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Ⅱ型固有淋巴样细胞(ILC2)通过分泌IL-13减缓类风湿性关节炎患者的发病进程 被引量：2
1
作者 李鑫 吴刚 +5 位作者 金向楠 苗小青 王亚媛 刘畅 马思扬 沈晖 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期815-820,共6页
目的研究Ⅱ型固有淋巴样细胞(ILC2)在类风湿性关节炎(RA)中的变化及可能的机制。方法收集RA患者进行28个关节疾病活动度评分(DAS28),并收集外周血标本。全自动血沉器检测血沉(ESR)、免疫透射浊度法检测C反应蛋白(CRP)。免疫比浊法检测... 目的研究Ⅱ型固有淋巴样细胞(ILC2)在类风湿性关节炎(RA)中的变化及可能的机制。方法收集RA患者进行28个关节疾病活动度评分(DAS28),并收集外周血标本。全自动血沉器检测血沉(ESR)、免疫透射浊度法检测C反应蛋白(CRP)。免疫比浊法检测类风湿因子(RF)、化学发光法检测抗环瓜氨酸肽抗体(ACCP)。流式细胞术检测RA患者ILC2比例,Spearman相关分析方法分析ILC2与上述疾病相关指标的相关性。将RA患者分为低疾病活动度(DAS28<3.2)和高疾病活动度(DAS28≥3.2)两组,流式细胞术检测白细胞介素13(IL-13)在RA患者ILC2的表达,并比较IL-13不同疾病活动度RA患者表达的差异。结果与健康人相比,RA患者外周血ILC2比例显著升高,ILC2绝对数增加,且与ESR、CRP、DAS28呈负相关。高疾病活动度RA患者ILC2分泌的IL-13显著低于低疾病活动度患者。结论ILC2通过分泌IL-13抑制RA患者疾病活动。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎(RA) Ⅱ型固有淋巴样细胞(ILC2) 28个关节疾病活动度评分(DAS28) 白细胞介素13(IL-13)
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白花丹素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响 被引量：9
2
作者 刘玉 朱德强 高薇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1126-1133,共8页
目的探究白花丹素(plumbagin,PLB)对体外培养的人类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)增殖和凋亡的作用,并探讨其可能的作用机制。方法体外分离并传代培养RA FLSs,MTT与集落形成实验检测PLB对RA FLSs活力及增殖的影响;ELISA法检测F... 目的探究白花丹素(plumbagin,PLB)对体外培养的人类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)增殖和凋亡的作用,并探讨其可能的作用机制。方法体外分离并传代培养RA FLSs,MTT与集落形成实验检测PLB对RA FLSs活力及增殖的影响;ELISA法检测FLSs炎症介质TNF-α、IL-6的分泌水平;Hoechst 33342染色法、FCM实验检测RA FLSs的凋亡情况;Western blot检测PLB对RA FLSs中Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达的影响。结果 LPS诱导后,PLB对FLSs的增殖率呈现浓度依赖的抑制效应(P<0.05)。LPS+PLB组及LPS+MTX组与模型组相比,炎症因子分泌量下降(P<0.05),细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。Western blot结果显示,与模型组比较,LPS+PLB组及LPS+MTX组促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-3表达升高(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2及通路蛋白p-JAK2、p-STAT3表达降低(P<0.05)。结论 PLB能降低RA FLSs增殖活力并诱导其凋亡,可能与其降低JAK2及STAT3的磷酸化程度,进而影响FLSs的凋亡途径有关。 展开更多
关键词 白花丹素 成纤维样滑膜细胞 类风湿关节炎 凋亡 JAK2/STAT3信号通路 增殖
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IL-37抑制类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖及迁移并通过抑制STAT3诱导其凋亡 被引量：5
3
作者 刘煜楠 高薇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期236-241,共6页
