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槲皮素对5-氟尿嘧啶诱导的人永生化角质形成细胞损伤的保护作用及其机制
1
作者
李佳欣
王一
+2 位作者
吴婷婷
郝诗睿
付晓
《吉林大学学报(医学版)》
北大核心
2025年第2期428-436,共9页
目的:探讨槲皮素对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的人永生化角质形成细胞(HACAT)损伤的保护作用,并阐明其作用机制。方法:将HACAT细胞分为对照组(正常培养细胞)、5-FU组(7.5 mg·L^(-1) 5-FU作用于HACAT细胞24 h)和低、中及高剂量槲皮素组(2...
目的:探讨槲皮素对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的人永生化角质形成细胞(HACAT)损伤的保护作用,并阐明其作用机制。方法:将HACAT细胞分为对照组(正常培养细胞)、5-FU组(7.5 mg·L^(-1) 5-FU作用于HACAT细胞24 h)和低、中及高剂量槲皮素组(25,50和75μmol·L^(-1)的槲皮素与7.5 mg·L^(-1) 5-FU共同作用于HACAT细胞24 h)。采用细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测不同剂量(0、10、25、50、75和100μmol·L^(-1))槲皮素处理后各组HACAT细胞存活率,活性氧(ROS)荧光探针法检测各组HACAT细胞中ROS水平,荧光素标记的AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测HACAT细胞凋亡情况,Western blotting法检测各组HACAT细胞中B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解型天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶3 (Cleaved Caspase-3)、环氧合酶2(COX-2)、白细胞介素1β (IL-1β)和白细胞介素6 (IL-6)蛋白表达水平。结果:CCK-8法检测,与0μmol·L^(-1)槲皮素组比较,10、25、50和75μmol·L^(-1)槲皮素组HACAT细胞存活率无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05),而100μmol·L^(-1)槲皮素组HACAT细胞存活率明显降低(P<0.05);与5-FU组比较,低、中和高剂量槲皮素组细胞存活率明显升高(P<0.05)。ROS荧光探针法检测,与5-FU组比较,低、中和高剂量槲皮素组HACAT细胞中ROS水平明显降低(P<0.05)。Annexin V-FITC/PI双染法检测,与5-FU组比较,低、中和高剂量槲皮素组HACAT细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与5-FU组比较,中和高剂量槲皮素组HACAT细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05);低、中和高剂量槲皮素组HACAT细胞中Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.05);中和高剂量槲皮素组HACAT细胞中COX-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);中剂量槲皮素组HACAT细胞中IL-1β和IL-6蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:槲皮素对5-FU诱导的HACAT细胞损伤具有保护作用,其机制可能与减少ROS和COX-2等炎症因子表达从而抑制细胞凋亡有关。
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关键词
槲皮素
手足综合征
人永生化角质形成细胞
细胞凋亡
环氧合酶2
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职称材料
p62/SQSTM1在非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭转移中的作用
被引量：
2
2
作者
马雪
周世辉
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2024年第1期13-18,共6页
目的探讨自噬调控多功能蛋白p62/SQSTM1对非小细胞肺癌生物学行为的影响和调控机制。方法RT-qPCR检测p62在正常人支气管上皮细胞和非小细胞肺癌细胞中的表达情况;CCK-8、划痕和Transwell实验分别检测抑制和促进p62表达后对非小细胞肺癌...
目的探讨自噬调控多功能蛋白p62/SQSTM1对非小细胞肺癌生物学行为的影响和调控机制。方法RT-qPCR检测p62在正常人支气管上皮细胞和非小细胞肺癌细胞中的表达情况;CCK-8、划痕和Transwell实验分别检测抑制和促进p62表达后对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;Western blot实验检测抑制和促进p62表达后对非小细胞肺癌细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)和自噬相关蛋白(ATG5和Becline1)表达水平的影响;裸鼠皮下成瘤实验检测抑制p62表达后对非小细胞肺癌细胞体内肿瘤质量的影响。结果癌旁组织p62表达(1.01±0.08)低于肺癌组织(2.81±0.17)(P<0.05);p62在si-NC、si-p62、pcDNA-NC、pcDNA-p62组的表达水平分别为1.02±0.03、0.62±0.07、1.03±0.01、2.69±0.12。与si-NC组细胞比较,si-p62组细胞中的p62表达显著降低(P<0.05);与pcDNA-NC组细胞比较,pcDNA-p62组细胞中的p62表达显著升高(P<0.05);转染si-p62后细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05),而转染pcDNA-p62后细胞增殖、迁移和侵袭能力显著升高(P<0.05);转染si-p62后,抗凋亡蛋白Bcl-2(0.31±0.04)、自噬相关蛋白ATG5(0.48±0.02)和Becline1表达水平(0.37±0.03)明显降低,而促凋亡蛋白Bax表达水平(0.59±0.07)明显升高(P<0.05);而转染pcDNA-p62后,Bax蛋白水平(0.12±0.02)降低,而Bcl-2(0.79±0.07)、ATG5(0.93±0.07)和Becline1表达水平(0.96±0.04)明显升高(P<0.05);与sh-NC组(2.50±0.12)比较,sh-p62组(1.12±0.08)小鼠的移植瘤质量明显减小(P<0.05)。结论p62可以通过调控自噬促进非小细胞肺癌细胞A549的体内外生长。
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关键词
非小细胞肺癌
P62
自噬
增殖
迁移
侵袭
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职称材料
题名
槲皮素对5-氟尿嘧啶诱导的人永生化角质形成细胞损伤的保护作用及其机制
1
作者
李佳欣
王一
吴婷婷
郝诗睿
付晓
机构
锦州
医科
大学
附属
第一
医院
中
医科
二门诊
锦州
医科
大学
附属
第一
医院
辽宁省外科学重点实验室
锦州医科大学附属第一医院急诊科
锦州
医科
大学
附属
第一
医院
麻醉科
出处
《吉林大学学报(医学版)》
北大核心
