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NUAK2对卵巢浆液性癌细胞增殖和凋亡的调控作用
1
作者 张文娟 孟海 +2 位作者 高丹丹 周静祎 张静 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第5期419-424,共6页
目的探讨NUAK家族SNF1样激酶2(NUAK2)在卵巢浆液性癌中的表达特征及其对细胞增殖和凋亡的调控作用。方法选取2019年6月至2022年12月于我院确诊的57例卵巢浆液性癌患者作为观察组,同时选取57例卵巢浆液性囊腺瘤患者作为对照组。应用GEPI... 目的探讨NUAK家族SNF1样激酶2(NUAK2)在卵巢浆液性癌中的表达特征及其对细胞增殖和凋亡的调控作用。方法选取2019年6月至2022年12月于我院确诊的57例卵巢浆液性癌患者作为观察组,同时选取57例卵巢浆液性囊腺瘤患者作为对照组。应用GEPIA数据库观察NUAK2在卵巢浆液性癌中的表达趋势。采用免疫组织化学法检测NUAK2、增殖细胞核抗原(PCNA)和B细胞淋巴瘤相关X抗原(BAX)的表达。选择人卵巢浆液性癌细胞系(SKOV3)和人卵巢表面上皮细胞系(HOSEpiC),采用Western blotting检测NUAK2的表达,将SKOV3细胞转染siRNA-NUAK2质粒建立si-NUAK2组,并设立空载体转染(EV)组和空白对照(NC)组,采用Western blotting检测NUAK2、PCNA和BAX的表达,CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测凋亡情况。结果GEPIA数据库显示NUAK2在卵巢癌中的表达有增高趋势(P<0.05)。组织学实验显示观察组NUAK2的阳性率明显高于对照组,NUAK2在不同病变分级和不同肿瘤最大径的比较中差异有统计学意义(P<0.05),卵巢浆液性癌中NUAK2和PCNA呈正相关(P<0.05),和BAX呈负相关(P<0.05)。体外细胞培养实验显示SKOV3细胞中NUAK2的表达量明显高于HOSEpiC细胞(P<0.05)。si-NUAK2组细胞增殖活性和PCNA表达明显低于EV组和NC组(P<0.05),si-NUAK2组凋亡率和BAX明显高于EV组和NC组(P<0.05)。结论NUAK2在卵巢浆液性癌中高表达,通过促进细胞增殖、抑制凋亡发挥生物学作用。 展开更多
关键词 卵巢浆液性癌 NUAK家族SNF1样激酶2 增殖 凋亡 临床特征
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SMAD4对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的调控作用
2
作者 董安琪 郑金丹 +1 位作者 于晓萌 刘丽丽 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第3期223-227,共5页
目的探讨SMAD4对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响。方法脱氢表雄酮(DHEA)法构建PCOS大鼠模型,体外提取并培养颗粒细胞。实时定量PCR、Western blotting检测大鼠卵巢颗粒细胞中SMAD4表达水平。SMAD4-siRNA转染PCO... 目的探讨SMAD4对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响。方法脱氢表雄酮(DHEA)法构建PCOS大鼠模型,体外提取并培养颗粒细胞。实时定量PCR、Western blotting检测大鼠卵巢颗粒细胞中SMAD4表达水平。SMAD4-siRNA转染PCOS大鼠卵巢颗粒细胞,实时定量PCR检测转染后细胞中SMAD4 mRNA水平,Western blotting检测转染后细胞中SMAD4、PCNA、BAX、BCL-2蛋白表达水平。CCK-8法检测siRNA干扰PCOS大鼠卵巢颗粒细胞后细胞生长情况。结果HE染色显示,PCOS组大鼠卵巢卵泡空泡增多,颗粒细胞层数和黄体数明显减少,造模成功。FSHR阳性率大于95%。与对照组相比,PCOS大鼠卵巢颗粒细胞中SMAD4表达水平升高(P<0.05)。siRNA可显著降低PCOS大鼠卵巢颗粒细胞中SMAD4表达水平(P<0.01),并可促进颗粒细胞增殖、抑制凋亡。结论PCOS大鼠卵巢颗粒细胞发育障碍可能与SMAD4基因过表达有关,SMAD4有望成为治疗PCOS患者排卵障碍的潜在靶点。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 颗粒细胞 SMAD4
