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大鼠脂肪干细胞体外诱导分化为胰岛样细胞
被引量：
1
1
作者
房艳
刘雷
+3 位作者
宋慧娟
单伟
曾瑞霞
李德华
《解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期588-592,共5页
目的：探索大鼠脂肪干细胞（ADSCs）向胰岛样细胞诱导分化的诱导方案。方法：取SD大鼠腹股沟区脂肪组织，酶消化法分离培养ADSCs，观察细胞形态，流式细胞仪检测表面抗原；应用4种方案［NA、 NG、 AG、 NAG， N：尼克酰胺；A：活化素A...
目的：探索大鼠脂肪干细胞（ADSCs）向胰岛样细胞诱导分化的诱导方案。方法：取SD大鼠腹股沟区脂肪组织，酶消化法分离培养ADSCs，观察细胞形态，流式细胞仪检测表面抗原；应用4种方案［NA、 NG、 AG、 NAG， N：尼克酰胺；A：活化素A； G：胰高血糖素样肽-1 （GLP-1）］进行诱导，观察形态变化，ELISA法检测胰岛素及C肽分泌量，行双硫腙染色，RT-PCR检测胰岛β细胞相关基因。结果：ADSCs长梭形，CD44高表达，CD49d低表达，CD31、 CD106阴性；诱导7d细胞突起变短呈鹅卵石样，14d AG、 NAG组细胞近圆形，折光性增强，21d NAG组出现明显的胰岛样细胞团。ELISA显示21d NAG组胰岛素及C肽释放量明显高于其他组。双硫腙染色21d NAG组细胞团呈砖红色阳性表达。RT-PCR 14d仅AG和NAG组检测到胰十二指肠同源盒-1基因（PDX1）， 21d AG和NAG组均可检测到葡萄糖转运蛋白2（GLUT2）、 insulin 2、 insulin 1、 PDX1，但表达水平有差异，NAG组接近正常鼠胰岛β细胞，明显高于AG组。结论：ADSCs具有干细胞特性，在NAG诱导条件下可分化为有功能的胰岛样细胞。
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关键词
脂肪干细胞
诱导
分化
胰岛样细胞
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职称材料
SiRNA沉默HLA-A2表达的人骨髓间充质干细胞对人异体T淋巴细胞分泌功能及其诱导成骨能力的影响
2
作者
单伟
包翠芬
+3 位作者
郑仕杰
刘雷
王岩
秦书俭
《解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期145-148,F0002,共5页
目的：探讨应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）对人异体T淋巴细胞分泌功能的调节作用及诱导成骨能力的影响。方法：用siRNA转染至第3代hBMSCs将转染前、后各组的hBMSCs与PHA刺激的人异体T淋巴细胞共同培养，用EL...
目的：探讨应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）对人异体T淋巴细胞分泌功能的调节作用及诱导成骨能力的影响。方法：用siRNA转染至第3代hBMSCs将转染前、后各组的hBMSCs与PHA刺激的人异体T淋巴细胞共同培养，用ELISA检测各培养组上清液γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素2（IL-2）的水平；对2组细胞进行成骨诱导分化培养，观察细胞形态变化；碱性磷酸酶染色、计数和Von-Kossa染色、计数检测成骨能力。结果：hBMSCs表面抗原CD44、CDl66阳性。转染前hBMSCs的HLA-A2表达为阳性，转染后hBMSCs的HLA-A2表达为弱阳性；转染前hBMSCs的HLA-A2蛋白表达量高于转染后的HLA-A2蛋白表达量。转染前、后的hBMSCs均能抑制人T淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-2，转染前、后比较有差异。ALP染色显示转染前、后的hBMSCs均出现胞质呈棕黑色的阳性反应，ALP活性检测结果显示2组之间无差异。Von-Kossa染色显示转染前、后的hBMSCs均有钙结节形成，统计2组之间无差异。结论：应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的hBMSCs可以抑制PHA刺激人T淋巴细胞分泌因子IFN-γ、IL-2的水平，转染后的hBMSCs比未转染的hBMSCs抑制作用更强。应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的hBMSCs，不影响其成骨能力。
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关键词
骨髓间充质干细胞
RNAI技术
T淋巴细胞
分泌功能
成骨能力
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职称材料
题名
大鼠脂肪干细胞体外诱导分化为胰岛样细胞
被引量：
1
1
作者
房艳
刘雷
宋慧娟
单伟
曾瑞霞
李德华
机构
辽宁医学院解剖教研室
辽宁
锦州市妇婴医院不孕不育科
辽宁医学院
科
学实验中心
出处
