基于HMMR在肺腺癌组织中表达水平及其对LUAD患者预后影响的生物信息学分析 被引量：4

1

作者 李书珍 曹雅杰 +4 位作者 耿海营 蔡曾晓瑞 代春美 温有锋 李宁 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1502-1509,共8页

目的:探讨透明质酸介导的细胞游走受体(HMMR)在肺腺癌(LUAD)组织中的表达及其对LUAD患者预后的影响,阐明HMMR在LUAD发生发展中的作用。方法:通过基因表达汇编(GEO)、肿瘤基因组图谱(TCGA)和人类蛋白图谱(HPA)数据库评估LUAD组织中HMMR m... 目的:探讨透明质酸介导的细胞游走受体(HMMR)在肺腺癌(LUAD)组织中的表达及其对LUAD患者预后的影响,阐明HMMR在LUAD发生发展中的作用。方法:通过基因表达汇编(GEO)、肿瘤基因组图谱(TCGA)和人类蛋白图谱(HPA)数据库评估LUAD组织中HMMR mRNA和蛋白表达水平。采用GEPIA2数据库分析HMMR表达对LUAD患者总生存期(OS)和无病生存期(DFS)的影响,采用TCGA数据库分析HMMR mRNA表达与LUAD患者临床病理参数及预后的关系,采用GSEA富集分析探讨HMMR在LUAD组织中显著富集的通路,采用UALCAN数据库探讨HMMR mRNA表达与TP53基因突变的关系,采用STRING数据库预测HMMR与p53信号通路中蛋白的相互作用。结果:LUAD组织中HMMR mRNA和蛋白表达水平明显高于正常组织和癌旁组织(P<0.01)。HMMR mRNA表达水平较高的患者OS和DFS更短(P<0.01)。LUAD组织中,HMMR mRNA表达与患者TNM分期、T分期和N分期有关联(P<0.01)。单因素和多因素Cox分析,HMMR mRNA高表达的患者OS更短。GSEA富集分析,细胞周期、同源重组、p53信号通路、膀胱癌、胰腺癌、小细胞肺癌和泛素化介导的蛋白水解等通路显著富集在HMMR高表达显型。结论:LUAD组织中HMMR表达明显上调,高表达的HMMR mRNA是LUAD患者预后差的独立评价指标。 展开更多

关键词 肺腺癌 透明质酸介导的运动受体 数据库 预后

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TRIM24蛋白在人肾透明细胞癌组织中的表达及其临床意义

2

作者 耿海营 于焱 +2 位作者 代春美 温有锋 李宁 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期486-492,共7页

目的:探讨三重基序蛋白24(TRIM24)在肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的表达,阐明TRIM24蛋白与ccRCC患者临床病理特征和预后的关联。方法:选取术前均未行放化疗的90例ccRCC患者的癌组织和癌旁正常组织。采用组织芯片技术和免疫组织化学法检测c... 目的:探讨三重基序蛋白24(TRIM24)在肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的表达,阐明TRIM24蛋白与ccRCC患者临床病理特征和预后的关联。方法:选取术前均未行放化疗的90例ccRCC患者的癌组织和癌旁正常组织。采用组织芯片技术和免疫组织化学法检测ccRCC组织中TRIM24蛋白表达水平,分析ccRCC组织与癌旁正常组织中TRIM24蛋白表达水平的差异。计算TRIM24蛋白表达评分及其平均值,并根据平均值将ccRCC患者分为TRIM24蛋白低表达组和TRIM24蛋白高表达组;分析TRIM24蛋白表达水平与患者不同临床病理特征之间的关联,分析TRIM24蛋白表达水平与患者预后之间的关系。结果:免疫组织化学法,TRIM24蛋白在ccRCC患者癌组织细胞核和细胞质中均有表达,且癌组织中TRIM24蛋白表达水平与癌旁正常组织比较差异均有统计学意义(P<0.05);ccRCC组织细胞核中TRIM24蛋白表达水平与患者年龄、性别和肿瘤大小有关联(P<0.05);KaplanMeier生存分析,TRIM24蛋白在ccRCC组织细胞质中高表达、年龄大和病理分级高的患者总生存期短于TRIM24蛋白低表达、年龄小和病理分级低的患者(P<0.05);多因素Cox回归分析,与TRIM24蛋白低表达和病理分级低的患者比较,ccRCC组织细胞质中TRIM24蛋白高表达和病理分级高的患者预后较差(P<0.05)。结论:ccRCC癌组织的细胞质中TRIM24高表达和病理分级高的患者术后生存率较低,预后较差。 展开更多

关键词 肾透明细胞癌 三重基序蛋白24 免疫组织化学 病理分级 预后

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基础转录激活因子1蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量：1

3

作者 穆天驰 刘超 +3 位作者 富帅 李启阳 王馨梦 肖建英 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期94-99,219,共7页

目的:探讨基础转录激活因子1 (ABT1)蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌患者临床参数和预后的相关性,阐明ABT1在胃癌发生发展中的作用。方法:选择100例胃癌患者的胃癌组织和80例与其配对的癌旁组织,采用免疫组织化学法检测ABT1蛋白在癌... 目的:探讨基础转录激活因子1 (ABT1)蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌患者临床参数和预后的相关性,阐明ABT1在胃癌发生发展中的作用。方法:选择100例胃癌患者的胃癌组织和80例与其配对的癌旁组织,采用免疫组织化学法检测ABT1蛋白在癌组织及癌旁组织中的表达情况。对免疫组织化学结果中染色细胞的比例和染色程度进行半定量分析,对半定量分析结果与胃癌患者临床参数的关系进行统计学分析。采用Kaplan-Meier法分析ABT1蛋白表达水平与胃癌患者生存期的相关性。结果:ABT1蛋白在胃癌组织和癌旁组织中的细胞核和细胞质中均有表达,且胃癌组织中ABT1蛋白表达水平低于癌旁组织(P=0.021);胃癌患者胃癌组织中ABT1蛋白表达水平与胃癌组织病理分级呈负相关关系(r=-0.224,P=0.026)。Kaplan-Meier生存曲线分析,胃癌患者ABT1蛋白高表达与预后良好呈正相关关系(HR=1.483,P<0.01),且ABT1蛋白高表达的胃癌患者生存率明显高于ABT1蛋白低表达的胃癌患者(HR=2.411,P=0.027)。结论:ABT1蛋白在胃癌组织中低表达,提示其可作为胃癌预后良好的标志因子之一。 展开更多

