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大补阴丸中醋龟甲的真伪鉴定研究
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作者 陈香 韩婧 +5 位作者 王佳祺 彭江松 曹邵阳 宁艺柯 夏国华 杨欢 《中成药》 北大核心 2025年第3期1031-1035,共5页
目的建立大补阴丸中醋龟甲的真伪鉴定方法。方法根据龟甲(乌龟)及其伪品(花龟、巴西龟和鳄龟)的线粒体基因序列差异设计了引物WG、HG、BX和EG,采用荧光定量PCR扩增DNA并进行方法学考察,对8批大补阴丸中醋龟甲进行鉴定。结果含有乌龟、... 目的建立大补阴丸中醋龟甲的真伪鉴定方法。方法根据龟甲(乌龟)及其伪品(花龟、巴西龟和鳄龟)的线粒体基因序列差异设计了引物WG、HG、BX和EG,采用荧光定量PCR扩增DNA并进行方法学考察,对8批大补阴丸中醋龟甲进行鉴定。结果含有乌龟、花龟、巴西龟和鳄龟的DNA供试品在与上述引物经扩增后,分别检测到了荧光信号,并具备特定温度单一峰,T_(m)分别为75.40、79.12、80.16、78.82℃;最低检出限为1×10^(2)copies/μL,重复性实验中CV<1%;分别有2批、1批和5批大补阴丸中所含醋龟甲被鉴定为正品、掺伪品和伪品。结论该方法可用于含醋龟甲制剂的质量控制;大补阴丸中醋龟甲伪品较多,其质量管理亟待加强。 展开更多
关键词 大补阴丸 中成药 醋龟甲 特异性引物 荧光定量PCR
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社会共治视阈下药品安全监管体系优化研究 被引量:9
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作者 周丽金 尚如霞 詹长春 《卫生经济研究》 北大核心 2019年第6期54-57,共4页
目的:基于社会共治视域,从监管主体、监管客体、监管手段和反馈机制四个维度构建药品安全监管体系。方法:选取14个药品安全监管检测指标,利用topsis法综合评价江苏省药品安全监管检测情况。结果:2013-2017年,3个样本城市的药品监管检测... 目的:基于社会共治视域,从监管主体、监管客体、监管手段和反馈机制四个维度构建药品安全监管体系。方法:选取14个药品安全监管检测指标,利用topsis法综合评价江苏省药品安全监管检测情况。结果:2013-2017年,3个样本城市的药品监管检测指标的C_i值均不同程度下降,但总体来说,江苏省药品安全监管检测情况较为稳定;从均值看,苏南、苏中、苏北并无明显差异。结论:建立统一的药品安全监管机构,强化检验检测流程监管,构建社会共治格局。 展开更多
关键词 社会共治 药品安全 监管体系 TOPSIS法
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荧光定量PCR法鉴别蛤蚧定喘丸中醋鳖甲 被引量:1
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作者 韩婧 陈香 +4 位作者 李叶 沈玉萍 孙小祥 夏国华 杨欢 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1209-1213,共5页
目的建立蛤蚧定喘丸中醋鳖甲的DNA分子鉴定方法。方法根据鳖、佛罗里达鳖线粒体基因序列的差异设计特异性引物TS和AF,进行荧光定量PCR和方法学考察,然后对市售蛤蚧定喘丸中醋鳖甲进行鉴定。结果含有鳖、佛罗里达鳖的DNA样品仅与相应引... 目的建立蛤蚧定喘丸中醋鳖甲的DNA分子鉴定方法。方法根据鳖、佛罗里达鳖线粒体基因序列的差异设计特异性引物TS和AF,进行荧光定量PCR和方法学考察,然后对市售蛤蚧定喘丸中醋鳖甲进行鉴定。结果含有鳖、佛罗里达鳖的DNA样品仅与相应引物扩增后可检测到荧光信号,有特定温度单一峰,T_(m)分别为77.45、79.72℃。该方法的检测限为10 copies/μL,重复性较高(CV<1%)。10批蛤蚧定喘丸中有9批仅检出鳖DNA,被鉴定为正品;1批同时检出鳖DNA和佛罗里达鳖DNA,被鉴定为掺伪品。结论本研究所建立的方法可快速、可靠地鉴定蛤蚧定喘丸中醋鳖甲炮制品成分,有助于监管含醋鳖甲成方制剂的质量,并为成方制剂中动物药成分的专属性鉴定研究提供新途径。 展开更多
关键词 蛤蚧定喘丸 醋鳖甲 特异性引物 荧光定量PCR
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配伍比例及炮制方法对川楝子-小茴香药对中9种成分含量的影响 被引量:3
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作者 侯建忠 朱顺娟 +3 位作者 李瑶 王小鹏 郝建明 曹云飞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期156-161,共6页