2025年第2期428-436,共9页
基金
国家中医药管理局第五批全国中医临床优秀人才研修项目(国中医药人教函[2022] 1号)
辽宁省卫健委第一批优秀中医临床人才培养项目(辽中医药函[2021] 1号)
辽宁省科技厅自然科学基金项目(2019-ZD-0809)。
文摘
目的:探讨槲皮素对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的人永生化角质形成细胞(HACAT)损伤的保护作用,并阐明其作用机制。方法:将HACAT细胞分为对照组(正常培养细胞)、5-FU组(7.5 mg·L^(-1) 5-FU作用于HACAT细胞24 h)和低、中及高剂量槲皮素组(25,50和75μmol·L^(-1)的槲皮素与7.5 mg·L^(-1) 5-FU共同作用于HACAT细胞24 h)。采用细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测不同剂量(0、10、25、50、75和100μmol·L^(-1))槲皮素处理后各组HACAT细胞存活率,活性氧(ROS)荧光探针法检测各组HACAT细胞中ROS水平,荧光素标记的AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测HACAT细胞凋亡情况,Western blotting法检测各组HACAT细胞中B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解型天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶3 (Cleaved Caspase-3)、环氧合酶2(COX-2)、白细胞介素1β (IL-1β)和白细胞介素6 (IL-6)蛋白表达水平。结果:CCK-8法检测,与0μmol·L^(-1)槲皮素组比较,10、25、50和75μmol·L^(-1)槲皮素组HACAT细胞存活率无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05),而100μmol·L^(-1)槲皮素组HACAT细胞存活率明显降低(P<0.05);与5-FU组比较,低、中和高剂量槲皮素组细胞存活率明显升高(P<0.05)。ROS荧光探针法检测,与5-FU组比较,低、中和高剂量槲皮素组HACAT细胞中ROS水平明显降低(P<0.05)。Annexin V-FITC/PI双染法检测,与5-FU组比较,低、中和高剂量槲皮素组HACAT细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与5-FU组比较,中和高剂量槲皮素组HACAT细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05);低、中和高剂量槲皮素组HACAT细胞中Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.05);中和高剂量槲皮素组HACAT细胞中COX-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);中剂量槲皮素组HACAT细胞中IL-1β和IL-6蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:槲皮素对5-FU诱导的HACAT细胞损伤具有保护作用,其机制可能与减少ROS和COX-2等炎症因子表达从而抑制细胞凋亡有关。
关键词
槲皮素
手足综合征
人永生化角质形成细胞
细胞凋亡
环氧合酶2
Keywords
Quercetin
Hand-foot syndrome
Human immortalized keratinocytes
Apoptosis
Cyclooxygenase-2
分类号
R275.9 [医药卫生—中西医结合]
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职称材料
题名
p62/SQSTM1在非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭转移中的作用
被引量：
2
2
作者
马雪
周世辉
机构
锦州医科大学附属第一医院急诊科
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2024年第1期13-18,共6页
基金
辽宁省科技计划项目(编号:2022-MS-21)。
文摘
目的探讨自噬调控多功能蛋白p62/SQSTM1对非小细胞肺癌生物学行为的影响和调控机制。方法RT-qPCR检测p62在正常人支气管上皮细胞和非小细胞肺癌细胞中的表达情况;CCK-8、划痕和Transwell实验分别检测抑制和促进p62表达后对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;Western blot实验检测抑制和促进p62表达后对非小细胞肺癌细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)和自噬相关蛋白(ATG5和Becline1)表达水平的影响;裸鼠皮下成瘤实验检测抑制p62表达后对非小细胞肺癌细胞体内肿瘤质量的影响。结果癌旁组织p62表达(1.01±0.08)低于肺癌组织(2.81±0.17)(P<0.05);p62在si-NC、si-p62、pcDNA-NC、pcDNA-p62组的表达水平分别为1.02±0.03、0.62±0.07、1.03±0.01、2.69±0.12。与si-NC组细胞比较,si-p62组细胞中的p62表达显著降低(P<0.05);与pcDNA-NC组细胞比较,pcDNA-p62组细胞中的p62表达显著升高(P<0.05);转染si-p62后细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05),而转染pcDNA-p62后细胞增殖、迁移和侵袭能力显著升高(P<0.05);转染si-p62后,抗凋亡蛋白Bcl-2(0.31±0.04)、自噬相关蛋白ATG5(0.48±0.02)和Becline1表达水平(0.37±0.03)明显降低,而促凋亡蛋白Bax表达水平(0.59±0.07)明显升高(P<0.05);而转染pcDNA-p62后,Bax蛋白水平(0.12±0.02)降低,而Bcl-2(0.79±0.07)、ATG5(0.93±0.07)和Becline1表达水平(0.96±0.04)明显升高(P<0.05);与sh-NC组(2.50±0.12)比较,sh-p62组(1.12±0.08)小鼠的移植瘤质量明显减小(P<0.05)。结论p62可以通过调控自噬促进非小细胞肺癌细胞A549的体内外生长。
关键词
非小细胞肺癌
P62
自噬
增殖
迁移
侵袭
Keywords
non⁃small cell lung cancer
autophagy
proliferation
migration
invasion
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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1
槲皮素对5-氟尿嘧啶诱导的人永生化角质形成细胞损伤的保护作用及其机制
李佳欣
王一
吴婷婷
郝诗睿
付晓
《吉林大学学报(医学版)》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
p62/SQSTM1在非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭转移中的作用
马雪
周世辉
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2024
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