关键词 基础转录激活因子1 胃肿瘤 免疫组织化学 组织芯片

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沉默FOXK1基因对胃癌HGC-27细胞增殖、迁移和侵袭的影响

4

作者 陈爽 李红 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期371-378,共8页

目的:探讨沉默叉头框K1(FOXK1)对胃癌HGC-27细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并阐明其可能的机制。方法:基于基因表达水平值的交互式分析平台(GEPIA)数据库查询在胃癌组织和正常胃组织中FOXK1 mRNA表达水平;利用化学合成的si-FOXK1体外转染... 目的:探讨沉默叉头框K1(FOXK1)对胃癌HGC-27细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并阐明其可能的机制。方法:基于基因表达水平值的交互式分析平台(GEPIA)数据库查询在胃癌组织和正常胃组织中FOXK1 mRNA表达水平;利用化学合成的si-FOXK1体外转染胃癌HGC-27细胞,实验分为空白对照组、nc-FOXK1组和si-FOXK1组,采用Western blotting法评估各组的转染效率,MTT法检测si-FOXK1转染后各组胃癌HGC-27细胞的增殖能力,克隆形成实验检测si-FOXK1转染后各组胃癌HGC-27细胞的克隆形成数,细胞划痕实验检测si-FOXK1转染后各组胃癌HGC-27细胞的迁移率,Transwell小室实验检测si-FOXK1转染后各组胃癌HGC-27细胞的细胞迁移数和细胞侵袭数,Western blotting法检测si-FOXK1转染后各组胃癌HGC-27细胞中核因子κB(NF-κB)通路相关蛋白[NF-κB p65和磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)]的表达水平。结果:GEPIA数据库查询,在胃癌组织中FOXK1 mRNA表达水平高于正常胃组织(P<0.05);Western blotting法检测,在胃癌HGC-27细胞中FOXK1蛋白表达水平高于人正常胃黏膜GES-1细胞(P<0.01);与空白对照组和nc-FOXK1组比较,si-FOXK1组FOXK1蛋白表达水平明显降低(P<0.01);MTT法检测,与空白对照组和nc-FOXK1组比较,si-FOXK1组胃癌HGC-27细胞的增殖能力降低(P<0.05);克隆形成实验检测,与空白对照组和nc-FOXK1组比较,si-FOXK1组胃癌HGC-27细胞克隆形成数减少(P<0.05);细胞划痕实验检测,与空白对照组和nc-FOXK1组比较,si-FOXK1组胃癌细胞的迁移率降低(P<0.05);Transwell小室实验检测,与空白对照组和nc-FOXK1组比较,si-FOXK1组胃癌HGC-27细胞的迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.05);Western blotting法检测,与空白对照组和nc-FOXK1组比较,si-FOXK1组胃癌HGC-27细胞中p-NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:FOXK1在胃癌HGC-27细胞中高表达,沉默FOXK1可抑制胃癌HGC-27细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能与NF-κB通路有关。 展开更多

关键词 叉头框K1 胃肿瘤 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 核因子ΚB

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肌肽通过抑制ROS/NLRP3/GSDMD介导的焦亡减轻OGD/R对BV2细胞损伤

5

作者 冉睿黎 王宇彤 +5 位作者 宋俊秋 边疆 王德威 姜晓涵 尤富麟 杨菁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2150-2158,共9页

目的探究肌肽对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导BV2细胞损伤的保护作用及对ROS/NLRP3/GSDMD通路介导焦亡的影响。方法BV2细胞随机分为对照组(Con)、模型组(OGD/R)、肌肽组(OGD/R+CAR)、抑制剂组(OGD/R+MCC950)、肌肽+抑制剂组(OGD/R+CAR+M... 目的探究肌肽对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导BV2细胞损伤的保护作用及对ROS/NLRP3/GSDMD通路介导焦亡的影响。方法BV2细胞随机分为对照组(Con)、模型组(OGD/R)、肌肽组(OGD/R+CAR)、抑制剂组(OGD/R+MCC950)、肌肽+抑制剂组(OGD/R+CAR+MCC950)。采用MTT法检测细胞存活率;微量酶标法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)释放率;Hoechst 33342/SYTOX Green染色法检测细胞损伤情况;DCFH-DA检测细胞中ROS水平;免疫荧光观察细胞内NF-κB p65入核水平;Western blot检测细胞NLRP3、ASC、cleaved caspase-1、GSDMD-N的蛋白表达水平;ELISA检测细胞上清液中IL-1β、IL-18水平。结果与Con组相比,OGD/R组细胞存活率明显降低,LDH释放明显升高,细胞形态受损,SYTOX Green阳性率与细胞中ROS水平明显升高,细胞核中NF-κB p65荧光强度增强,细胞内NLRP3、ASC、cleaved caspase-1、GSDMD-N蛋白表达水平及IL-1β、IL-18水平明显升高。与OGD/R组相比,其他组的细胞存活率明显升高,LDH释放率明显降低,细胞损伤得到一定程度的改善,SYTOX Green阳性率和细胞中ROS生成水平明显降低,细胞核中NF-κB p65荧光强度明显降低,相关蛋白表达水平及细胞上清液中IL-1β、IL-18水平明显降低。结论肌肽通过抑制氧化应激及NF-κB激活,进而抑制NLRP3/GSDMD信号途径的焦亡对OGD/R致BV2细胞损伤发挥保护作用。 展开更多

