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UGT8对结直肠癌生长迁移的影响及与SOX9相关性研究
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作者 庞一心 李文清 +2 位作者 姚奇隆 王宇 张秀梅 《中国肿瘤临床》 北大核心 2025年第12期595-602,共8页
目的:探讨尿苷二磷酸半乳糖转移酶(UDP galactosyltransferase 8,UGT8)对结直肠癌细胞生长迁移的影响及可能的机制,以及性别决定区Y框蛋白9(SRY-box transcription factor 9,SOX9)对UGT8可能的调控作用。方法:基于GEPIA2、UALCAN和TIMER... 目的:探讨尿苷二磷酸半乳糖转移酶(UDP galactosyltransferase 8,UGT8)对结直肠癌细胞生长迁移的影响及可能的机制,以及性别决定区Y框蛋白9(SRY-box transcription factor 9,SOX9)对UGT8可能的调控作用。方法:基于GEPIA2、UALCAN和TIMER 2.0在线数据库分析结直肠癌组织中UGT8和SOX9的表达水平及两者表达水平的相关性。通过免疫组织化学法检测结直肠癌及其癌旁组织的UGT8和SOX9的蛋白表达情况并分析其与临床病理特征的关系及两者表达水平相关性;在结直肠癌细胞中沉默UGT8后,CCK-8实验检测细胞的增殖能力;Transwell和划痕实验检测细胞的迁移能力;Western blot实验检测EMT标志物(E-cadherin和ZEB1)蛋白表达情况;RT-qPCR和Western blot法检测沉默SOX9后UGT8的mRNA和蛋白表达情况;JASPER在线网站预测SOX9是否与UGT8的启动子结合。结果:生物信息学结果显示,与正常组织相比较,UGT8和SOX9的mRNA表达水平异常升高,而且两者表达水平呈正相关。免疫组织化学结果显示,UGT8、SOX9在结直肠癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织;UGT8的蛋白表达水平与N分期相关;SOX9的表达水平与T分期相关;UGT8和SOX9在结直肠癌组织中的表达存在正相关。沉默UGT8后细胞的增殖能力减弱;细胞的迁移能力降低;E-cadherin蛋白表达增加,ZEB1蛋白表达降低。沉默SOX9后,UGT8的mRNA和蛋白水平显著降低;JASPER网站预测SOX9可以和UGT8的启动子特异序列结合。结论:UGT8和SOX9在结直肠癌病理组织中均高表达,与临床病理特征相关,而且两者表达水平呈正相关;UGT8通过促进上皮间质转化促进结直肠癌细胞的增殖和迁移;SOX9促进UGT8的mRNA和蛋白表达,并可能与UGT8启动子结合。 展开更多
关键词 UGT8 SOX9 结直肠癌 增殖 迁移
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miR-145-5p靶向双特异性磷酸酶6对人子宫内膜癌增殖、迁移、侵袭与凋亡的影响 被引量:12
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作者 门颖超 张蕾 艾浩 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期61-66,共6页
目的探讨微小RNA-145-5p(miR-145-5p)靶向双特异性磷酸酶6(DUSP6)对于人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、迁移、侵袭与凋亡能力的影响。方法人子宫内膜癌Ishikawa细胞分为A组(未转染组)、B组(mimic NC组)、C组(mimic组)、D组(inhibitor NC... 目的探讨微小RNA-145-5p(miR-145-5p)靶向双特异性磷酸酶6(DUSP6)对于人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、迁移、侵袭与凋亡能力的影响。方法人子宫内膜癌Ishikawa细胞分为A组(未转染组)、B组(mimic NC组)、C组(mimic组)、D组(inhibitor NC组)、E组(inhibitor组),采用脂质体(Lipo 2000)细胞转染法转染。利用RT-PCR技术验证miR-145-5p的表达;过表达或抑制表达miR-145-5p对Ishikawa细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡影响将运用MTT、伤口愈合、Transwell及凋亡实验检测;运用生物信息学方法预测miR-145-5p的潜在靶基因;运用RT-PCR及Western Blot技术检测细胞转染后下游靶基因DUSP6mRNA及蛋白的表达水平。结果转染后48、72、96 h,C组比B组细胞增殖能力下降,E组比D组细胞的增殖能力增强,差异有统计学意义(P<0.05)。转染后24、48 h,C组比B组细胞迁移能力降低,E组比D组细胞迁移能力增强(P<0.05)。转染48 h后,C组比B组侵袭能力下降,E组比D组侵袭能力增强,差异有统计学意义(P<0.05)。转染48 h后,A组、B组、C组、D组、E组凋亡率分别为(0.66±0.05)%、(0.60±0.03)%、(17.74±1.02)%、(0.72±0.04)%、(0.31±0.02)%,差异有统计学意义(P<0.05)。经生物信息学在线软件预测DUSP6是miR-145-5p的潜在靶基因。转染48 h后,DUSP6 mRNA在A组、B组、C组、D组、E组中的相对表达水平分别为1.00±0.09、1.09±0.08、0.47±0.04、1.03±0.05、4.62±0.26,差异有统计学意义(P<0.05)。其蛋白的相对表达量为0.29±0.03、0.28±0.04、0.16±0.03、0.32±0.05、0.74±0.05,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-145-5p过表达后能够抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭并且促进癌细胞凋亡,其机制可能是通过负向调节DUSP6的表达而实现。 展开更多