目的考察不同配伍比例及炮制方法对川楝子-小茴香药对中芦丁、异槲皮素、阿魏酸、槲皮素、异川楝素、山柰酚、川楝素、α-蒎烯、反式茴香脑含量的影响,探讨其配伍使用的最优比例。方法分析采用HPLC-DAD法,ZORBAX SB C_(18)色谱柱(4.6 mm... 目的考察不同配伍比例及炮制方法对川楝子-小茴香药对中芦丁、异槲皮素、阿魏酸、槲皮素、异川楝素、山柰酚、川楝素、α-蒎烯、反式茴香脑含量的影响,探讨其配伍使用的最优比例。方法分析采用HPLC-DAD法,ZORBAX SB C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;DAD检测器。采用SPSS 24.0软件分析数据之间的差异性。结果9种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9991),平均加样回收率96.19%~103.13%,RSD 1.86%~2.67%。川楝子-小茴香1∶1、1∶2、2∶1组中9种成分总含量高于川楝子+小茴香(1∶0+0∶1)组(P<0.05),川楝素-小茴香(1∶1)组总含量最高;炮制后,川楝素、异川楝素、α-蒎烯、反式茴香脑含量降低(P<0.05,P<0.01),异槲皮素含量升高(P<0.01),其余成分含量变化不明显。结论该方法准确度高,重复性好,川楝子与小茴香配伍后有利于9种成分总量的溶出,比例为1∶1时含量最高。 展开更多
关键词 川楝子 小茴香 药对 炮制方法 配伍比例 含量测定 HPLC-DAD
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乌梢蛇醇溶蛋白质提取工艺优化及其指纹图谱表征
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作者 谢超 宋美营 +4 位作者 王巧宇 张林松 刘莹 曹云飞 闻崇炜 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2177-2181,共5页
目的优化乌梢蛇醇溶蛋白质提取工艺,并对其进行指纹图谱表征。方法在单因素试验基础上,以料液比、乙醇体积分数、提取温度、提取时间为影响因素,提取率为评价指标,响应面法优化提取工艺,再进行FTIR、SDS-PAGE分析。结果最佳条件为料液比... 目的优化乌梢蛇醇溶蛋白质提取工艺,并对其进行指纹图谱表征。方法在单因素试验基础上,以料液比、乙醇体积分数、提取温度、提取时间为影响因素,提取率为评价指标,响应面法优化提取工艺,再进行FTIR、SDS-PAGE分析。结果最佳条件为料液比1∶43.15,乙醇体积分数46.35%,提取温度37.53℃,提取时间250min,提取率为0.4072%。醇溶蛋白质在4000~400cm-1波数范围内有10个吸收峰,并且其种类丰富,分子量在11.19~158.10kDa范围内,其中26.48、19.67kDa为指纹图谱主峰。结论本实验可为乌梢蛇开发利用及分析鉴定提供依据。 展开更多
关键词 乌梢蛇 醇溶蛋白质 提取工艺 指纹图谱 响应面法 FTIR SDS-PAGE
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响应面法优化金钱白花蛇蛋白质的酸提工艺
6
作者 母璇 刘梦 +3 位作者 李靓颖 张峻豪 张林松 闻崇炜 《粮食与油脂》 北大核心 2024年第3期68-71,81,共5页
以金钱白花蛇为原料,通过酸提法提取金钱白花蛇中的蛋白质,以蛋白质得率为指标,在单因素试验基础上通过响应面法优化提取工艺,并对提取物进行指纹图谱分析。结果表明:最佳酸提条件为醋酸钠浓度0.20mol/L、料液比1∶40(g/mL)、提取时间6 ... 以金钱白花蛇为原料,通过酸提法提取金钱白花蛇中的蛋白质,以蛋白质得率为指标,在单因素试验基础上通过响应面法优化提取工艺,并对提取物进行指纹图谱分析。结果表明:最佳酸提条件为醋酸钠浓度0.20mol/L、料液比1∶40(g/mL)、提取时间6 h、提取温度45℃,在此条件下蛋白质得率为3.92%。指纹图谱分析表明,酸提法所得金钱白花蛇的蛋白质种类较丰富。 展开更多
关键词 金钱白花蛇 蛋白质 酸提 指纹
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鹿角与鹿茸蛋白质鉴定 被引量:4
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作者 杨欢 Roselyn Tehzee Gblinwon +7 位作者 杨娅娅 王强 陈香 卢梦瑶 郑晗雪 吴沅臻 夏国华 沈玉萍 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1859-1864,共6页