关键词 肌肽 氧糖剥夺/复糖复氧 小胶质细胞 NF-ΚB 焦亡 NLRP3炎症小体

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肌肽通过AMPK/mTOR信号通路抑制自噬对氧糖剥夺/复糖复氧诱导星形胶质细胞损伤的保护作用

6

作者 王宇彤 冉睿黎 +4 位作者 边疆 姜晓涵 宋俊秋 王德威 杨菁 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1297-1304,共8页

目的:探讨肌肽(CAR)对氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)诱导的星形胶质细胞(AS)损伤的改善作用,并阐明其可能的作用机制。方法:将AS分为对照组、模型组(OGD/R组)、OGD/R+CAR组(CAR组)和OGD/R+CAR+腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)激活剂AICAR组(CAR+AICA... 目的:探讨肌肽(CAR)对氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)诱导的星形胶质细胞(AS)损伤的改善作用,并阐明其可能的作用机制。方法:将AS分为对照组、模型组(OGD/R组)、OGD/R+CAR组(CAR组)和OGD/R+CAR+腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)激活剂AICAR组(CAR+AICAR组)。MTT法和绿菁染色检测各组AS存活率和绿菁染色阳性细胞率,AnnexinⅤ-FITC/PI法流式细胞术检测各组AS凋亡率,Western blotting法检测各组AS中AMPK、磷酸化AMPK (p-AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR (p-mTOR)、微管相关蛋白轻链3B (LC3B)、Beclin-1和P62蛋白表达水平,免疫荧光染色法观察各组AS中LC3B阳性荧光强度。结果:与对照组比较,OGD/R组AS存活率和绿菁染色阳性细胞率明显降低(P<0.01),AS凋亡率明显升高(P<0.01), AS中p-AMPK/AMPK和LC3BⅡ/LC3BⅠ比值及Beclin-1蛋白表达水平明显升高(P<0.01),p-mTOR/mTOR比值及P62蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与OGD/R组比较,CAR组AS存活率和绿菁染色阳性细胞率明显升高(P<0.01),AS凋亡率明显降低(P<0.01),AS中p-AMPK/AMPK和LC3BⅡ/LC3BⅠ比值及Beclin-1蛋白表达水平明显降低(P<0.01),p-mTOR/mTOR比值和p62蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与CAR组比较,CAR+AICAR组AS存活率和绿菁染色阳性细胞率明显降低(P<0.01),AS凋亡率升高(P<0.01)、AS中p-AMPK/AMPK和LC3BⅡ/LC3BⅠ比值及Beclin-1蛋白表达水平明显升高(P<0.01),p-mTOR/mTOR比值和P62蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。LC3B免疫荧光染色结果与Westernblotting法检测结果趋势一致。结结论论:CAR对OGD/R所致AS损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制AMPK/mTOR信号途径,进而抑制细胞自噬有关。 展开更多

关键词 肌肽 自噬 星形胶质细胞 腺苷酸活化蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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肌肽对血管性认知功能障碍大鼠海马内Akt/mTOR通路及自噬的影响

7

作者 王高 卢金莹 +5 位作者 冉睿黎 赵欣敏 边疆 王宇彤 姜晓涵 杨菁 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第6期713-723,共11页

目的:观察肌肽(CAR)对血管性认知功能障碍(VCI)大鼠的空间学习记忆能力的影响,并探究Akt/mTOR通路及自噬在其中的作用。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、VCI组及VCI+CAR-L组、VCI+CAR-M组和VCI+CAR-H组。Morris水迷宫实... 目的:观察肌肽(CAR)对血管性认知功能障碍(VCI)大鼠的空间学习记忆能力的影响,并探究Akt/mTOR通路及自噬在其中的作用。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、VCI组及VCI+CAR-L组、VCI+CAR-M组和VCI+CAR-H组。Morris水迷宫实验评测大鼠的空间学习记忆能力;Nissl染色检测海马CA1区细胞损伤的范围和程度;氮蓝四唑法和硫代巴比妥酸法分别检测海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;Western Blot测定p-Akt、p-mTOR、Beclin-1以及LC3B蛋白表达,同时免疫荧光染色检测CA1区LC3B表达变化。将SH-SY5Y细胞分为对照(Control)组、氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)组、OGD/R+雷帕霉素(RAPA)组、OGD/R+CAR(1.2 mmol/L)组及OGD/R+CAR+RAPA组。噻唑蓝(MTT)检测神经元存活率:Western Blot检测神经元细胞p-mTOR、Beclin-1及LC3B水平,免疫荧光染色检测自噬程度。结果:CAR可改善VCI大鼠学习记忆能力,降低海马组织细胞损伤,抑制氧化应激(P<0.01),提高p-Akt、p-mTOR、p62蛋白的表达(P<0.01或P<0.05),降低Beclin-1的表达和LC3B II/I的比值(P<0.01或P<0.05)。CAR可提高SH-SY5Y各组细胞OGD/R后的存活率(P<0.01),抑制海马神经元的自噬。此外,RAPA的干预抑制了CAR的治疗效果,降低SH-SY5Y各组的存活率(P<0.01),增强了细胞自噬。结论:CAR可改善大鼠VCI损伤,其机制可能通过抑制氧化应激、激活神经细胞中的Akt/mTOR信号通路,进而抑制过度自噬发挥保护作用。 展开更多

关键词 肌肽 血管性认知障碍 自噬 Akt/mTOR信号通路 氧化应激 大鼠

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RITP患者血浆中利福平依赖性抗血小板抗体的特性及其作用机制 被引量：8