目的探讨白细胞介素37(IL-37)对脂多糖(LPS)诱导的类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RAFLS)增殖、凋亡及迁移的影响及机制。方法体外培养RAFLS,分为空白对照组、LPS组和LPS联合(50、100、200)ng/mL IL-37组,用CCK-8法检测RAFLS的增殖... 目的探讨白细胞介素37(IL-37)对脂多糖(LPS)诱导的类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RAFLS)增殖、凋亡及迁移的影响及机制。方法体外培养RAFLS,分为空白对照组、LPS组和LPS联合(50、100、200)ng/mL IL-37组,用CCK-8法检测RAFLS的增殖、流式细胞术检测RAFLS的凋亡、细胞划痕实验检测RAFLS的迁移能力。在筛选出100 ng/mL IL-37处理剂量后,将RAFLS分为空白对照组、LPS组、LPS联合100 ng/mL IL-37处理组以及LPS联合IL-37和STA-21组,用Western blot法检测RAFLS凋亡相关蛋白BAX、Bcl2、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)以及信号转导子与转录激活子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)蛋白水平。结果与模型组相比,加入IL-37后可以抑制RAFLS的增殖及迁移,促进RAFLS凋亡。BAX及c-caspase-3蛋白水平增加,Bcl2及p-STAT3蛋白水平降低。与LPS联合IL-37组相比,加入STAT3特异性抑制剂STA-21后,BAX及c-caspase-3的表达明显增加,Bcl2及p-STAT3的表达明显减少。结论IL-37抑制RAFLS的增殖及迁移并可通过抑制STAT3通路诱导其凋亡。 展开更多
关键词 类风湿关节炎(RA) 白细胞介素37(IL-37) 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移 信号转导子与转录激活子3(STAT3)
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TIGIT在类风湿性关节炎患者外周血CD56^(+)T细胞的表达及作用
4
作者 朱晓旭 李鑫 +3 位作者 刘鑫莹 单颖 李诗楠 沈晓锟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1010-1018,共9页
目的检测类风湿性关节炎(RA)患者外周血CD56^(+)T细胞的比例变化以及含免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制基序结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)在CD56^(+)T细胞表面的表达,探讨TIGIT在RA中对CD56^(+)T细胞功能的影响。方法选取50例RA患者及2... 目的检测类风湿性关节炎(RA)患者外周血CD56^(+)T细胞的比例变化以及含免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制基序结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)在CD56^(+)T细胞表面的表达,探讨TIGIT在RA中对CD56^(+)T细胞功能的影响。方法选取50例RA患者及20例健康人,采用流式细胞术检测外周血CD56^(+)T细胞的比例,并且分析CD56^(+)T细胞比例与疾病临床指标的相关性;流式细胞术检测RA患者外周血CD56^(+)T细胞表达TIGIT的水平;密度梯度离心法分离外周血单个核细胞并进行培养;流式细胞术检测RA患者外周血表达γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素17A(IL-17A)的CD56^(+)T细胞的比例;探究IFN-γ和IL-17A在TIGIT-CD56^(+)T细胞与TIGIT+CD56^(+)T细胞之间的表达差异;ELISA检测RA患者血清IL-17A的水平。结果与健康对照组相比,RA患者外周血CD56^(+)T细胞的比例降低,表达IL-17A的CD56^(+)T细胞的比例显著降低;RA患者血清中IL-17A的水平升高。RA患者的CD56^(+)T细胞高表达TIGIT分子,IFN-γ主要来源于TIGIT-CD56^(+)T细胞;表达IL-17A的TIGIT-CD56^(+)T细胞与TIGIT+CD56^(+)T细胞的比例无明显差异。结论TIGIT的异常表达影响CD56^(+)T细胞分泌因子的功能,进而参与RA疾病进程。并且IFN-γ主要来源于TIGIT-CD56^(+)T细胞,TIGIT可能不影响CD56^(+)T细胞的IL-17A分泌水平。 展开更多
关键词 含免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制基序结构域的T细胞免疫受体(TIGIT) 类风湿性关节炎(RA) CD56+T细胞 γ干扰素(IFN-γ) 白细胞介素17A(IL-17A)
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干酪乳杆菌ATCC334抑制胶原蛋白诱导关节炎(CIA)大鼠炎性因子的分泌及关节病变 被引量：1