目的 鉴定鹿角与鹿茸蛋白质。方法 通过SDS-PAGE、2-DE分析鹿角与鹿茸蛋白质组成,比较两者电泳图谱,找出各自稳定的蛋白质条带或斑点及其差异。将两者SDS-PAGE蛋白质条带以胰蛋白酶进行胶内消化后,采用MALDI-TOF/TOF质谱分析,通过MASCO... 目的 鉴定鹿角与鹿茸蛋白质。方法 通过SDS-PAGE、2-DE分析鹿角与鹿茸蛋白质组成,比较两者电泳图谱,找出各自稳定的蛋白质条带或斑点及其差异。将两者SDS-PAGE蛋白质条带以胰蛋白酶进行胶内消化后,采用MALDI-TOF/TOF质谱分析,通过MASCOT检索匹配以鉴定蛋白质。结果 在SDS-PAGE图谱中,鹿角在约75、66.2 kD处呈现出2个清晰的蛋白质条带,而鹿茸则在约75、61、45、20 kD处呈出现4个蛋白质条带;2-DE分析显示,鹿角蛋白质斑点集中于Ⅰ区(pH5~7,M_(w) 45 kD)以及Ⅱ区(pH10,M_(w) 66.2 kD);鹿茸蛋白质斑点则主要分布在Ⅲ区(pH5~7,M_(w) 45 kD),另外,在pH5~6和M_(w) 20 kD的区域内存在3个稳定出现的蛋白质斑点。通过生物质谱分析,分别从鹿角与鹿茸中鉴定出2、4个蛋白质,评分高于100。结论 鹿角与鹿茸蛋白质电泳图谱存在明显差异,可为两者鉴别提供科学依据。 展开更多
关键词 鹿角 鹿茸 蛋白质 电泳 生物质谱
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不同产地穿山龙中薯蓣皂苷元比较 被引量:5
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作者 孙传菊 葛重宇 +3 位作者 于长杰 杨燕飞 沈玉萍 杨欢 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2415-2419,共5页
目的比较不同产地穿山龙Dioscorea nipponica Makino中薯蓣皂苷元的含有量。方法采用加压液体萃取法获得薯蓣总皂苷,并利用加压两相酸水解法制备供试品溶液。穿山龙50%乙醇提取物的分析采用Waters SunFire RP18柱(150 mm×4.6 mm,5... 目的比较不同产地穿山龙Dioscorea nipponica Makino中薯蓣皂苷元的含有量。方法采用加压液体萃取法获得薯蓣总皂苷,并利用加压两相酸水解法制备供试品溶液。穿山龙50%乙醇提取物的分析采用Waters SunFire RP18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-水;体积流量1.0 mL/min;检测波长203 nm;柱温30℃。结果通过新方法制备所得的供试品溶液中薯蓣皂苷元的平均含有量比传统方法高出18%。薯蓣皂苷元在10.94~1 400μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 5),平均加样回收率96.88%~103.0%,RSD<3%,平均含有量0.695%~2.263%。结论不同产地穿山龙中薯蓣皂苷元的含有量差异很大,其中产于黑龙江伊春的最高,且东北三省产的远高于其他产地。 展开更多
关键词 穿山龙 产地 薯蓣皂苷元 加压液体萃取法 加压双相酸水解法
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基于高光谱和超声成像技术的原切与合成调理牛排鉴别 被引量:3
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作者 孙宗保 王天真 +4 位作者 邹小波 刘源 梁黎明 李君奎 刘小裕 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第8期257-263,共7页
针对市场上存在合成调理牛排冒充原切售卖的现象,研究利用高光谱和超声成像技术对它们进行鉴别的方法。分别采集原切与合成调理牛排的高光谱和超声图像信息,利用灰度共生矩阵法提取图像的纹理特征值,分别建立线性判别分析、K最邻近(K-ne... 针对市场上存在合成调理牛排冒充原切售卖的现象,研究利用高光谱和超声成像技术对它们进行鉴别的方法。分别采集原切与合成调理牛排的高光谱和超声图像信息,利用灰度共生矩阵法提取图像的纹理特征值,分别建立线性判别分析、K最邻近(K-nearest neighbor,KNN)、反向传播人工神经网络和极限学习机(extreme learning machine,ELM)4种鉴别模型,而后将2种技术数据融合建模,并采用连续投影法、竞争性自适应重加权算法(competitive adaptive reweighted sampling,CARS)、变量组合集群分析(variables combination population analysis,VCPA)法3种方法筛选特征变量建模。结果表明:合成调理牛排的肉块组织均匀,超声图像信号弱、均一性好,与原切调理牛排图像存在差异。高光谱和超声成像技术的最佳模型分别为KNN和ELM,模型预测集识别率分别为95.00%和90.00%。数据融合后建模,最佳模型ELM模型预测集识别率模型为97.50%,在3种变量选择方法中,CARS和VCPA选择的纹理变量建立的模型预测集识别率达到100.00%。研究表明高光谱和超声成像数据融合结合变量选择方法可以快速准确地鉴别原切和合成调理牛排。 展开更多