8

作者 孙平 吴广胜 梁迅 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期413-419,共7页

目的研究利福平诱导的免疫性血小板减少症(RITP)患者血浆中的利福平依赖性抗体(Rd-Ab)的特性及其诱导出血的可能机制,并探索治疗RITP药物的效果和作用特征。方法提取RITP患者血浆,通过流式细胞术、单克隆抗体俘获血小板抗原(MAIPA)法及... 目的研究利福平诱导的免疫性血小板减少症(RITP)患者血浆中的利福平依赖性抗体(Rd-Ab)的特性及其诱导出血的可能机制,并探索治疗RITP药物的效果和作用特征。方法提取RITP患者血浆,通过流式细胞术、单克隆抗体俘获血小板抗原(MAIPA)法及血小板聚集试验检测血清中Rd-Ab的特性。取NOD/SCID小鼠,建立RITP模型,观察抗体对血小板的破坏机制,评价糖皮质激素和静脉注射免疫球蛋白(IVIG)单独或联合使用对保护血小板的疗效。结果体外实验证实RITP患者血清中存在利福平依赖性抗体(Rd-Ab),该抗体与血小板的结合可被抗糖蛋白Ⅱb/Ⅲa单抗AP2完全阻断,证明其与糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的结合位点是钙离子依赖性抗原决定簇。血小板聚集试验显示,Rd-Ab可抑制血小板聚集。小鼠体内实验结果显示,Rd-Ab可致小鼠体内人血小板被迅速清除,单用糖皮质激素可阻断Rd-Ab诱导的人血小板清除,延长血小板平均寿命(MPL),该作用在24h后起效,72h疗效达最佳,而IVIG可即刻起效。与RITP小鼠模型组相比(MPL 1.1±0.2h),糖皮质激素单独治疗组和IVIG单独治疗组的MPL分别延长至4.7±0.7h和4.2±1.1h(P<0.05),两药联合治疗组血小板MPL达6.2±1.5h(P<0.05)。结论 Rd-Ab与血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa上的钙离子依赖性抗原决定簇结合,从而抑制血小板聚集。Rd-Ab可导致小鼠血中人血小板的迅速清除,糖皮质激素和IVIG干预均可在一定程度上抑制血小板清除,IVIG起效更快,但两药联合效果更好。 展开更多

关键词 利福平 血小板减少症 糖蛋白Ⅱb/Ⅲa 模型 动物

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抗血小板整合素β3抗体诱导内皮细胞凋亡机制的研究 被引量：2

9

作者 王健玉 王明镜 +5 位作者 孙平 孙妍 王学哲 胡晓梅 全日城 LIANG Simon-Xun 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期567-573,共7页

目的:探讨抗血小板整合素β3抗体对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的损伤及其相关机制。方法:收集36例慢性免疫性血小板减少症患者的血清,通过流式细胞术和单克隆抗体特异性俘获血小板抗原技术(MAIPA)筛选出含抗整合素β3抗体的患者血清... 目的:探讨抗血小板整合素β3抗体对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的损伤及其相关机制。方法:收集36例慢性免疫性血小板减少症患者的血清,通过流式细胞术和单克隆抗体特异性俘获血小板抗原技术(MAIPA)筛选出含抗整合素β3抗体的患者血清。用抗整合素β3血清处理HUVEC后,乳酸脱氢酶(LDH)活性测定法检测HUVEC损伤情况,流式细胞术检测HUVEC凋亡情况,逆转录实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测HUVEC凋亡相关基因Bax表达情况,Western blot检测细胞凋亡相关信号通路蛋白Akt和相关蛋白Bax的表达情况。用抗整合素β3血清结合Akt激活剂SC79处理HUVEC后,LDH活性测定法检测HUVEC损伤情况,流式细胞术检测HUVEC的凋亡情况,RT-q PCR检测HUVEC凋亡相关基因Bax的表达情况。结果:从36份患者血清中筛选出5份含抗整合素β3抗体血清,用这些血清处理HUVEC后,细胞外LDH活性增加(P<0.05),细胞凋亡比例增加(P<0.05),Bax蛋白和mRNA表达水平上调(P<0.05),p Akt蛋白表达下调(P<0.05)。抗整合素β3血清结合SC79处理HUVEC后,与单独使用抗整合素β3血清处理组相比,细胞外LDH活性显著降低(P<0.05),HUVEC凋亡比例显著下降(P<0.05),Bax基因表达下降(P<0.05)。结论:抗整合素β3抗体在体外能够引起HUVEC的损伤和凋亡,其作用机制可能与抑制Akt信号通路有关,且Akt激活剂SC79能够在体外抑制抗整合素β3抗体引起的HUVEC损伤和凋亡。 展开更多

关键词 免疫性血小板减少症 抗整合素β3抗体 AKT 凋亡 内皮细胞

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肌肽对血管性认知障碍大鼠氧化应激及NF-κB信号途径的影响 被引量：10

10

作者 杨文强 何鑫 +4 位作者 白雪 于露 李宗泽 张家悦 杨菁 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期329-334,共6页

目的:探讨肌肽对大鼠血管性认知功能障碍(VCI)的保护作用,并阐明其作用机制。方法:50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组(双侧颈总动脉夹闭10 min→再灌注10 min→夹闭10 min)和不同剂量肌肽组(双侧颈总动脉夹闭10 min→再灌注10 min→夹... 目的:探讨肌肽对大鼠血管性认知功能障碍(VCI)的保护作用,并阐明其作用机制。方法:50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组(双侧颈总动脉夹闭10 min→再灌注10 min→夹闭10 min)和不同剂量肌肽组(双侧颈总动脉夹闭10 min→再灌注10 min→夹闭10 min+100、300和900 mg·kg^-1·d^-1肌肽),每组10只。肌肽于造模前21 d至造模后12 d灌胃给药,每日1次。于术后第7天开始进行水迷宫实验测定各组大鼠学习记忆能力;术后第12天取大鼠海马,高效液相色谱(HPLC)法测定各组大鼠海马组织中肌肽和还原性谷胱甘肽(GSH)水平。免疫组织化学法观察各组大鼠海马CA1区中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达情况,Western blotting法检测各组大鼠海马组织中磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达水平,ELISA法检测各组大鼠海马组织中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠海马CA1区锥体细胞部分缺失,逃避潜伏期明显延长(P<0.01),在平台象限停留时间明显缩短(P<0.01);大鼠海马组织中肌肽和GSH水平降低(P<0.01),GFAP阳性细胞数增加,p-NF-κB p65蛋白表达水平升高(P<0.01),IL-1β和TNF-α水平升高(P<0.01)。与模型组比较,不同剂量肌肽组大鼠海马CA1区锥体细胞排列整齐,逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),平台象限停留时间明显增加(P<0.01);大鼠海马组织中肌肽和GSH水平升高(P<0.05或P<0.01),GFAP阳性细胞数减少,p-NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.01),IL-1β和TNF-α水平降低(P<0.01)。结论:肌肽对大鼠VCI具有保护作用,其作用机制可能与提高大鼠抗氧化能力、抑制NF-κB途径激活、进而抑制星形胶质细胞的异常激活并减少炎症有关。 展开更多