5
作者 李鑫 吴刚 +2 位作者 金向楠 任立冰 沈晖 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期487-491,共5页
目的研究干酪乳杆菌ATCC334对胶原蛋白诱导关节炎(CIA)大鼠炎性因子分泌及关节破坏的影响并探讨其可能机制。方法雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、CIA组、ATCC334组,每组7只。CIA组和ATCC334组大鼠尾根部皮内注射牛2型胶原蛋白建立CI... 目的研究干酪乳杆菌ATCC334对胶原蛋白诱导关节炎(CIA)大鼠炎性因子分泌及关节破坏的影响并探讨其可能机制。方法雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、CIA组、ATCC334组,每组7只。CIA组和ATCC334组大鼠尾根部皮内注射牛2型胶原蛋白建立CIA模型,对照组和CIA组大鼠每日500μL生理盐水灌胃,ATCC334组大鼠造模同时每日500μL干酪乳杆菌ATCC334溶液[2×10^8集落形成单位(CFU)/mL]灌胃,连续28 d。采用关节炎指数及后足爪增长容积评价关节炎严重程度、HE染色观察关节病变情况,ELISA检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-17水平。结果与CIA组相比,ATCC334组关节炎指数、后足爪增长容积显著降低,关节病变明显减轻,血清TNF-α、IL-6、IL-17水平明显降低。结论干酪乳杆菌ATCC334能够显著降低CIA大鼠炎性因子的分泌,减轻关节骨质破坏。 展开更多
关键词 胶原蛋白诱导关节炎(CIA) 干酪乳杆菌 ATCC334 肿瘤坏死因子α(TNF-α) 白细胞介素6(IL-6) 白细胞介素17(IL-17)
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金丝桃苷对胶原诱导性关节炎小鼠的治疗作用 被引量：4
6
作者 金向楠 高薇 +2 位作者 冯欣 隋海娟 付强 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第17期2199-2203,共5页
目的观察金丝桃苷(hyperoside,Hyp)对胶原诱导性关节炎小鼠(CIA)的治疗作用。方法将DBA/1小鼠随机分为正常对照组10只,模型组35只,模型组在第0天及第21天分别给予牛Ⅱ型胶原与弗氏完全佐剂的乳化剂,制备CIA模型。第31天正常对照组随机选... 目的观察金丝桃苷(hyperoside,Hyp)对胶原诱导性关节炎小鼠(CIA)的治疗作用。方法将DBA/1小鼠随机分为正常对照组10只,模型组35只,模型组在第0天及第21天分别给予牛Ⅱ型胶原与弗氏完全佐剂的乳化剂,制备CIA模型。第31天正常对照组随机选取8只,模型组进一步随机分组为模型对照组,金丝桃苷25 mg/kg和50 mg/kg治疗组分别8只,并开始给药物处理。动态观察小鼠的足掌厚度测量及临床关节炎指数变化。第52天处死小鼠,HE染色观察踝关节组织病理变化,ELISA测定小鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的含量。结果成功建立CIA模型,在第28天开始测量足掌厚度并进行临床关节炎指数评分,金丝桃苷治疗组足掌厚度及临床关节炎指数评分均降低。ELISA测细胞因子,治疗组测得血清中TNF-α及IL-6的含量较模型组明显降低,差异有统计学意义。组织病理观察结果显示,与模型组相比,治疗组小鼠踝关节滑膜增生、炎症细胞浸润情况均明显减轻。结论金丝桃苷对类风湿关节炎具有治疗作用。 展开更多
关键词 金丝桃苷 胶原诱导性关节炎 类风湿关节炎 抗炎 促炎细胞因子
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莫特塞尼与EZH2抑制剂GSK126联合应用对肝癌Huh7细胞增殖和凋亡的影响及其机制 被引量：2
7
作者 梁媛媛 赵颂 +3 位作者 胡静 安妮 魏验芦 苏荣健 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期896-904,共9页
目的:探讨多激酶抑制剂莫特塞尼联合果蝇zeste基因增强子的人类同源物2 (EZH2)抑制剂GSK126对肝癌Huh7细胞体外增殖和凋亡的影响,初步阐明其相关机制。方法:不同浓度(0、1、5、10、20、40和60μmol·L^(-1))莫特塞尼处理Huh7细胞,采... 目的:探讨多激酶抑制剂莫特塞尼联合果蝇zeste基因增强子的人类同源物2 (EZH2)抑制剂GSK126对肝癌Huh7细胞体外增殖和凋亡的影响,初步阐明其相关机制。方法:不同浓度(0、1、5、10、20、40和60μmol·L^(-1))莫特塞尼处理Huh7细胞,采用CCK-8法检测各组Huh7细胞增殖率,采用Western blotting法检测不同浓度(0、2.5、5.0、10.0和20.0μmol·L^(-1))莫特塞尼组Huh7细胞中EZH2和磷酸化EZH2 (p-EZH2)蛋白表达水平。