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组织芯片技术检测SIRT6蛋白在结肠癌组织中的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 李婳 曹艳莎 +2 位作者 赵津平 任甫 李宁 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期893-898,I0007,共7页
目的:探讨NAD依赖性蛋白脱乙酰基酶sirtuin-6(SIRT6)蛋白在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌患者临床病理参数之间的关系,阐明SIRT6蛋白在结肠癌发生发展中的作用。方法:选取术前均未行放化疗的100例结肠癌患者的结肠癌组织和癌旁组织,... 目的:探讨NAD依赖性蛋白脱乙酰基酶sirtuin-6(SIRT6)蛋白在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌患者临床病理参数之间的关系,阐明SIRT6蛋白在结肠癌发生发展中的作用。方法:选取术前均未行放化疗的100例结肠癌患者的结肠癌组织和癌旁组织,采用组织芯片技术和免疫组织化学SP法检测结肠癌组织和癌旁组织中SIRT6蛋白表达水平,采用秩和检验分析SIRT6蛋白表达水平与结肠癌患者临床病理参数的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线、单因素和多因素生存分析法分析结肠癌患者临床病理参数与预后的关系。结果: SIRT6蛋白在结肠癌组织细胞核和胞浆中的表达水平均明显高于癌旁组织(Z=-4.603,P=0.000;Z=-7.610,P=0.000)。Kaplan-Meier单因素和多因素分析,细胞核中SIRT6蛋白高表达的结肠癌患者预后更好且是其独立预后影响因子(HR=2.345,P=0.003),年龄较小及T、N分期较低的患者生存率更高(HR=0.394,P=0.004;HR=2.301,P=0.012;HR=2.423,P=0.048),细胞浆中SIRT6蛋白高表达与结肠癌患者预后无关联性(HR=1.309,P=0.333)。结论: SIRT6蛋白在结肠癌细胞核中高表达可作为结肠癌预后良好的评价指标。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 NAD依赖性蛋白脱乙酰基酶sirtuin-6 组织芯片 免疫组织化学
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BAG3蛋白Ser187磷酸化位点定点突变促进FRO细胞迁移和侵袭 被引量:2
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作者 李宁 曹艳莎 +3 位作者 李婳 赵津平 任甫 李克研 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期868-875,共8页
Bcl-2相关抗凋亡蛋白3(Bcl-2 associated athanogene 3,BAG3)是BAG家族的重要成员,调节肿瘤细胞的黏附、迁移和侵袭,促进恶性肿瘤的复发和转移。我们的前期工作证明,PKCδ可催化BAG3的Ser187位点磷酸化。本文研究BAG3蛋白磷酸化修饰对... Bcl-2相关抗凋亡蛋白3(Bcl-2 associated athanogene 3,BAG3)是BAG家族的重要成员,调节肿瘤细胞的黏附、迁移和侵袭,促进恶性肿瘤的复发和转移。我们的前期工作证明,PKCδ可催化BAG3的Ser187位点磷酸化。本文研究BAG3蛋白磷酸化修饰对甲状腺癌FRO细胞迁移、侵袭的影响及其可能机制。通过定点突变的方法,将BAG3蛋白的187位丝氨酸突变为天冬氨酸(S187D)模拟磷酸化,或者将丝氨酸突变为丙氨酸(S187A)抵抗磷酸化,从而间接推测BAG3蛋白Ser187位点磷酸化对FRO细胞迁移、侵袭的影响。FRO细胞转染野生型BAG3、模拟磷酸化型BAG3、阻碍磷酸化型BAG3,通过划痕愈合实验和Transwell转移小室实验,观察BAG3蛋白磷酸化对FRO细胞迁移、侵袭的影响。进一步通过PKC激活剂和抑制剂,研究BAG3蛋白磷酸化对FRO细胞迁移、侵袭影响的机制。结果显示,FRO BAG3-S187D模拟磷酸化组细胞在培养24 h、48 h时,划痕愈合率分别达到35%和80%。Transwell及三维Matrigel转移小室实验显示,平均每个视野穿膜细胞数分别达到180和350个,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。PKC激活剂TPA及抑制剂Rottelerin处理FRO WT-BAG3细胞,24 h愈合率分别为40%和15%,48 h划痕愈合率分别为55%和18%,Transwell穿膜细胞数分别为240和70个,与对照组细胞相比,差异显著(P<0.05)。本研究提示,BAG3蛋白Ser187磷酸化修饰,可促进甲状腺癌FRO细胞迁移、侵袭,其机制可能与PKC信号通路有关。 展开更多
关键词 Bcl-2相关抗凋亡蛋白3 磷酸化 迁移 侵袭
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