关键词 超声成像技术 高光谱成像技术 调理牛排 数据融合
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3种胶类中药在加工过程中的动态变化 被引量:10
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作者 李楠 郑洁 +5 位作者 陈立群 周怡莹 赖振梅 覃拯 沈玉萍 杨欢 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1865-1868,共4页
目的探讨3种胶类驴皮、龟甲、鹿角在加工成中药的过程中蛋白质的动态变化规律。方法利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分别对3种胶类原有蛋白质组成进行分析,按照《中国药典》规定的方法加工成阿胶、龟甲胶和鹿角胶,并分析在不同煎煮时间收集... 目的探讨3种胶类驴皮、龟甲、鹿角在加工成中药的过程中蛋白质的动态变化规律。方法利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分别对3种胶类原有蛋白质组成进行分析,按照《中国药典》规定的方法加工成阿胶、龟甲胶和鹿角胶,并分析在不同煎煮时间收集的煎出液以及最终产品中的蛋白质组成,最后通过比较电泳图谱分析蛋白质在加工过程中的动态变化规律。结果驴皮、龟甲、鹿角中含有丰富的蛋白质类化学成分,在10~250 k Da区间均有分布;随着煎煮时间的延长以及辅料的加入,蛋白质在泳道中逐渐呈现弥散现象。此外,阿胶和鹿角胶中蛋白质的相对分子质量介于15~250 k Da,甚至更高,而龟甲胶则基本上小于50 k Da,分布区域有明显不同。结论该技术可用于考察胶类中药加工过程的规范程度,对胶类中药的质量控制有一定的参考价值。 展开更多
关键词 胶类中药 阿胶 龟甲胶 鹿角胶 蛋白质 SDS-PAGE
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特异性扩增技术鉴定龟甲与鳖甲 被引量:8
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作者 李楠 虞平添 +7 位作者 焦兆群 陈立群 郑阳 黄学贵 陈红杰 蔡宝昌 杨欢 沈玉萍 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期2328-2333,共6页
目的基于特异性扩增建立动物药龟甲与鳖甲的真伪鉴定技术。方法根据龟甲与鳖甲及3种常见伪品的全基因组序列的差异设计了5对特异性引物(PCR、PTS、PMS、PPS、PAF),采用SDS法、酚仿抽提法从龟甲与鳖甲中提取与纯化DNA,并通过聚合酶链式反... 目的基于特异性扩增建立动物药龟甲与鳖甲的真伪鉴定技术。方法根据龟甲与鳖甲及3种常见伪品的全基因组序列的差异设计了5对特异性引物(PCR、PTS、PMS、PPS、PAF),采用SDS法、酚仿抽提法从龟甲与鳖甲中提取与纯化DNA,并通过聚合酶链式反应(PCR)对目标片段进行扩增,产物以琼脂糖凝胶电泳分析及凝胶成像系统检测,并根据电泳条带的有无及分子量大小以鉴定真伪。结果龟甲与鳖甲及其常见伪品巴西龟、花龟、佛罗里达鳖的DNA经扩增后分别在120、120、81、105、114 bp处产生条带,且引物间无交叉反应,体现出很强的专属性,5个物种DNA的检出限为1 ng。自制药材、饮片、掺伪品均扩增出与目的片段相一致的条带。在市售样品中,18批龟甲和20批鳖甲经鉴定为正品,2批龟甲药材经鉴定为来源于巴西龟的伪品。结论本文所建立的技术可准确、快速地鉴定龟甲与鳖甲的真伪,有助于监控其产品质量。 展开更多
关键词 龟甲 鳖甲 掺伪 特异性扩增
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桑黄菌丝体多糖的分离纯化及抗氧化、抗肿瘤活性分析 被引量:8
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作者 李媛媛 李奉楠 +1 位作者 杨小明 李岷 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第11期127-135,共9页