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miRNA-15a通过靶向Wnt3a调控Wnt/β-catenin信号通路抑制卵巢癌的发展和转移 被引量：11
3
作者 王雨艳 黄鑫 +1 位作者 王琰琰 张欣 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2018年第14期712-716,共5页
目的:研究在卵巢癌发展转移进程中miRNA-15a的作用,并探讨其作用机制。方法:收集锦州医科大学附属第一医院2012年5月至2015年6月32例卵巢癌患者的手术切除标本,采用RT-PCR检测miRNA-15a表达。将培养的卵巢癌SKOV-3细胞分为转染miRNA-15... 目的:研究在卵巢癌发展转移进程中miRNA-15a的作用,并探讨其作用机制。方法:收集锦州医科大学附属第一医院2012年5月至2015年6月32例卵巢癌患者的手术切除标本,采用RT-PCR检测miRNA-15a表达。将培养的卵巢癌SKOV-3细胞分为转染miRNA-15a模拟物的实验组和转染无义miRNA的对照组,采用CCK8、Transwell及流式细胞术检测细胞增殖、侵袭和凋亡的变化,采用Western blot法检测相关蛋白表达。通过生物信息学方法预测miRNA-15a靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验结合Western blot法验证miRNA-15a对靶基因的调控。检测Wnt3a与miRNA-15a模拟物共转染SKOV-3细胞后对细胞增殖和侵袭的影响。结果:与癌旁组织中的miRNA-15a相对表达量0.692±0.228相比,显著低于卵巢癌组织中的0.911±0.209,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组细胞增殖能力相比,miRNA-15a过表达显著抑制实验组细胞增殖能力,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组189.667±14.742相比,miRNA-15a过表达显著抑制实验组的细胞侵袭能力96.667±13.614,差异具有统计学意义(P<0.05)。miRNA-15a过表达实验组的细胞凋亡率27.400%±0.854%显著高于对照组细胞凋亡率6.933%±0.379%,差异具有统计学意义(P<0.05)。miRNA-15a模拟物下调Wnt3a和β-catenin的表达,抑制细胞周期蛋白(Cyclin D1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,促进E-钙离子依赖的细胞黏附素(E-calcium-dependent adhesion,E-cad)的表达。双荧光素酶报告基因实验和Western blot结果表明miRNA-15a靶向抑制Wnt3a表达。上调Wnt3a能显著降低miRNA-15a对卵巢癌细胞增殖、侵袭和对Wnt/β-catenin信号通路的抑制作用。结论:miRNA-15a通过靶向Wnt3a调控Wnt/β-catenin信号通路的激活以抑制卵巢癌的发展和转移。 展开更多
关键词 卵巢癌 miRNA-15a WNT/Β-CATENIN信号通路 WNT3A
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二甲双胍通过自噬缓解氨诱导的星形胶质细胞老化 被引量：3
4
作者 杨丹 贾桂枝 戴红良 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1748-1752,共5页
目的确定二甲双胍对氨致星形胶质细胞老化的保护作用,并从自噬角度探讨其抗老化机理。方法将星形胶质细胞分为对照组、氯化铵组、二甲双胍(250、500μmol·L^-1)组。细胞先以二甲双胍预处理30 min,随后加入3 mmol·L^-1氯化铵... 目的确定二甲双胍对氨致星形胶质细胞老化的保护作用,并从自噬角度探讨其抗老化机理。方法将星形胶质细胞分为对照组、氯化铵组、二甲双胍(250、500μmol·L^-1)组。细胞先以二甲双胍预处理30 min,随后加入3 mmol·L^-1氯化铵共同作用72 h。以BeyoClick TM EdU-488细胞增殖检测试剂盒检测DNA合成情况;以蛋白质免疫印迹法检测自噬和老化标志蛋白的表达。结果3 mmol·L^-1氯化铵明显增加自噬蛋白LC3II、Beclin1和p62的表达。在Bafilomycin存在的情况下,氨可进一步诱导LC3Ⅱ表达的上调。二甲双胍预处理进一步增加氨诱导的LC3II上调,但抑制氨诱导的p62增加。二甲双胍预处理缓解氨诱导的星形胶质细胞增殖抑制和p16蛋白的过表达。结论二甲双胍可通过促进细胞自噬缓解氨诱导的星形胶质细胞老化。 展开更多
关键词 二甲双胍 氨 星形胶质细胞 老化 自噬 肝性脑病
