研究旨在利用仿生矿化方法提高戊型肝炎假病毒颗粒(MS2-HEV)的热稳定性,解决戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)核酸检测质控品耐热问题。将重组质粒pET28b-MS2-HEV转化至Rosetta(DE3)超级感受态细胞中,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(...研究旨在利用仿生矿化方法提高戊型肝炎假病毒颗粒(MS2-HEV)的热稳定性,解决戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)核酸检测质控品耐热问题。将重组质粒pET28b-MS2-HEV转化至Rosetta(DE3)超级感受态细胞中,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后制备MS2-HEV。将MS2-HEV置于pH值7.5、钙离子(Ca2+)终浓度为5.5 mmol/L、钙磷比(Ca/P)为1.67的矿化液中,37℃矿化3 h,制备戊型肝炎假病毒仿生矿化颗粒(MS2-HEV-CaP)。采用RT-qPCR与电镜方法分析其矿化效果与热稳定性。结果显示:MS2-HEV的矿化效率达70%,矿化制备的MS2-HEV-CaP可在37℃条件下稳定保存14 d。研究表明,试验成功制备了MS2-HEV-CaP,利用仿生矿化方法提高了MS2-HEV的热稳定性。展开更多