关键词 肌肽 血管性认知障碍 核因子ΚB 谷胱甘肽 星形胶质细胞

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红景天苷通过COX-2/PGE2/VEGF通路对糖尿病大鼠视网膜病变的影响 被引量：7

11

作者 张庆龙 赵宁 李芷鉴 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第8期731-735,共5页

目的探讨红景天苷对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠视网膜病变(DR)的保护作用。方法将32只雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组及红景天苷低、高剂量(50、200 mg/kg)组。腹腔注射STZ建立糖尿病大鼠模型。模型诱导成功后,灌胃给予红景... 目的探讨红景天苷对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠视网膜病变(DR)的保护作用。方法将32只雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组及红景天苷低、高剂量(50、200 mg/kg)组。腹腔注射STZ建立糖尿病大鼠模型。模型诱导成功后,灌胃给予红景天苷12周。苏木素和伊红染色观察视网膜组织的病理学改变;荧光定量PCR、免疫印迹及酶联免疫吸附试验检测视网膜内相关mRNA和蛋白的表达情况。结果与对照组相比,糖尿病组视网膜神经节细胞层排列紊乱、视网膜神经节细胞(RGC)密度明显降低(P<0.05);视网膜环氧合酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.01),前列腺素E2(PGE2)分泌水平显著升高(P<0.01)。与糖尿病组相比,红景天苷低剂量组COX-2和VEGF mRNA表达以及PGE2分泌水平显著下降(P<0.05);红景天苷高剂量组RGC层排列情况有所改善,RGC密度明显升高(P<0.05),COX-2和VEGF mRNA及蛋白表达(P<0.05)和PGE2分泌水平(P<0.01)显著降低。结论红景天苷能改善糖尿病大鼠视网膜组织病理改变,其机制可能与抑制COX-2/PGE2/VEGF通路相关。 展开更多

关键词 红景天苷 糖尿病视网膜病变 COX-2/PGE2/VEGF信号通路

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肌肽对脂多糖诱导星形胶质细胞炎症因子释放的抑制作用及其机制 被引量：4

12

作者 白雪 于露 +3 位作者 杨文强 何鑫 杨新生 杨菁 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期330-337,共8页

目的:探讨肌肽对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞(AS)炎症因子释放的影响,初步阐明其作用机制。方法:体外培养新生大鼠大脑皮质AS并纯化,随机分为对照组、LPS组和LPS+肌肽组(10、30和90 mmol·L~(-1)肌肽)。对照组只加入完全培养基,... 目的:探讨肌肽对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞(AS)炎症因子释放的影响,初步阐明其作用机制。方法:体外培养新生大鼠大脑皮质AS并纯化,随机分为对照组、LPS组和LPS+肌肽组(10、30和90 mmol·L~(-1)肌肽)。对照组只加入完全培养基,LPS组培养基中加入终浓度为1 mg·L~(-1)LPS,体外刺激细胞24 h构建炎症损伤模型,LPS+肌肽组培养基中预先分别加入10、30和90 mmol·L~(-1)肌肽,培养1 h后再加入终浓度为1 mg·L~(-1)的LPS。MTT法检测各组AS存活率,ELISA法检测各组AS培养液中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,DCFHDA探针法检测各组AS中活性氧(ROS)水平,Hoechst 33258荧光染色法检测各组AS凋亡率,免疫荧光染色法测定各组AS中磷酸化核转录因子κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达情况和p-NF-κB p65阳性细胞数,采用Western blotting法检测各组AS中p-NF-κB p65蛋白表达水平。结果:与对照组比较,LPS组AS存活率明显降低(P<0.05),AS培养液中IL-1β和TNF-α水平升高(P<0.05),AS中ROS水平、AS凋亡率和p-NF-κB p65阳性细胞数均明显升高(P<0.05),AS中p-NF-κB p65蛋白表达水平升高(P<0.05)。与LPS组比较,LPS+肌肽组AS存活率明显升高(P<0.05),AS培养液中IL-1β和TNF-α水平降低(P<0.05),AS中ROS水平、AS凋亡率和p-NF-κB p65阳性细胞数均明显降低(P<0.05),AS中p-NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:肌肽可抑制LPS引起的AS中炎症因子IL-1β和TNF-α释放,其机制可能与肌肽抑制LPS诱导AS中ROS生成、进而抑制NF-κB p65激活有关。 展开更多

关键词 肌肽 脂多糖 星形胶质细胞 炎症因子 核转录因子κB p65

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肌肽对糖尿病肾病大鼠氧化应激及NF-κB信号通路的影响 被引量：5

13

作者 何鑫 杨文强 +4 位作者 李宗泽 于露 赵艳 鲁美丽 杨菁 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第3期289-294,共6页