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白藜芦醇治疗POI大鼠药物浓度筛选 被引量：2
5
作者 李宁 刘丽丽 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期206-210,共5页
目的通过观察不同浓度白藜芦醇治疗早发性卵巢功能不全（POI）成模大鼠的疗效,确定其治疗早发性卵巢功能不全大鼠的最佳药物浓度。方法将90只5周龄SPF级SD健康雌性大鼠按随机数字表分为低剂量白藜芦醇灌胃治疗组（a组18只）、中剂量白... 目的通过观察不同浓度白藜芦醇治疗早发性卵巢功能不全（POI）成模大鼠的疗效,确定其治疗早发性卵巢功能不全大鼠的最佳药物浓度。方法将90只5周龄SPF级SD健康雌性大鼠按随机数字表分为低剂量白藜芦醇灌胃治疗组（a组18只）、中剂量白藜芦醇灌胃治疗组（b组18只）、高剂量白藜芦醇灌胃治疗组（c组18只）、模型对照组（d组18只）、空白对照组（e组18只）。e组从造模前的动物中随机抽取;a、b、c、d组从成功造模（72只给予雷公藤多苷片50 mg·kg^-1·d^-1灌胃14 d,根据观测指标确定早发性卵巢功能不全成模）的动物中随机分组获得。a、b、c组分别采用每日20、50、80 mg/kg灌胃剂量,模型对照组采用0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃。42 d后采用ELISA法检测大鼠血清性激素：抗苗勒管激素（AMH）、黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E2）水平,HE染色镜检大鼠单位卵巢面积内成熟卵泡、闭锁卵泡和黄体数,评价其疗效。结果不同浓度白藜芦醇灌胃治疗组POI大鼠较0.5%羧甲基纤维素溶液灌胃组POI大鼠血清中AMH、E2水平高（P〈0.05）,LH、FSH水平低（P〈0.05）。不同浓度白藜芦醇灌胃治疗组POI大鼠较空白对照组大鼠血清中AMH、E2水平低（P〈0.05）,LH、FSH水平高（P〈0.05）。与a、b、c、e组比较,d组卵巢内颗粒细胞层数,成熟卵泡数以及黄体数量少（P〈0.05）,闭锁卵泡数明显增加（P〈0.05）。结论不同浓度白藜芦醇灌胃治疗POI大鼠均有一定的疗效,50 mg/kg浓度效果最好,是最佳药物浓度。 展开更多
关键词 早发性卵巢功能不全 白藜芦醇 最佳药物浓度
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Toll样受体4参与卵巢癌细胞增殖与凋亡的调控 被引量：2
6
作者 郑金丹 于晓萌 +1 位作者 张逸文 王莉 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第3期242-246,共5页
目的 探讨Toll样受体4 (TLR4)异常表达对卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响。方法 免疫组化法检测卵巢癌及其周围正常组织中TLR4的表达情况;构建针对TLR4基因的siRNA,转染人卵巢癌细胞株SKOV3,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TLR4 mRNA表达... 目的 探讨Toll样受体4 (TLR4)异常表达对卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响。方法 免疫组化法检测卵巢癌及其周围正常组织中TLR4的表达情况;构建针对TLR4基因的siRNA,转染人卵巢癌细胞株SKOV3,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TLR4 mRNA表达,Western blotting检测TLR4蛋白表达;CCK-8法检测TLR4 siRNA转染SKOV3细胞6~24 h后细胞的生长情况,流式细胞仪检测细胞转染24 h后的凋亡情况。结果 TLR4在卵巢癌及其周围正常组织中均有表达,且卵巢癌组织中TLR4表达量明显高于癌旁组织(P <0.05);TLR4 siRNA转染后,SKOV3细胞中TLR4 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P <0.05);siRNA转染24 h后,SKOV3细胞活力下降,细胞凋亡率升高(P <0.05)。结论 TLR4参与了卵巢癌细胞增殖与凋亡的调控,干扰TLR4能抑制SKOV3细胞增殖,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 卵巢癌 TOLL样受体4 小干扰RNA