采用水提醇沉法制备桑黄菌丝体粗多糖,分别用终浓度为30%、45%和60%的硫酸铵溶液对桑黄菌丝体中粗多糖进行粗分离,并比较所得各多糖组分的抗氧化、抗肿瘤活性。对其中活性强的组分采用离子交换树脂柱色谱纯化,采用高效排阻色谱-折光示... 采用水提醇沉法制备桑黄菌丝体粗多糖,分别用终浓度为30%、45%和60%的硫酸铵溶液对桑黄菌丝体中粗多糖进行粗分离,并比较所得各多糖组分的抗氧化、抗肿瘤活性。对其中活性强的组分采用离子交换树脂柱色谱纯化,采用高效排阻色谱-折光示差检测器-多角度光散射仪对纯化多糖进行均一性分析和分子量测定。结果显示,45%硫酸铵分离多糖IPS45显示最强的抗肿瘤活性及较好的清除超氧阴离子活性,IPS45经DEAE-52纤维素离子交换柱纯化得到四个级分,经高效排阻色谱分析,其中蒸馏水洗脱级分(IPS45-W)为均一多糖,重均分子量为79.1 kDa;气相色谱分析其单糖组成为甘露糖:葡萄糖:半乳糖:未知单糖,摩尔比为1.57:8.38:1.09:1.00。IPS45-W可抑制HepG2细胞生长,当浓度为50μg/mL时,对HepG2细胞的抑制率为56.74%,高于前期研究的乙醇沉淀分离所得桑黄菌丝体均一多糖同浓度下11%~35%的抑制率。该结果为不同组成的桑黄多糖的分离和应用提供依据。 展开更多
关键词 桑黄菌丝体多糖 硫酸铵 分离 抗肿瘤 抗氧化
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僵蚕碱溶性蛋白质的提取工艺优化及指纹图谱分析 被引量:2
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作者 朱锐灵 黄佳滢 +3 位作者 刘莹 徐悦 张林松 闻崇炜 《江苏农业科学》 北大核心 2021年第3期170-175,共6页
建立稀碱法提取僵蚕蛋白质的最佳工艺,并对其进行相应SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)指纹图谱分析。单因素考察缓冲液pH值、液料比、提取时间和提取温度对僵蚕碱溶性蛋白质提取率的影响,随后以Box-Behnken组合设计响应面... 建立稀碱法提取僵蚕蛋白质的最佳工艺,并对其进行相应SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)指纹图谱分析。单因素考察缓冲液pH值、液料比、提取时间和提取温度对僵蚕碱溶性蛋白质提取率的影响,随后以Box-Behnken组合设计响应面优化,对试验结果进行回归拟合分析,获得上述因素对碱溶性蛋白质提取率的量化关系,确定最佳提取条件,并对提取的碱溶性蛋白质进行SDS-PAGE指纹图谱分析。结果表明最佳提取工艺条件为:Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷盐酸盐)缓冲液pH值8.0、液料比58mL∶1g,提取温度为40℃,提取时间为205min,此时碱溶性蛋白质提取率可达2.29%。SDS-PAGE指纹图谱结果表明僵蚕碱溶性蛋白质含有29.85、27.28ku2条迁移率相近的高丰度特征性条带,分别占总蛋白量的36.37%、32.65%,同时还有78.8、69ku较高丰度特征性条带,该指纹图谱具有种属特异性。本研究建立了僵蚕碱溶性蛋白质的最佳提取工艺条件,所得SDS-PAGE指纹图谱可为僵蚕药材的分子鉴定提供参考依据。 展开更多
关键词 僵蚕 碱溶性蛋白质 响应面 提取工艺 指纹图谱
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僵蚕药材蛋白质分级指纹图谱建立及产地鉴定相关分子研究 被引量:1
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作者 宋美营 王立勇 +4 位作者 王巧宇 张林松 徐卫东 汤建 闻崇炜 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2023年第9期1486-1494,共9页
建立云南与四川僵蚕药材的总蛋白质指纹图谱及分级指纹图谱,对比分析以发现其中的差异表达蛋白质分子并进行鉴定及生物信息学分析,探索其用于产地鉴定的可行性。提取两种僵蚕的酸溶、碱溶、水溶及醇溶性总蛋白质,对其进行丙酮分级沉淀,... 建立云南与四川僵蚕药材的总蛋白质指纹图谱及分级指纹图谱,对比分析以发现其中的差异表达蛋白质分子并进行鉴定及生物信息学分析,探索其用于产地鉴定的可行性。提取两种僵蚕的酸溶、碱溶、水溶及醇溶性总蛋白质,对其进行丙酮分级沉淀,对所得样品进行SDS-PAGE指纹图谱对比分析,对所得差异条带进行LC-MS/MS分析,数据库检索后进行生物信息学分析。两种僵蚕的总蛋白质指纹图谱相似度很高,难以据此进行产地鉴定;两种僵蚕的分级指纹图谱则有较显著差异,有望用于产地鉴定;依据分级指纹图谱差异共鉴定出β-葡萄糖苷酶、抗胰凝乳蛋白酶、抗胰蛋白酶、含脂肪酶结构域蛋白等273种蛋白质。云南与四川僵蚕的蛋白质组成及其分级指纹图谱存在显著差异,有望用作产地鉴定的分子依据;醇溶蛋白质构建分级指纹图谱可以提供更加丰富的信息及更好的分辨率;分级指纹图谱技术具有简便易行、分辨率较高的优点,为其他中药材的产地鉴定研究提供了方法学思路。 展开更多