目的探讨肌肽对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织的保护作用及其对氧化应激、NF-κB信号通路的影响。方法60只SPF级8周龄雄性SD大鼠,随机选取12只为对照组,其余予以高糖高脂饮食+链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型。注射链脲佐菌素3 d后,将符... 目的探讨肌肽对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织的保护作用及其对氧化应激、NF-κB信号通路的影响。方法60只SPF级8周龄雄性SD大鼠,随机选取12只为对照组,其余予以高糖高脂饮食+链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型。注射链脲佐菌素3 d后,将符合糖尿病标准大鼠随机分为模型组、肌肽(100、300、900 mg/kg)组。肌肽各组分别灌胃100、300、900 mg/kg肌肽,每日1次。8周后,检测空腹血糖(FBG)、血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿微量白蛋白(mAlb)。PAS染色法观察大鼠肾形态学变化;试剂盒检测肾组织的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;免疫组织化学及Western blot检测肾组织P-NF-κB P65蛋白的表达。结果DN大鼠建模成功。与模型组相比,肌肽组肾组织病理损伤明显减轻。肌肽各组大鼠mAlb、FBG、BUN水平下降,呈量-效依赖性关系(P<0.05),而SOD、GSH、GSH-Px的含量逐级升高,同时MDA和P-NF-κB P65含量减少。结论肌肽对DN模型大鼠肾组织具有保护作用,其机制可能与抑制氧化应激和NF-κB信号通路异常激活有关。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 肌肽 氧化应激 NF-ΚB 大鼠模型

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微球蛋白1对胃癌细胞侵袭和迁移的影响及其机制 被引量：3

14

作者 王馨梦 李启阳 +1 位作者 刘超 肖建英 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期251-257,471,共8页

目的:探讨微球蛋白1 (MCRS1)在胃癌细胞中的过表达对胃癌细胞侵袭和迁移的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:选择胃癌BGC-823细胞、SGC-7901细胞和正常胃黏膜上皮GES-1细胞进行培养,采用Western blotting法检测MCRS1在3种细胞中表达情... 目的:探讨微球蛋白1 (MCRS1)在胃癌细胞中的过表达对胃癌细胞侵袭和迁移的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:选择胃癌BGC-823细胞、SGC-7901细胞和正常胃黏膜上皮GES-1细胞进行培养,采用Western blotting法检测MCRS1在3种细胞中表达情况,并选择MCRS1蛋白表达低的胃癌BGC-823细胞进行后续实验。构建MCRS1重组质粒,选取处于对数生长期的胃癌BGC-823细胞,设立空白组、空载体转染组和MCRS1转染组,利用Lipo 3000将质粒转染入BGC-823细胞,采用Western blotting法检测侵袭相关蛋白上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)及Snail的表达水平,采用细胞划痕实验和Transwell小室实验检测各组胃癌细胞的迁移和侵袭能力。结果:与正常胃黏膜上皮GES-1细胞比较,MCRS1在胃癌BGC-823细胞中表达水平较低(P<0.01),而在胃癌SGC-7901细胞中表达水平较高(P<0.01)。PCR鉴定和测序分析,MCRS1重组质粒构建成功。与空白组和空载体转染组比较,MCRS1转染组MCRS1和E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),N-cadherin和Snail蛋白表达水平明显降低(P<0.01),细胞迁移率明显降低(P<0.01),侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。结论:过表达MCRS1能抑制胃癌BGC-823细胞的迁移和侵袭,其机制可能与E-cadherin蛋白表达增加、N-cadherin和Snail蛋白表达降低有关。 展开更多

关键词 微球蛋白1 胃肿瘤 上皮间充质转化 侵袭 迁移 BGC-823细胞

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肌肽对糖尿病肾病大鼠肾组织AKT/mTOR通路及自噬的影响 被引量：3

15

作者 任毅 卢金莹 +3 位作者 于露 李宗泽 王高 杨菁 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1965-1970,共6页

目的探究肌肽对糖尿病肾脏病变的保护作用及机制。方法将70只大鼠随机分成对照组(CON组,n=14)和高糖高脂组(n=56)。CON组普通饲料喂养,高糖高脂组采用高糖高脂喂养,并结合腹腔注射链脲佐菌素建立损伤模型,将制备损伤模型成功的大鼠随机... 目的探究肌肽对糖尿病肾脏病变的保护作用及机制。方法将70只大鼠随机分成对照组(CON组,n=14)和高糖高脂组(n=56)。CON组普通饲料喂养,高糖高脂组采用高糖高脂喂养,并结合腹腔注射链脲佐菌素建立损伤模型,将制备损伤模型成功的大鼠随机分为糖尿病组(DM组,n=12)及肌肽低(Car-L,n=13)、中(Car-M,n=13)、高剂量组(Car-H,n=13),分别按照0、100、300和900 mg/(kg·d)肌肽灌胃。测量大鼠体质量及血糖,实验结束时收集大鼠24 h尿液、血清及肾脏,分别测量尿量、尿蛋白含量、血肌酐(Scr)、肾脏质量及HE染色,TBA法检测肾脏组织丙二醛(MDA)含量、NBT法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、Western blot法检测肾脏组织中蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、微管相关轻链蛋白1轻链3(LC3)、选择性自噬接头蛋白(p62)的表达。结果与CON组相比,DM组大鼠出现毛色暗淡、毛发潮湿等现象;体质量下降,血糖、尿蛋白含量、24h尿量、Scr、肾脏质量均上升;肾小球肿胀变形,肾小管狭窄;SOD活性下降、MDA含量上升;肾脏组织中p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR比值降低,LC3II/I比值和p62蛋白表达增高(P<0.01)。与DM组相比,肌肽各组的大鼠毛发恢复光泽、体质量回升,血糖、尿蛋白含量、24 h尿量、Scr、肾脏质量有所下降;肾小球肿胀变形、肾小管狭窄程度有所缓解;SOD活性上升、MDA含量下降(P<0.01);肾脏组织中p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR比值升高、LC3 II/I比值降低、p62蛋白表达降低(P<0.01)。结论肌肽对糖尿病大鼠肾脏病变具有保护作用,其保护作用与肌肽抑制氧化应激,激活AKT/mTOR通路,进而恢复自噬功能有关。 展开更多