《解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期588-592,共5页
基金
辽宁医学院青年科技启动基金
文摘
目的：探索大鼠脂肪干细胞（ADSCs）向胰岛样细胞诱导分化的诱导方案。方法：取SD大鼠腹股沟区脂肪组织，酶消化法分离培养ADSCs，观察细胞形态，流式细胞仪检测表面抗原；应用4种方案［NA、 NG、 AG、 NAG， N：尼克酰胺；A：活化素A； G：胰高血糖素样肽-1 （GLP-1）］进行诱导，观察形态变化，ELISA法检测胰岛素及C肽分泌量，行双硫腙染色，RT-PCR检测胰岛β细胞相关基因。结果：ADSCs长梭形，CD44高表达，CD49d低表达，CD31、 CD106阴性；诱导7d细胞突起变短呈鹅卵石样，14d AG、 NAG组细胞近圆形，折光性增强，21d NAG组出现明显的胰岛样细胞团。ELISA显示21d NAG组胰岛素及C肽释放量明显高于其他组。双硫腙染色21d NAG组细胞团呈砖红色阳性表达。RT-PCR 14d仅AG和NAG组检测到胰十二指肠同源盒-1基因（PDX1）， 21d AG和NAG组均可检测到葡萄糖转运蛋白2（GLUT2）、 insulin 2、 insulin 1、 PDX1，但表达水平有差异，NAG组接近正常鼠胰岛β细胞，明显高于AG组。结论：ADSCs具有干细胞特性，在NAG诱导条件下可分化为有功能的胰岛样细胞。
关键词
脂肪干细胞
诱导
分化
胰岛样细胞
Keywords
adipose derived stem cells
induction
differentiation
islet-ike cells
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
SiRNA沉默HLA-A2表达的人骨髓间充质干细胞对人异体T淋巴细胞分泌功能及其诱导成骨能力的影响
2
作者
单伟
包翠芬
郑仕杰
刘雷
王岩
秦书俭
机构
辽宁医学院解剖学教研室
辽宁医学院
科
学实验中心
锦州市妇婴医院不孕不育科
辽宁辽河油田中心
医院
放射
科
出处
《解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期145-148,F0002,共5页
基金
辽宁省教育厅基金（LT2010061）
辽宁省自然科学基金（20102138）
辽宁医学院青年科技启动基金（Y2010z.04）
文摘
目的：探讨应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）对人异体T淋巴细胞分泌功能的调节作用及诱导成骨能力的影响。方法：用siRNA转染至第3代hBMSCs将转染前、后各组的hBMSCs与PHA刺激的人异体T淋巴细胞共同培养，用ELISA检测各培养组上清液γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素2（IL-2）的水平；对2组细胞进行成骨诱导分化培养，观察细胞形态变化；碱性磷酸酶染色、计数和Von-Kossa染色、计数检测成骨能力。结果：hBMSCs表面抗原CD44、CDl66阳性。转染前hBMSCs的HLA-A2表达为阳性，转染后hBMSCs的HLA-A2表达为弱阳性；转染前hBMSCs的HLA-A2蛋白表达量高于转染后的HLA-A2蛋白表达量。转染前、后的hBMSCs均能抑制人T淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-2，转染前、后比较有差异。ALP染色显示转染前、后的hBMSCs均出现胞质呈棕黑色的阳性反应，ALP活性检测结果显示2组之间无差异。Von-Kossa染色显示转染前、后的hBMSCs均有钙结节形成，统计2组之间无差异。结论：应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的hBMSCs可以抑制PHA刺激人T淋巴细胞分泌因子IFN-γ、IL-2的水平，转染后的hBMSCs比未转染的hBMSCs抑制作用更强。应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的hBMSCs，不影响其成骨能力。
关键词
骨髓间充质干细胞
RNAI技术
T淋巴细胞
分泌功能
成骨能力
Keywords
mesenchymal stem cells
RNAi technology
T lymphocyte
secretory function
osteogenetic ability
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大鼠脂肪干细胞体外诱导分化为胰岛样细胞
房艳
刘雷
宋慧娟
单伟
曾瑞霞
李德华
《解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
SiRNA沉默HLA-A2表达的人骨髓间充质干细胞对人异体T淋巴细胞分泌功能及其诱导成骨能力的影响
单伟
包翠芬
郑仕杰
刘雷
王岩
秦书俭
《解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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已选择
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