杨玉兰 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1998年第5期482-484,共3页
目的 :研究孕妇宫内感染解脲支原体 (Uu)后对新生儿出生体重的影响。方法 :利用 PCR技术检测 46例足月新生儿胎盘组织、脐静脉血及咽吸出物中解脲支原体感染状况。结果 :Uu+的胎盘平均重量与 Uu-的胎盘平均重量相比差异显著 (P<0 .0... 目的 :研究孕妇宫内感染解脲支原体 (Uu)后对新生儿出生体重的影响。方法 :利用 PCR技术检测 46例足月新生儿胎盘组织、脐静脉血及咽吸出物中解脲支原体感染状况。结果 :Uu+的胎盘平均重量与 Uu-的胎盘平均重量相比差异显著 (P<0 .0 5)。胎盘 Uu+的足月新生儿平均出生体重较 Uu-的足月新生儿平均出生体重低 41 1 g,差异显著 (P<0 .0 5)。足月小样儿胎盘 Uu感染率为75% (3/4) ,而足月正常儿胎盘 Uu感染率为 2 1 .43% ,差异显著 (P=0 .0 4 9)。咽吸出物、脐血 Uu+的足月新生儿平均体重虽然较 Uu-组低 ,但无显著差异。结论 :宫内胎盘 展开更多
关键词 解脲支原体 宫内感染 新生儿 出生体重 脐静脉血
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