关键词 肌肽 糖尿病肾病 自噬 蛋白激酶B MTOR

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组织芯片技术检测SIRT6蛋白在结肠癌组织中的表达及其临床意义 被引量：3

16

作者 李婳 曹艳莎 +2 位作者 赵津平 任甫 李宁 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期893-898,I0007,共7页

目的:探讨NAD依赖性蛋白脱乙酰基酶sirtuin-6(SIRT6)蛋白在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌患者临床病理参数之间的关系,阐明SIRT6蛋白在结肠癌发生发展中的作用。方法:选取术前均未行放化疗的100例结肠癌患者的结肠癌组织和癌旁组织,... 目的:探讨NAD依赖性蛋白脱乙酰基酶sirtuin-6(SIRT6)蛋白在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌患者临床病理参数之间的关系,阐明SIRT6蛋白在结肠癌发生发展中的作用。方法:选取术前均未行放化疗的100例结肠癌患者的结肠癌组织和癌旁组织,采用组织芯片技术和免疫组织化学SP法检测结肠癌组织和癌旁组织中SIRT6蛋白表达水平,采用秩和检验分析SIRT6蛋白表达水平与结肠癌患者临床病理参数的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线、单因素和多因素生存分析法分析结肠癌患者临床病理参数与预后的关系。结果: SIRT6蛋白在结肠癌组织细胞核和胞浆中的表达水平均明显高于癌旁组织(Z=-4.603,P=0.000;Z=-7.610,P=0.000)。Kaplan-Meier单因素和多因素分析,细胞核中SIRT6蛋白高表达的结肠癌患者预后更好且是其独立预后影响因子(HR=2.345,P=0.003),年龄较小及T、N分期较低的患者生存率更高(HR=0.394,P=0.004;HR=2.301,P=0.012;HR=2.423,P=0.048),细胞浆中SIRT6蛋白高表达与结肠癌患者预后无关联性(HR=1.309,P=0.333)。结论: SIRT6蛋白在结肠癌细胞核中高表达可作为结肠癌预后良好的评价指标。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 NAD依赖性蛋白脱乙酰基酶sirtuin-6 组织芯片 免疫组织化学

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氧化苦参碱对氧糖剥夺/复糖复氧损伤星形胶质细胞AMPK/mTOR途径及自噬的影响 被引量：2

17

作者 崔明宇 卢金莹 +5 位作者 于露 王宇彤 边疆 王高 杨新霞 杨菁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2331-2338,共8页

目的探讨AMPK/mTOR通路调节的自噬在氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)抑制氧糖剥夺/复糖复氧(oxygen-glucose deprivation and reperfusion injury,OGD/R)对星形胶质细胞(astrocyte,AS)损伤中的作用。方法将分离纯化AS随机分为对照组(CON组)... 目的探讨AMPK/mTOR通路调节的自噬在氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)抑制氧糖剥夺/复糖复氧(oxygen-glucose deprivation and reperfusion injury,OGD/R)对星形胶质细胞(astrocyte,AS)损伤中的作用。方法将分离纯化AS随机分为对照组(CON组)、模型组(OGD/R组)和OGD/R+OMT组(0.1、0.2、0.4 mmol·L^(-1))。MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33342和Annexin V-FITC法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;Western blot法检测p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、Beclin 1、LC3B、p62和β-actin的表达。同时通过加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)探究自噬在OMT药效中作用。结果与CON组相比,OGD/R组细胞存活率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率及细胞内ROS生成明显增加(P<0.01),p-AMPK/AMPK和LC3BⅡ/Ⅰ的比值及Beclin 1含量升高(P<0.01),p-mTOR/mTOR比值及p62含量降低(P<0.01)。与OGD/R组相比,OGD/R+OMT组细胞存活率明显升高(P<0.01),细胞凋亡率减少(P<0.01),细胞内ROS生成明显减低(P<0.01),p-AMPK/AMPK和LC3BⅡ/Ⅰ的比值降低(P<0.01),p-mTOR/mTOR比值及p62含量升高(P<0.01)。与OGD/R组相比,OGD/R+3-MA组细胞存活率明显提高(P<0.01),同时OGD/R+3-MA组存活率与OGD/R+OMT及OGD/R+OMT+3-MA组相比均有明显差异(P<0.01)。结论OMT对OGD/R诱导的AS具有保护作用,其中作用与抑制AMPK/mTOR信号通路及改善自噬有关。 展开更多

关键词 氧化苦参碱 氧糖剥夺/复糖复氧 星形胶质细胞 自噬 氧化应激 AMPK/mTOR途径

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胰岛素样生长因子1受体抑制剂NVP-AEW541对ESCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制 被引量：2

18

作者 曹雅杰 包晓红 +4 位作者 李书珍 耿海营 蔡曾晓瑞 代春美 李宁 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1131-1138,共8页

目的:探讨胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂NVP-AEW541对3种食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞KYSE30、KYSE450和TE-1增殖、迁移和侵袭的影响,初步阐明其作用机制。方法:体外培养的KYSE30、KYSE450和TE-1 ESCC细胞作为实验对象,分为对照组[0... 目的:探讨胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂NVP-AEW541对3种食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞KYSE30、KYSE450和TE-1增殖、迁移和侵袭的影响,初步阐明其作用机制。方法:体外培养的KYSE30、KYSE450和TE-1 ESCC细胞作为实验对象,分为对照组[0μmol·L^(-1) NVP-AEW541,1 mLRPMI 1640完全培养基+1μL二甲亚砜(DMSO)]和实验组(2、4、6、8和10μmol·L^(-1) NVP-AEW541),对照组和实验组细胞处理48 h后,CCK-8法检测各组细胞存活率;对照组和实验组(4和6μmol·L^(-1) NVP-AEW541)细胞处理0、6、12和24 h后,细胞划痕实验检测各组细胞迁移率;对照组和实验组(6μmol·L^(-1) NVP-AEW541)细胞处理48 h后,Transwell实验检测侵袭细胞数;对照组和实验组(2、4和6μmol·L^(-1) NVP-AEW541)细胞处理48 h后,Western blotting法检测各组细胞中磷酸化IGF-1R(p-IGF-1R)和上皮-间质转化(EMT)相关蛋白N-Cadherin和Snail-1的蛋白表达水平。结果:与对照组比较,实验组KYSE30、KYSE450和TE-1细胞存活率均随NVP-AEW541浓度增加而降低(P<0.05),实验组(10μmol·L^(-1))KYSE30、KYSE450和TE-1细胞存活率明显降低(P<0.01),实验组(6μmol·L^(-1))KYSE30、KYSE450和TE-1细胞迁移率随NVP-AEW541浓度增加而降低(P<0.01),实验组(6μmol·L^(-1))KYSE30、KYSE450和TE-1细胞侵袭细胞数明显减少(P<0.01),且实验组细胞中p-IGF-1R、N-Cadherin和Snail-1蛋白的表达水平均明显降低(P<0.01)。结论:NVP-AEW541能够明显抑制ESCC细胞增殖,通过抑制N-Cadherin和Snail-1蛋白表达,阻碍EMT,抑制ESCC细胞迁移和侵袭。 展开更多