关键词 僵蚕 蛋白质 分级指纹图谱 产地鉴定
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响应面法优化金钱白花蛇醇溶蛋白提取工艺 被引量:5
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作者 刘梦 谢超 +3 位作者 张林松 宋美营 母璇 闻崇炜 《粮食与油脂》 北大核心 2023年第2期73-77,共5页
以金钱白花蛇为原料,在单因素试验基础上采用响应面法优化其醇溶蛋白提取工艺,并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、高效液相色谱(HPLC)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)指纹图谱分析。结果表明:最佳提取工艺条件为乙醇体积... 以金钱白花蛇为原料,在单因素试验基础上采用响应面法优化其醇溶蛋白提取工艺,并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、高效液相色谱(HPLC)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)指纹图谱分析。结果表明:最佳提取工艺条件为乙醇体积分数40%、料液比1∶17(g/mL)、提取时间4 h、提取温度40℃,此时醇溶蛋白得率为0.51%。SDS-PAGE指纹图谱分析表明金钱白花蛇醇溶蛋白分子质量主要介于26.69~88.02 kDa,26.69~28.34 kDa和70.84~88.02 kDa处的蛋白质丰度较高,分别占蛋白质总量的55.2%和31.8%;HPLC结果表明,主要金钱白花蛇醇溶蛋白的保留时间为2.928和3.452 min;FTIR结果表明,金钱白花蛇醇溶蛋白在3526.67、2918.31、2357.83、1940.24、1354.05、841.90、546.07和444.52 cm^(-1)处有特征吸收峰。试验结果可为金钱白花蛇醇溶蛋白资源的开发利用及药理活性研究提供依据。 展开更多
关键词 金钱白花蛇 醇溶蛋白 提取工艺 响应面 优化
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UPLC-MS/MS法同时测定通窍耳聋丸中4种成分 被引量:1
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作者 陈香 栾雨 毛飞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期3450-3453,共4页
目的建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定通窍耳聋丸(北柴胡、龙胆、黄芩等)中4种成分的含量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Waters CORTECS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm);流动相水-甲醇,梯度洗脱;体积流量0.4... 目的建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定通窍耳聋丸(北柴胡、龙胆、黄芩等)中4种成分的含量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Waters CORTECS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm);流动相水-甲醇,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;柱温35℃;电喷雾离子源,正离子检测;多反应监测模式。结果黄芩苷、龙胆苦苷、橙皮苷、柴胡皂苷A在各自范围内线性关系良好(R^(2)>0.9900),平均加样回收率97.45%~99.03%,RSD 0.3%~1.6%。结论该方法简便快速,灵敏度高,专属性强,稳定可靠,可用于通窍耳聋丸的质量控制。 展开更多
关键词 通窍耳聋丸 黄芩苷 龙胆苦苷 橙皮苷 柴胡皂苷A 超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)
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银杏酸的热稳定性及银杏酸C15:1热分解动力学 被引量:1