莫特塞尼和GSK126联合作用于Huh7细胞,采用CCK-8法和克隆形成实验确定后续实验合适的药物浓度。Huh7细胞分为对照组、莫特塞尼(10μmol·L^(-1))组、GSK126 (5μmol·L^(-1))组和联合组(莫特塞尼+GSK126),采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)荧光染色法检测各组Huh7细胞增殖率,流式细胞术检测各组Huh7细胞凋亡率,Western blotting法检测各组Huh7细胞中细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK (p-ERK)、蛋白激酶B (AKT)和磷酸化AKT (p-AKT)蛋白表达水平。结果:CCK-8法检测,不同浓度莫特塞尼组Huh7细胞存活率随着药物浓度升高逐渐降低,与0μmol·L^(-1)莫特塞尼组比较,20、 40和60μmol·L^(-1)莫特塞尼组Huh7细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01);Western blotting法检测,与0μmol·L^(-1)莫特塞尼组比较,5.0、10.0和20.0μmol·L^(-1)莫特塞尼组Huh7细胞中EZH2和p-EZH2蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。通过CCK-8法和克隆形成实验确定10μmol·L^(-1)莫特塞尼和5μmol·L^(-1) GSK126用于后续实验。与对照组比较,莫特塞尼组、GSK126组和联合组Huh7细胞增殖率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.05或P<0.01);与莫特塞尼组和GSK126组比较,联合组Huh7细胞增殖率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。与对照组、莫特塞尼组和GSK126组比较,联合组Huh7细胞中p-AKT和p-ERK蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:单独应用莫特塞尼抑制肝癌Huh7细胞增殖和促进凋亡效果不明显,可能与EZH2升高导致细胞耐药有关。莫特塞尼与GSK126联合应用可通过抑制AKT和ERK信号通路,增强莫特塞尼对肝癌Huh7细胞的增殖抑制和促凋亡作用。 展开更多
关键词 莫特塞尼 肝肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 果蝇zeste基因增强子的人类同源物2 GSK126
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沉默WNT4基因对稳定转染PAX2基因大鼠肾小管上皮细胞迁移和侵袭能力的影响
8
作者 李里 宫亮 吴玉斌 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1212-1217,共6页
目的:探讨沉默WNT4基因对稳定转染配对盒基因2 (PAX2)大鼠肾小管上皮细胞迁移和侵袭能力的影响,阐明PAX2基因是否通过WNT4基因调控细胞生物学活性。方法:选取对数生长期的PAX2基因稳转细胞系,分为稳转组和对照组。稳转组细胞分为稳转对... 目的:探讨沉默WNT4基因对稳定转染配对盒基因2 (PAX2)大鼠肾小管上皮细胞迁移和侵袭能力的影响,阐明PAX2基因是否通过WNT4基因调控细胞生物学活性。方法:选取对数生长期的PAX2基因稳转细胞系,分为稳转组和对照组。稳转组细胞分为稳转对照组(不应用WNT siRNA沉默)和沉默72h组(应用WNT siRNA沉默72h)。Western blotting法检测稳转组和对照组大鼠肾小管上皮细胞中PAX2和WNT4蛋白的相对表达量,Real time PCR法检测稳转对照组和沉默72h组大鼠肾小管上皮细胞中WNT4mRNA相对表达量,细胞划痕实验检测稳转对照组和沉默72h组大鼠肾小管上皮细胞的细胞迁移率,Transwell实验检测稳转对照组和沉默72h组大鼠肾小管上皮细胞的穿膜细胞数。结果:Western blotting法检测,稳转组大鼠肾小管上皮细胞中PAX2和WNT4蛋白相对表达量高于对照组(P<0.05)。Real-time PCR法检测,沉默72h组大鼠肾小管上皮细胞中WNT4mRNA相对表达量低于稳转对照组(P<0.05)。细胞划痕实验10h后,沉默72h组大鼠肾小管上皮细胞的细胞迁移率低于稳转对照组,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);细胞划痕实验18h后,沉默72h组大鼠肾小管上皮细胞的细胞迁移率低于稳转对照组(P>0.05)。Transwwell实验,沉默72h组大鼠肾小管上皮细胞的穿膜细胞数低于稳转对照组(P<0.05)。结论:PAX2基因可能通过WNT4基因调控细胞的生物学活性。 展开更多
关键词 配对盒基因2 WNT4基因 肾小管上皮细胞 细胞迁移 细胞侵袭 转染
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