关键词 NVP-AEW541 食管鳞癌细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭

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SIRT5通过调控G6PD促进结肠癌细胞的糖代谢及增殖 被引量：2

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作者 刘迪 张秀梅 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期876-881,共6页

目的:探讨SIRT5对结肠癌细胞糖代谢和增殖的作用及其可能的作用机制,以及SIRT5、G6PD在结肠癌组织中的表达情况。方法:Western blot法检测SIRT5蛋白在结肠癌细胞系HCT116、HT29中的表达水平,构建SIRT5基因过表达及siRNA沉默载体分别转染... 目的:探讨SIRT5对结肠癌细胞糖代谢和增殖的作用及其可能的作用机制,以及SIRT5、G6PD在结肠癌组织中的表达情况。方法:Western blot法检测SIRT5蛋白在结肠癌细胞系HCT116、HT29中的表达水平,构建SIRT5基因过表达及siRNA沉默载体分别转染到SIRT5低表达与SIRT5高表达结肠癌细胞系,葡萄糖氧化酶法、比色法分别检测培养液中葡萄糖、乳酸的含量;CCK-8实验检测细胞活力;克隆形成实验检测细胞增殖能力。RT-PCR与Western blot法分别检测SIRT5对G6PD mRNA及蛋白表达的调控;免疫组织化学法检测结肠癌组织中SIRT5、G6PD的表达情况。结果:沉默SIRT5后,细胞培养液中葡萄糖的浓度明显升高、乳酸的浓度明显降低,细胞的活性和增殖能力明显减弱;过表达SIRT5后,细胞培养液中葡萄糖的浓度明显降低、乳酸的浓度明显升高,细胞的活性和增殖能力明显增强。SIRT5正向调控G6PD的基因表达与单独转染si-SIRT5相比,共转染si-SIRT5与G6PD质粒恢复了结肠癌细胞的糖代谢及增殖能力;SIRT5、G6PD在结肠癌组织中的表达明显高于癌旁组织。结论:SIRT5、G6PD在结肠癌组织中高表达,SIRT5通过调控G6PD促进结肠癌细胞糖代谢和增殖。 展开更多

关键词 结肠癌 SIRT5 G6PD 有氧糖酵解

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BAG3蛋白Ser187磷酸化位点定点突变促进FRO细胞迁移和侵袭 被引量：2

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作者 李宁 曹艳莎 +3 位作者 李婳 赵津平 任甫 李克研 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期868-875,共8页

Bcl-2相关抗凋亡蛋白3(Bcl-2 associated athanogene 3,BAG3)是BAG家族的重要成员,调节肿瘤细胞的黏附、迁移和侵袭,促进恶性肿瘤的复发和转移。我们的前期工作证明,PKCδ可催化BAG3的Ser187位点磷酸化。本文研究BAG3蛋白磷酸化修饰对... Bcl-2相关抗凋亡蛋白3(Bcl-2 associated athanogene 3,BAG3)是BAG家族的重要成员,调节肿瘤细胞的黏附、迁移和侵袭,促进恶性肿瘤的复发和转移。我们的前期工作证明,PKCδ可催化BAG3的Ser187位点磷酸化。本文研究BAG3蛋白磷酸化修饰对甲状腺癌FRO细胞迁移、侵袭的影响及其可能机制。通过定点突变的方法,将BAG3蛋白的187位丝氨酸突变为天冬氨酸(S187D)模拟磷酸化,或者将丝氨酸突变为丙氨酸(S187A)抵抗磷酸化,从而间接推测BAG3蛋白Ser187位点磷酸化对FRO细胞迁移、侵袭的影响。FRO细胞转染野生型BAG3、模拟磷酸化型BAG3、阻碍磷酸化型BAG3,通过划痕愈合实验和Transwell转移小室实验,观察BAG3蛋白磷酸化对FRO细胞迁移、侵袭的影响。进一步通过PKC激活剂和抑制剂,研究BAG3蛋白磷酸化对FRO细胞迁移、侵袭影响的机制。结果显示,FRO BAG3-S187D模拟磷酸化组细胞在培养24 h、48 h时,划痕愈合率分别达到35%和80%。Transwell及三维Matrigel转移小室实验显示,平均每个视野穿膜细胞数分别达到180和350个,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。PKC激活剂TPA及抑制剂Rottelerin处理FRO WT-BAG3细胞,24 h愈合率分别为40%和15%,48 h划痕愈合率分别为55%和18%,Transwell穿膜细胞数分别为240和70个,与对照组细胞相比,差异显著(P<0.05)。本研究提示,BAG3蛋白Ser187磷酸化修饰,可促进甲状腺癌FRO细胞迁移、侵袭,其机制可能与PKC信号通路有关。 展开更多

关键词 Bcl-2相关抗凋亡蛋白3 磷酸化 迁移 侵袭

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