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作者 李媛媛 陈晓风 +1 位作者 杨小明 李奉楠 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第14期77-84,共8页
为研究银杏酸的热稳定性及热分解动力学,采用高效液相色谱-电喷雾电离-质谱确定银杏酸70℃热分解产物,以热重分析法对银杏酸C15:1的热分解行为及其动力学规律进行考察。在静止空气气氛下,控制升温速率为5.0、10.0、15.0和20.0℃·mi... 为研究银杏酸的热稳定性及热分解动力学,采用高效液相色谱-电喷雾电离-质谱确定银杏酸70℃热分解产物,以热重分析法对银杏酸C15:1的热分解行为及其动力学规律进行考察。在静止空气气氛下,控制升温速率为5.0、10.0、15.0和20.0℃·min^(−1),记录银杏酸C15:1的热重-差示扫描量热曲线,运用Ozawa-Flynn-Wall、Friedman和Šatava-Šesták、Coats-Redfern法计算银杏酸C15:1的热分解参数。结果表明银杏酸70℃加热30 d后有少量银杏酚产生。银杏酸C15:1热重曲线上最明显的失重发生在第一失重阶段,失重速率峰温度243℃,失重率为14.37%,为银杏酸C15:1的脱羧分解。计算得出银杏酸C15:1热脱羧反应表观活化能为67.44 kJ·mol^(−1)。银杏酸C15:1脱羧动力学模型函数系Avrami-Erofeev方程,其积分形式为G(α)=[−ln(1−α)]^(1/2),分解机理为随机成核和随后生长,反应级数n=1/2。该研究为银杏制品中银杏酸含量的控制提供帮助。 展开更多
关键词 银杏酸 热分解 热重分析 分解机理
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柠檬醛通过MDM2/p53信号通路对小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响 被引量:4
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作者 张毅 魏子辰 +2 位作者 庞磊 严莹 郁多男 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1053-1060,共8页
目的:探讨柠檬醛(citral)对小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞的作用和机制。方法:采用不同质量浓度(0~120 mg/L)的柠檬醛处理38B9细胞,通过CCK-8法检测细胞活力,并计算柠檬醛的半数抑制浓度(IC_(50))。根据IC_(50)值设置低、中、高三个浓度(5、1... 目的:探讨柠檬醛(citral)对小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞的作用和机制。方法:采用不同质量浓度(0~120 mg/L)的柠檬醛处理38B9细胞,通过CCK-8法检测细胞活力,并计算柠檬醛的半数抑制浓度(IC_(50))。根据IC_(50)值设置低、中、高三个浓度(5、10、20 mg/L)处理38B9细胞,并检测柠檬醛对38B9细胞增殖的影响。采用瑞氏-吉姆萨染色观察38B9细胞形态变化。通过流式细胞术检测38B9细胞凋亡及细胞周期。利用RT-qPCR和Western blot检测38B9细胞凋亡及细胞周期相关因子的mRNA和蛋白表达水平,小鼠抑瘤实验观察柠檬醛对38B9细胞生长的作用。通过PubChem在线预测柠檬醛可能的靶点,并绘制蛋白质互作网络图。使用ClusterProfile对结果进行GO富集分析并使用ggplot2绘制可视化柱状图。利用Western blot检测38B9细胞MDM2/p53信号通路相关蛋白的表达水平。结果:柠檬醛能有效抑制小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞的活力,诱导其凋亡并阻滞其细胞周期,促进Puma、Noxa、Bax和p21的mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),抑制Bcl-2和CDK2的mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),抑制MDM2的蛋白表达(P<0.05),促进p53的蛋白表达(P<0.05)。结论:柠檬醛能够显著抑制小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞的增殖,同时诱导细胞凋亡并引起细胞周期阻滞,其机制可能与MDM2/p53信号通路有关。 展开更多
关键词 柠檬醛 B细胞淋巴瘤 细胞凋亡 细胞周期 MDM2/p53信号通路
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