关键词 miR-145-5p 子宫内膜癌 双特异性磷酸酶6 增殖 侵袭 凋亡
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蜂王浆蛋白体外消化产物对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响及其可能机制 被引量:4
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作者 王天石 王馨梦 付莉 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期533-541,共9页
通过研究蜂王浆蛋白体外消化产物对胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制,为蜂王浆蛋白辅助治疗胃癌奠定实验基础。采用碱提酸沉法提取蜂王浆蛋白,并通过体外模拟消化实验得到蜂王浆蛋白体外消化产物,然后用不同质... 通过研究蜂王浆蛋白体外消化产物对胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制,为蜂王浆蛋白辅助治疗胃癌奠定实验基础。采用碱提酸沉法提取蜂王浆蛋白,并通过体外模拟消化实验得到蜂王浆蛋白体外消化产物,然后用不同质量浓度的蜂王浆蛋白体外消化物诱导体外培养的胃癌细胞SGC-7901,通过倒置显微镜观察其对胃癌细胞形态的影响,并通过集落形成实验检测诱导后胃癌细胞的集落形成能力;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测其对胃癌细胞增殖的抑制作用,通过流式细胞术检测细胞周期及凋亡,并通过蛋白质印迹法检测其诱导后胃癌细胞中p53和PARP-1蛋白的表达情况。结果表明:蜂王浆蛋白体外消化产物使胃癌细胞形态发生皱缩,细胞密度降低,集落形成能力降低(P<0.05),对胃癌细胞SGC-7901的增殖具有抑制作用。0.2 mg/mL体外消化产物经24 h和48 h培养后对胃癌细胞抑制率分别达到(57.58±3.48)%和(62.84±1.98)%(P<0.05)。与空白对照组相比,蜂王浆蛋白体外消化产物对SGC-7901细胞增殖的抑制作用呈剂量依赖性,S期细胞减少,从而引起细胞凋亡;且经蜂王浆蛋白体外消化产物诱导后,胃癌细胞中p53蛋白表达量增加(P<0.05),PARP-1蛋白表达量减少(P<0.05)。说明蜂王浆蛋白体外消化产物能抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖并诱导其发生凋亡,其机制可能与p53表达上调和PARP-1表达下调有关。 展开更多
关键词 蜂王浆蛋白体外消化产物 胃癌 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
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敲低KHDRBS3基因抑制人卵巢癌CAOV-3细胞增殖 被引量:1
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作者 马晓微 任丽莉 +3 位作者 张宁兮 刘超 朱艳 肖建英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1062-1066,共5页
目的探讨含KH RNA结合结构域信号转导相关分子3(KHDRBS3)基因对体外培养的人卵巢癌CAOV-3细胞增殖的影响。方法取对数生长期细胞,分为未转染组、无关小干涉RNA(siRNA)序列转染组、KHDRBS3-siRNA转染组。采用反转录PCR及Western blot法验... 目的探讨含KH RNA结合结构域信号转导相关分子3(KHDRBS3)基因对体外培养的人卵巢癌CAOV-3细胞增殖的影响。方法取对数生长期细胞,分为未转染组、无关小干涉RNA(siRNA)序列转染组、KHDRBS3-siRNA转染组。采用反转录PCR及Western blot法验证KHDRBS3基因的沉默效果;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法比较不同组别CAOV-3细胞增殖情况;采用流式细胞术检测不同处理组CAOV-3细胞的细胞周期分布。结果 KHDRBS3-siRNA转染后可明显降低CAOV-3细胞KHDRBS3的mRNA和蛋白水平,敲低CAOV-3细胞KHDRBS3水平后,细胞的增殖能力明显降低,G0/G1期细胞比例增加、S期细胞比例降低、G2/M期细胞比例无明显变化。结论敲低KHDRBS3的水平可使CAOV-3细胞发生G0/G1期阻滞,抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 含KH RNA结合结构域信号转导相关分子3(KHDRBS3) 卵巢癌 CAOV-3细胞 细胞周期 RNA干涉
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