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含缬酪肽蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床意义 被引量：1
7
作者 郭小菲 刘立红 艾浩 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期600-606,共7页
目的:观察上皮性卵巢癌(EOC)组织中含缬酪肽蛋白(VCP)的表达情况及其与EOC患者临床病理特征的关系,为EOC的分子治疗提供依据。方法:采用免疫组织化学法检测94例EOC组织标本、13例卵巢交界性肿瘤组织标本、36例卵巢良性肿瘤组织标本和8... 目的:观察上皮性卵巢癌(EOC)组织中含缬酪肽蛋白(VCP)的表达情况及其与EOC患者临床病理特征的关系,为EOC的分子治疗提供依据。方法:采用免疫组织化学法检测94例EOC组织标本、13例卵巢交界性肿瘤组织标本、36例卵巢良性肿瘤组织标本和8例正常卵巢组织标本中VCP的表达情况。分析VCP阳性表达率与EOC患者各临床病理参数(年龄、FIGO分期、病理类型、组织学分级、是否有淋巴结转移、是否有腹水和术前CA125水平)的关系。采用免疫荧光技术和Western blotting法检测人卵巢上皮HOSEpiC细胞和人EOC SKOV-3细胞中VCP表达;将SKOV-3细胞分为对照组(未经CB-5083处理)和处理组(经CB-5083处理),划痕实验分析2组SKOV-3细胞迁移率,平板克隆形成实验分析2组SKOV-3细胞克隆形成率,免疫荧光法分析2组SKOV-3细胞中VCP表达情况,Western blotting法检测2组SKOV-3细胞中VCP、NF-κB/P65、IκBα和p-IκBα蛋白表达水平。结果:EOC、交界性卵巢肿瘤、良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织中VCP阳性表达率组间比较差异有统计学意义(P<0.05);VCP表达与患者FIGO分期、组织学分级和是否有淋巴结转移有关联(P<0.05),而与患者年龄、病理类型、是否有腹水及术前CA125水平无关联(P>0.05)。SKOV-3细胞中VCP表达水平高于HOSEpiC细胞(P<0.05),处理组SKOV-3细胞迁移率低于对照组(P<0.05),处理组克隆形成率低于对照组(P<0.05),处理组SKOV-3细胞中VCP和NF-κB/P65蛋白表达水平低于对照组(P<0.05),p-IκBα蛋白表达水平高于对照组(P<0.05)。结论:VCP在EOC组织和细胞中呈高表达,VCP高表达可促进肿瘤的迁移和增殖。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 含缬酪肽蛋白 划痕实验 平板克隆形成实验
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敲低KHDRBS3基因抑制人卵巢癌CAOV-3细胞增殖 被引量：1
8
作者 马晓微 任丽莉 +3 位作者 张宁兮 刘超 朱艳 肖建英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1062-1066,共5页
目的探讨含KH RNA结合结构域信号转导相关分子3(KHDRBS3)基因对体外培养的人卵巢癌CAOV-3细胞增殖的影响。方法取对数生长期细胞,分为未转染组、无关小干涉RNA(siRNA)序列转染组、KHDRBS3-siRNA转染组。采用反转录PCR及Western blot法验... 目的探讨含KH RNA结合结构域信号转导相关分子3(KHDRBS3)基因对体外培养的人卵巢癌CAOV-3细胞增殖的影响。方法取对数生长期细胞,分为未转染组、无关小干涉RNA(siRNA)序列转染组、KHDRBS3-siRNA转染组。采用反转录PCR及Western blot法验证KHDRBS3基因的沉默效果;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法比较不同组别CAOV-3细胞增殖情况;采用流式细胞术检测不同处理组CAOV-3细胞的细胞周期分布。结果 KHDRBS3-siRNA转染后可明显降低CAOV-3细胞KHDRBS3的mRNA和蛋白水平,敲低CAOV-3细胞KHDRBS3水平后,细胞的增殖能力明显降低,G0/G1期细胞比例增加、S期细胞比例降低、G2/M期细胞比例无明显变化。结论敲低KHDRBS3的水平可使CAOV-3细胞发生G0/G1期阻滞,抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 含KH RNA结合结构域信号转导相关分子3(KHDRBS3) 卵巢癌 CAOV-3细胞 细胞周期 RNA干涉
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